表皮型脂肪酸结合蛋白-5基因沉默对人卵巢癌细胞A2780增殖、凋亡及侵袭力的影响

目的探讨通过siRNA干扰技术沉默表皮脂肪酸结合蛋白(FABP)-5基因表达对人卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法以人卵巢癌A2780细胞为研究对象,根据FABP-5 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列,实施瞬时转染卵巢癌A2780细胞。将人卵巢癌A2780细胞分为FABP-5 siRNA组,阴性对照组、空白对照组。用逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)和Western印迹法分别从mRNA水平和蛋白水平检测FABP-5基因的表达。细胞计数试剂盒(CCK)-8法测定细胞体外增殖能力;流式细胞技术(FCM)检测各组细胞周期和凋亡的变化情况,划痕愈合实验、细胞侵袭实验评价沉默FABP-5基因对人卵巢癌A2780细胞迁移及侵袭能力的影响。结果 RT-PCR和Western印迹法显示,FABP-5 siRNA组较阴性对照组和空白对照组的FABP-5 mRNA和蛋白相对表达水平均显著降低。FABP-5 siRNA组细胞的生长速度明显减慢,细胞周期阻滞在G0/G1期,S期细胞数减少;与阴性对照组和空白对照组相比,FABP-5 siRNA组细胞的凋亡率明显升高(P<0.01),迁移、侵袭力显著下降(P<0.05)。结论特异性干扰FABP-5基因表达可抑制人卵巢癌A2780细胞的迁移和侵袭能力,并抑制肿瘤细胞增殖,因此,FABP-5的siRNA序列可能成为治疗宫颈癌的有效靶点。

中枢神经系统胶质母细胞瘤重组人脂肪酸结合蛋白-5、细胞维甲酸结合蛋白-Ⅱ表达及维甲酸疗效研究

目的检测人体中枢神经系统胶质母细胞瘤中脂肪酸结合蛋白-5（FABP-5）、细胞维甲酸结合蛋白-Ⅱ（CRABP-Ⅱ）表达，评估维甲酸对细胞增殖的抑制作用。方法随机性选取96例中枢神经系统胶质母细胞瘤病例，提取胶质母细胞瘤细胞悬液后给予加入维甲酸储存液，经组织免疫荧光化学检测分析FABP-5、CRABP-Ⅱ表达评估临床疗效。结果选取研究标本中，FABP-5阳性表达者为45例（＋，46．88％），而CRABP-Ⅱ的阳性表达者为41例（＋，42．71％）；经维甲酸处理后，在TG-905细胞中FABP-5表达明显下降，CRABP-Ⅱ则表达明显上升，而在U87MG细胞中FABP-5表达轻度上升，CRABP．Ⅱ则表达个别细胞增强。结论经选取胶质母细胞瘤病理样本进行临床研究证实，在胶质母细胞瘤组织中有较高的FABP-5、CRABP-Ⅱ表达，且个体间差异有统计学意义（P〈0．05），经加入维甲酸后显示耐药细胞中FABP-5表达均明显增高，而在敏感细胞中CRABP-Ⅱ表达明显上升，这表明维甲酸可经FABP-5信号通路抑制瘤体组织细胞生长、促进分化及凋亡。

黄药子醇提物对人胃癌细胞凋亡及FABP-5表达的影响

目的:探讨黄药子醇提物对人胃癌MGC-803细胞的侵袭、凋亡及FABP-5表达的影响。方法:制备黄药子醇提物,以人胃癌细胞MGC-803细胞为研究对象,根据细胞培养液所含黄药子醇提物的不同浓度,将实验分为空白对照组(等量无菌水)、黄药子醇提物低浓度组(60 mg/L)和高浓度组(120 mg/L)。分别以CCK-8法检测体外细胞增殖能力;流式细胞技术观测细胞周期及凋亡的情况变化;TUNEL染色观察各组细胞的凋亡情况;细胞侵袭小室法观测体外细胞的侵袭力变化,以RT-PCR法和Western blot法从mRNA水平和蛋白水平对FABP-5基因的表达进行检测,每组实验重复3次。结果:黄药子醇提物高浓度组和低浓度组MGC-803细胞的生长速度明显减缓,G1期细胞比例降低,S期和G2/M期比例增高;与空白对照组相比,高浓度组和低浓度组细胞的凋亡率明显升高(P<0.01),增殖、侵袭能力显著下降(P<0.05),高浓度组和低浓度组细胞相比促进凋亡和抑制FABP-5表达的作用更明显(P<0.05)。RT-PCR和Western blot显示,黄药子醇提物高浓度组和低浓度组较空白对照组的FABP-5 mRNA和蛋白表达都明显下降。结论:黄药子醇提物可加快人胃癌MGC-803细胞的凋亡,抑制其增殖力和侵袭能力,并对FABP-5 mRNA和蛋白的表达起到抑制作用,提示此机制可能使其参与了抗肿瘤的作用。