益气活血化痰方对老年颈动脉粥样硬化患者低密度脂蛋白免疫复合物影响的临床研究

目的:探讨益气活血化痰法中药复方对颈动脉粥样硬化患者的疗效,并研究其机制是否与免疫调节氧化低密度脂蛋白免疫复合物有关,从而探讨中医药免疫调节抗动脉粥样硬化疗效和靶点机制。方法:以老年颈动脉粥样硬化患者为研究对象,随机分为两组(实验组予益气活血化痰方加辛伐他汀,对照组予辛伐他汀)干预12周,实验结束前后各组患者予以中医证候评分、颈动脉B超检查(记录IMT、RI、Course积分)、ELISA法检测血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白及低密度脂蛋白免疫复合物,统计分析数据。结果:实验结束后组内前后对比,实验组和对照组血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白均明显下降(P<0.01),LDL-IC水平有所下降(P<0.05);实验后实验组LDL-IC水平低于对照组(P<0.05),但两组间血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平无明显差异(P>0.05)。实验结束后组内前后对比,实验组和对照组颈动脉Course积分、颈动脉内-中膜厚度、阻力指数均无明显差异(P>0.05),试验后组间比较亦无明显差异(P>0.05)。实验结束后组间对比,实验组中医证候积分较对照组有明显好转(P<0.01)。表明联用益气活血化痰方具有降低颈动脉粥样硬化患者LDL-IC水平的作用,并且能够明显改善患者症状。结论:他汀类药物联用益气活血化痰方具有更强的抗动脉粥样硬化和改善症状的作用,其机制可能是调节免疫反应从而降低LDL-IC,减轻动脉粥样硬化。

复杂冠状动脉病变患者血清低密度脂蛋白免疫复合物的变化及意义

目的:探讨低密度脂蛋白循环免疫复合物(LDL-IC)在复杂冠状动脉病变发生发展过程中的作用和临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定139例冠心病组患者及111例正常对照组的血清LDL-IC浓度。根据冠状动脉造影结果将冠心病组分为多支病变组、双支病变组及单支病变组;弥漫性病变组及局限性病变组;重度狭窄组及轻度狭窄组进行比较。结果:①冠状动脉多支病变组患者LDL-IC水平显著高于双支病变组患者[(2.75±1.22)AUvs(2.35±0.83)AU,P<0.05]和单支病变组患者[(2.75±1.22)AUvs(1.82±0.50)AU,P<0.01]。②冠状动脉弥漫性病变组LDL-IC水平高于局限性病变组患者[(3.06±1.07)AUvs(1.72±0.32)AU,P<0.01]及正常对照组[(3.06±1.07)AUvs(1.55±0.71)AU,P<0.01]。③冠状动脉重度狭窄组LDL-IC水平高于轻度狭窄组患者[(2.88±1.10)AUvs(1.82±0.50)AU,P<0.01]及正常对照组[(2.88±1.10)AUvs(1.55±0.71)AU,P<0.01]。结论:LDL-IC与复杂冠状动脉病变的发生发展之间可能存在一定的相关性。

急性冠状动脉综合征患者血浆低密度脂蛋白免疫复合物的变化及意义

目的:探讨低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)在急性冠状动脉综合征(ACS)发生发展过程中的作用及其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法测定139例冠心病患者(ACS组76例,非ACS组63例)及111例正常对照组的血清LDL-IC浓度。根据冠状动脉造影结果将冠心病组分为多支病变组(病变≥2支)及单支病变组(1支病变)进行比较。结果:①ACS患者LDL-IC水平显著高于非ACS冠心病患者[(2.78±1.08)AU(相对单位)vs(1.74±0.45)AU,P<0.01]和正常对照组[(2.78±1.08)AUvs(1.55±0.71)AU,P<0.01]。②多支病变组LDL-IC水平高于单支病变组[(2.60±1.10)AUvs(1.82±0.50)AU,P<0.01]及正常对照组[(2.60±1.10)AUvs(1.55±0.71)AU,P<0.01]。③LDL-IC水平与氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平呈显著正相关(r=0.348,P<0.01)。结论:LDL-IC与ACS的发生发展及冠状动脉病变程度之间可能存在一定的相关性。

低密度脂蛋白循环免疫复合物对U937细胞基质金属蛋白酶-1及其抑制物的作用

目的探讨低密度脂蛋白循环免疫复合物(LDL-IC)对U937细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA表达的影响。方法分别采用不同浓度的天然低密度脂蛋白(N-LDL)、氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)及其免疫复合物作用U937细胞,通过半定量RT-PCR分析U937细胞中MMP-1和TIMP-1基因表达的变化。结果正常U937细胞几乎不表达MMP-1,而高表达TIMP-1。N-LDL对细胞MMP-1和TIMP-1 mRNA表达没有影响。Ox-LDL能引起MMP-1轻度表达,但显著地下调TIMP的表达;而天然、氧化LDL的循环免疫复合物均非常显著地增加MMP-1和降低TIMP-1的mRNA表达(P<0.001),且较Ox-LDL对MMP-1的作用更为显著(P<0.001),并具剂量效应。结论N-LDL-IC和Ox-LDL-IC增强U937细胞MMP-1 mRNA表达,下调其抑制物TIMP-1的表达。

人oxLDL自身免疫复合物的体外致动脉粥样硬化作用

目的:观察oxLDL自身免疫复合物对U937巨噬样细胞泡沫化和活化的影响,以探讨oxLDL免疫学反应致动脉粥样硬化的机制。方法:采用密度离心法从健康人血浆中提取低密度脂蛋白(LDL),用铜离子氧化成oxLDL;用亲和层析法从136例住院患者血清中提取oxLDL自身抗体。在体外制成2种形式不同的免疫复合物:聚乙二醇沉淀的不溶性免疫复合物(PEG IC)和RBC吸附的可溶性免疫复合物(RBC IC),把这2种免疫复合物加至U937巨噬样细胞的培养基中,以oxLDL作阳性对照,并用热聚合人γ球蛋白(HAGG)封闭Fcγ受体作阻断对照,检测干预后的各组U937巨噬样细胞内胆固醇和胆固醇酯及培养基中基质金属蛋白酶1 (MMP 1 )的水平。结果:RBC IC干预组与RBC吸附oxLDL(RBC oxLDL)干预组比较,U937巨噬样细胞培养基中MMP 1蛋白表达[ (0. 769±0. 030)ng/mlvs(0. 513±0. 034)ng/ml,P<0. 01]和细胞内胆固醇酯蓄积[ (20. 271±1. 668)μg/mgvs(17. 226±1. 298)μg/mg,P<0. 05]明显升高;而在PEG IC组这种作用则更为明显,且呈剂量依赖性。用10mg/ml的HAGG封闭Fcγ受体后,MMP 1的水平下降约71%,其对巨噬样细胞泡沫化和活化的作用都受到明显的抑制。结论:oxLDL自身免疫复合物能够促进巨噬细胞泡沫化和活化,

脂蛋白(a)免疫复合物对U937细胞基质金属蛋白酶1及其抑制物的作用

目的探讨脂蛋白(a)免疫复合物对U937细胞基质金属蛋白酶1及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1mRNA表达的影响。方法分别采用不同浓度的天然脂蛋白(a)、氧化型脂蛋白(a)及其免疫复合物作用U937细胞,通过半定量RT-PCR分析U937细胞中基质金属蛋白酶1和组织金属蛋白酶抑制剂1基因表达的变化。结果正常U937细胞低表达基质金属蛋白酶1(0.076±0.012),而高表达组织金属蛋白酶抑制剂1(0.973±0.031)。等量的天然脂蛋白(a)、氧化型脂蛋白(a),及其免疫复合物作用后,基质金属蛋白酶1mRNA表达量分别为0.361±0.016,0.330±0.019,0.106±0.006和0.089±0.008;组织金属蛋白酶抑制剂1表达量分别为0.229±0.017,0.360±0.018,0.157±0.025和0.967±0.031。天然脂蛋白(a)对细胞基质金属蛋白酶1和组织金属蛋白酶抑制剂1mR-NA表达没有影响。氧化型脂蛋白(a)引起基质金属蛋白酶1轻度表达,但显著地下调组织金属蛋白酶抑制剂1的表达;而天然、氧化型脂蛋白(a)免疫复合物均非常显著地增加基质金属蛋白酶1和降低组织金属蛋白酶抑制剂1的mRNA表达(P<0.001),且较氧化型脂蛋白(a)对基质金属蛋白酶1的作用更为显著(P<0.001),并呈剂量效应关系。结论脂蛋白(a)免疫复合物增强U937细胞基质金属蛋白酶1mRNA表达,下调其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1的表达。

低密度脂蛋白免疫复合物对单核细胞源性巨噬细胞胆固醇代谢及低密度脂蛋白受体表达的影响

目的研究动脉粥样硬化过程中低密度脂蛋白免疫复合物对单核细胞源性巨噬细胞胆固醇代谢和低密度脂蛋白受体表达的影响。方法以佛波酯刺激分化的THP1细胞作为单核细胞源性巨噬细胞模型。通过胆固醇酶联法测定细胞内胆固醇含量,逆转录—聚合酶链反应检测细胞低密度脂蛋白受体mRNA的表达,Westernblot检测细胞低密度脂蛋白受体蛋白的表达。结果与低密度脂蛋白组、阴性组及IgG免疫复合物组比较,低密度脂蛋白免疫复合物组细胞内胆固醇水平明显增高,并且低密度脂蛋白受体mRNA及蛋白的表达增加。结论低密度脂蛋白免疫复合物能显著增加巨噬细胞内胆固醇含量,亦能够促进低密度脂蛋白受体mRNA与蛋白的表达,提示低密度脂蛋白免疫复合物在动脉粥样硬化进展过程中起重要的作用。

低密度脂蛋白免疫复合物对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯蓄积和一氧化氮释放的影响

目的探讨低密度脂蛋白免疫复合物对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯的蓄积和一氧化氮释放的影响。方法密度梯度超速离心从新鲜人血浆分离天然低密度脂蛋白,与抗低密度脂蛋白抗血清IgG组分制备低密度脂蛋白免疫复合物,低密度脂蛋白免疫复合物与小鼠腹腔巨噬细胞孵育后采用酶荧光法检测细胞胆固醇酯含量,进行细胞形态学观察和组织化学分析,并用硝酸还原酶法测定细胞释放至培养基中的一氧化氮量。结果低密度脂蛋白免疫复合物剂量依赖性地诱导巨噬细胞内胆固醇酯的大量堆积,其效应显著强于氧化型低密度脂蛋白(P<0.01),经低密度脂蛋白免疫复合物处理的巨噬细胞呈典型泡沫细胞状,与猩红强染色,而天然低密度脂蛋白、抗低密度脂蛋白IgG处理的巨噬细胞内未见胆固醇酯的蓄积。此外,低密度脂蛋白免疫复合物剂量依赖性地抑制巨噬细胞一氧化氮的分泌。结论低密度脂蛋白免疫复合物不仅通过致小鼠腹腔巨噬细胞泡沫化,也通过损伤巨噬细胞分泌一氧化氮的功能参与致动脉粥样硬化作用。

氧化型低密度脂蛋白自身抗体及其免疫复合物与冠心病的相关性

目的 :探讨氧化型低密度脂蛋白 (ox- LDL )自身抗体及其免疫复合物与冠心病之间的关系。方法 :应用酶联免疫法对 6 1例确诊的冠心病患者、116例高血压患者和 12 3例健康对照组进行血清 ox- LDL自身抗体及其循环免疫复合物的检测 ,并同步测定 ox- LDL和血脂水平。结果 :冠心病患者自身抗体 Ig G[2 1.4 8(17.5 8～ 2 9.0 1) ]U/L和 Ig M[4 .71(3.88～ 7.0 6 ) ]U/ L以及 ox- L DL [0 .87(0 .4 4～ 1.0 8) ]mg/ L均显著高于高血压组 [15 .93(11.12～2 2 .2 6 ) U/ L、2 .5 4 (1.17～ 5 .0 5 ) U/ L、0 .32 (0 .16～ 0 .6 1) mg/ L ]和健康对照组 [11.12 (4.70～ 16 .5 7) U/ L、1.6 1(0 .6 0～ 3.0 3) U/ L、0 .2 3(0 .12～ 0 .36 ) mg/ L],P均 <0 .0 0 1,而循环免疫复合物 [2 .6 3(1.6 9～ 5 .90 ) U/ L ]显著低于高血压组 [15 .71(6 .2 5～ 2 8.74 ) U/ L]和健康对照组 [12 .5 4 (8.2 8～ 2 3.90 ) U/ L ],P均 <0 .0 0 1。ox- LDL与其自身抗体之间的关系在各组之间存在不一致性。结论 :ox- LDL自身抗体与循环免疫复合物在冠心病患者中的变化可能与ox- L DL及其自身抗体在冠状动脉硬化进程中发挥作用有关。

γ干扰素对低密度脂蛋白免疫复合物诱导U937细胞基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的:探讨γ干扰素(IFN-γ)对低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)诱导U937细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响。方法:采用不同浓度的LDL-IC诱导不同浓度的IFN-γ预处理的U937细胞,通过RT-PCR分析MMP-1 mRNA表达水平的变化。结果:正常U937细胞MMP-1表达量低。LDL-IC可增强U937细胞MMP-1mRNA的表达,而单独IFN-γ处理对MMP-1表达无影响;LDL-IC对经IFN-γ预处理的U937细胞作用效果较未经处理的更强(P<0.01),并具剂量效应。结论:IFN-γ可增加LDL-IC诱导的U937细胞MMP-1表达,加速动脉粥样硬化的发生、发展。

高脂血症患者血清脂蛋白(a)及其特异性循环免疫复合物水平

目的 :分析不同高脂血症患者脂蛋白 (a)〔Lp(a)〕及其特异性循环免疫复合物 (CIC)水平 ,探讨三酰甘油(TG)对Lp(a)及Lp(a) CIC水平的调节作用。 方法 :用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测法分析 2 32例不同高脂血症患者血浆Lp(a) ,Lp(a) CIC和低密度脂蛋白 (LDL) CIC水平。 结果 :Lp(a)水平在高TG组患者最低 ;高总胆固醇 (TC)组患者最高 ;而混合组患者水平低于对照组。Lp(a) CIC、LDL CIC在高TG组患者水平最低 ;高TC组患者最高。TG水平分别与Lp(a) (r=- 0 .15 ,P <0 .0 5 ) ,Lp(a) CIC (r =- 0 .2 0 ,P <0 .0 1)及LDL CIC (r =- 0 .2 14 ,P <0 .0 1)呈负相关。而Lp(a) CIC水平与Lp(a) (r =0 .6 5 ,P <0 .0 0 1)呈正相关 ,LDL CIC水平与LDL C (r =0 .4 3,P <0 .0 0 1)呈正相关。 结论 :高TG患者血浆Lp(a)及其CIC水平下降 ;不同高脂血症患者Lp(a) CIC、LDL CIC水平的变化随Lp(a)。

类风湿关节炎患者丙二醛修饰型低密度脂蛋白及低密度脂蛋白循环免疫复合物水平分析

目的分析类风湿关节炎患者丙二醛修饰型低密度脂蛋白、低密度脂蛋白循环免疫复合物及血脂水平,探讨其与心血管病高发生率的关系。方法选择类风湿关节炎患者55例,其中合并心血管疾病患者(并发症组)13例,单纯类风湿关节炎患者(单纯组)42例;正常对照组60例。采用酶联免疫吸附试验分别测定血浆丙二醛修饰型低密度脂蛋白和低密度脂蛋白循环免疫复合物水平,同时对受检者血脂和炎症指标进行检测。结果两组类风湿关节炎患者除载脂蛋白B高于对照组外(P<0.05),其它脂质和载脂蛋白水平无明显改变;并发症组与单纯组间脂质和载脂蛋白水平相似。并发症和单纯组血浆丙二醛修饰型低密度脂蛋白(分别为187.81±90.89和102.01±57.73mg/L)和低密度脂蛋白循环免疫复合物水平(分别为2.58±1.69和1.87±0.74AU)均明显高于对照组(分别为32.65±27.00mg/L和1.21±0.38AU,P<0.01),且并发症组高于单纯组(P<0.01或0.05)。低密度脂蛋白循环免疫复合物与C反应蛋白正相关(r=0.301,P=0.026),丙二醛修饰型低密度脂蛋白与血沉趋于相关(r=0.263,P=0.057)。结论类风湿关节炎患者丙二醛修饰型低密度脂蛋白和低密度脂蛋白循环免疫复合物水平显著升高,参与动脉粥样硬化的发生、发展过程。

2型糖尿病患者低密度脂蛋白免疫复合物升高与大血管病变的关系

目的探讨2型糖尿病患者低密度脂蛋白免疫复合物与大血管病变的关系。方法随机选择102例2型糖尿病患者:54例伴大血管病变(DM-MA组),48例无大血管病变(DM-MN组),ELISA法测定低密度脂蛋白免疫复合物血清(LDL-ICs)浓度。结果①血清LDL-ICs组间比较:DM-MA组[(78.31±17.53)AU]LDL-ICs较DM-NM组(38.16±5.34)AU显著升高(均P<0.05)。②血清LDL-ICs浓度与其他因素的直线相关回归分析:LDL-ICs与血清BMI、HbA1c、SBP、TC、DBP、TG浓度之间呈现显著正相关性(r值分别为:0.71、0.70、0.66、0.58、0.43和0.37,P<0.05);与血清HDL-C浓度之间呈现显著负相关(r=-0.76,P<0.05);与血清LDL-C浓度之间无明显的相关性(r=0.05,P>0.05)。结论2型糖尿病大血管病变患者的血清LDL-ICs水平显著升高。在2型糖尿病患者中,LDL-ICs与LDL-C之间无显著相关性,而与血清TG、TC、HDL-C、HbA1c之间呈现显著相关性。

血清低密度脂蛋白特异性循环免疫复合物的测定及其临床意义

为了建立血清低密度脂蛋白 (LDL)循环免疫复合物 (LDL CIC)的测定方法。利用酶联免疫吸附试验技术 ,以羊抗人IgG作包板以识别CIC中的抗体部分 ,以兔抗人LDL作酶标物识别CIC中的抗原部分。研究显示颈动脉粥样硬化病人血中的LDL CIC明显高于对照组 ,LDL CIC水平与血中LDL以及其他修饰型LDL含量无关。结果表明 ,该方法简便、稳定 ,LDL

低密度脂蛋白免疫复合物对单核细胞来源巨噬细胞胆固醇代谢和细胞因子分泌的影响

目的探讨低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)对单核细胞来源巨噬细胞胆固醇代谢和细胞因子分泌的影响。方法用胆固醇酶联法测定细胞内胆固醇含量,ELISA法检测培养上清TNFα和IL-1β水平。结果LDL-IC组细胞内胆固醇含量及上清TNFα、IL-1β水平均明显高于LDL、IgG-IC及阴性对照组。结论LDL-IC可以显著增加细胞内胆固醇含量与培养上清TNFα和IL-1β的水平,提示LDL-IC能通过干扰细胞脂质代谢及细胞因子分泌而在AS中起重要作用。

免疫复合物中抗氧化低密度脂蛋白抗体的检测

目的建立检测免疫复合物(IC)中抗氧化低密度脂蛋白抗体(ox-LDL-Ab)的ELISA法。方法以Cu2+-ox-LDL包被固相板,70 g/L聚乙二醇(PEG)沉淀免疫复合物(ox-LDL-IC),测定冠心病各组与对照组的ox-LDL-Ab,与检测ox-LDL-Ab的某试剂盒测定结果进行比较。结果抗原最佳包被浓度为7.5 mg/L;血清最佳加样量为200μl;酶标抗体工作浓度为1∶6 000;灵敏度18.5 mU/ml;批内变异系数3.6%、批间变异系数8.2%。平均回收率97.1%。对稳定型心绞痛(SAP)组和不稳定型心绞痛(UAP)组测定结果与某试剂盒测定的ox-LDL-Ab水平差异无统计学意义(P>0.05),而用本法测定IC中ox-LDL-Ab水平UAP组比SAP组显著增高(P<0.01)。结论测定IC中的ox-LDL-Ab有利于区分UAP组和SAP组患者。

血浆氧化型低密度脂蛋白水平与低密度脂蛋白循环免疫复合物的相关性

为探讨血浆氧化型低密度脂蛋白水平与低密度脂蛋白循环免疫复合物间关系。分别建立了以抗人IgG为包被抗体、酶标抗载脂蛋白B为检测抗体的低密度脂蛋白循环免疫复合物酶联免疫吸附试验;以抗氧化型低密度脂蛋白为包被抗体、酶标抗载脂蛋白B为检测抗体的氧化型低密度脂蛋白酶联免疫吸附试验。同时测定60例冠心病患者及50例对照人群低密度脂蛋白循环免疫复合物、氧化型低密度脂蛋白水平并进行相关性分析。结果发现,冠心病患者甘油三酯、脂蛋白(a)和载脂蛋白B水平均显著升高;高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白AI水平降低;且低密度脂蛋白循环免疫复合物(2.74±0.73比1.38±0.78,P<0.001)、氧化型低密度脂蛋白水平(595.5±194.8比440.3±175.0μg/L,P<0.001)均显著升高。低密度脂蛋白循环免疫复合物水平分别同血浆总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、脂蛋白(a)及载脂蛋白B正相关;同载脂蛋白AⅠ负相关。氧化型低密度脂蛋白水平亦分别同血浆总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、脂蛋白(a)及载脂蛋白B正相关。氧化型低密度脂蛋白水平与低密度脂蛋白循环免疫复合物亦呈正相关(r=0.313,p<0.005)。结果提示,氧化型低密度脂蛋白及循环免疫复合物升高是动脉粥样硬化发生的危险因素。

中药复方对豚鼠老年高脂血症脂蛋白和免疫复合物的影…

本文通过“老年高脂血症”动物模型证实，老龄豚鼠实验性高脂血症可出现高密度脂蛋白（ＨＤＬ）含量下降，低密度脂蛋白（ＬＤＬ）和循环免疫复合物含量升高，与对照组比较差异极显著（Ｐ均〈０．０１）；循环免疫复合物（ＣＩＣ）含量增高与ＨＤＬ、ＬＤＬ含量分别呈负、正相关（ｒ分别＝－０．８８９、０．８８９，Ｐ均〈０．００５）。桂枝茯苓丸加味的补肾化痰祛瘀复方在不限制高脂饮食条件下，能预防和治疗上述变化。

高脂血症患者血浆脂蛋白(a)免疫复合物测定的意义

目的研究高脂血症患者脂蛋白(a)[Lp(a)]-循环免疫复合物[Lp(a)-C IC]的水平与血浆脂质之间的关系。方法用酶法和酶联免疫分析分别测定38例男性高脂血症患者和38名正常对照者的血脂及Lp(a)-C IC。结果高脂血症患者的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、Lp(a)和Lp(a)-C IC水平显著高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于对照组。血浆Lp(a)-C IC水平与LDL-C和Lp(a)浓度呈正相关,相关系数(r)分别为0.353(P=0.030)和0.735(P=0.000);Lp(a)-C IC与TG和HDL-C呈负相关,r分别为-0.433(P=0.007)和-0.346(P=0.030)。结论高脂血症患者体内存在高浓度的Lp(a)-C IC,其可能与该类人群易发粥样硬化有关。