实验性自身免疫性重症肌无力模型大鼠腓肠肌低密度脂蛋白受体相关蛋白4表达的特点

目的探讨实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型大鼠腓肠肌低密度脂蛋白受体相关蛋白4(LRP4)表达的特点。方法将30只大鼠随机分为EAMG组、对照组和空白组。以小鼠乙酰胆碱受体(AChR)基因为模板合成AChR抗原,以Lewis大鼠为免疫动物。EAMG组采取主动免疫法将AChR抗原与弗氏佐剂混合制成乳剂,注射入大鼠背部皮下。对照组在相同部位注射等量的弗氏佐剂。空白组在相同部位注射等量的生理盐水。8周后使用低频重复电刺激(RNS)检测肌电RNS衰减率。采用蛋白免疫印迹法检测腓肠肌LRP4含量。结果 EAMG组所有大鼠在8周后出现肌无力症状,对照组、空白组大鼠无肌无力症状。EAMG组大鼠RNS衰减率明显高于对照组和空白组(均P<0.05)。EAMG组大鼠腓肠肌LRP4蛋白的相对含量明显低于对照组和空白组(均P<0.05)。结论 EAMG大鼠中,当AChR被自身抗体破坏时,可能导致包含LRP4在内的整条信号通路受损,进而使LRP4含量减少。LRP4是神经肌肉接头信号通路完整的重要分子。

基于Oncomine芯片数据库分析低密度脂蛋白受体相关蛋白4在甲状腺乳头癌中的表达及意义

目的研究低密度脂蛋白受体相关蛋白4(LRP4)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达和意义。方法挖掘Oncomine数据库中关于LRP4的信息,并对目前数据库中资料进行二次分析,探索其在PTC中的表达及意义。结果Oncomine数据库中共收集了400项不同肿瘤中关于LRP4的研究,与正常组织相比,LRP4表达明显增高的有11项,表达明显降低的有7项。共3项研究中的5个数据集包含135例样本涉及LRP4在PTC组织与正常组织中的表达,对这5项研究结果进行Meta分析显示,LRP4在所有差异表达基因中的中位数值排名为11,P=3.06×10^(-8),提示LRP4在PTC中高表达。LRP4在PTC组织中的表达量均明显高于正常组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。LRP4高表达与低表达患者的生存情况比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论通过对Oncomine基因芯片数据库中肿瘤相关基因信息的深入挖掘显示,LRP4在PTC组织中高表达,提示LRP4可能是PTC的致癌基因,为PTC的靶向治疗提供了方向。研究未发现LRP4的高低表达与PTC患者的生存有关。

抗低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体对重症肌无力的致病性研究进展

重症肌无力（MG）是一种针对神经肌肉接头（NMJ）突触后膜蛋白产生抗体导致NMJ信号传递发生障碍的自身免疫性疾病,可累及眼肌、延髓肌、骨骼肌等自主性肌肉,临床上常表现为易疲劳（休息后可缓解）、晨轻暮重等特点,MG的严重程度存在个体差异[1-3].NMJ是位于运动神经元和骨骼肌肌纤维之间的胆碱能突触结构,具有控制肌肉收缩的作用.

小干扰RNA靶向干扰低密度脂蛋白受体相关蛋白4基因对甲状腺乳头状癌细胞增殖的影响及其机制

目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向干扰低密度脂蛋白受体相关蛋白4(LRP4)基因对甲状腺乳头状癌细胞增殖的影响。方法选择滨州市人民医院和清华大学第一附属医院于2018年9月至2020年9月收治的甲状腺乳头状癌患者43例,行手术切除中收集甲状腺乳头状癌组织标本和癌旁正常组织标本。运用实时荧光定量PCR法检测甲状腺癌肿瘤组织、对应癌旁组织、人甲状腺正常细胞(Nthy-ori 3-1)和人乳头瘤状甲状腺癌细胞(TPC-1)中LRP4基因表达变化。采用脂质体将si-LRP4和si-con分别转染至TPC-1细胞中作为si-LRP4组和si-con对照组,分析靶向干扰LRP4基因后对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞侵袭、迁移及癌细胞增殖情况。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果43例甲状腺乳头状癌组织中LRP4基因相对表达量0.74±0.11,显著高于癌旁正常组织0.25±0.05,差异有统计学意义(t=12.242,P<0.05);TPC-1细胞中LRP4基因表达水平1.21±0.16,也显著高于Nthy-ori 3-1细胞0.57±0.09,差异有统计学意义(t=9.775,P<0.05)。siRNA靶向干扰TPC-1细胞后,LRP4基因表达水平显著降低(t=19.348,P<0.05),差异有统计学意义。si-LRP4组TPC-1细胞侵袭数与细胞迁移数显著下降(t=35.013、30.958,P<0.05),差异有统计学意义,而si-LRP4组TPC-1细胞在48、72 h的细胞增殖活性显著降低(t=12.731、11.777,P<0.05),差异有统计学意义。结论LRP4基因在甲状腺乳头状癌组织和细胞系中高表达,而靶向干扰LRP4基因可抑制甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖、侵袭与迁移过程。

LRP4在胆固醇介导的神经细胞生长中的重要作用

目的:探讨LRP4通过参与胆固醇向细胞内转运及其在神经细胞生长中的作用。方法:神经细胞生存实验分析LRP4神经元细胞生长中作用。免疫沉降实验及免疫荧光染色分析LRP4与apoE的结合。结果:与添加胆固醇拮抗剂相似,在培养神经细胞时添加抗LRP4抗体,神经细胞的生长被抑制。免疫沉降实验证明了LRP4能够结合在胆固醇转运过程中发挥重要作用的apoE。免疫荧光染色进一步证实了LRP4与apoE在细胞内的共存。结论:LRP4通过与apoE的结合在胆固醇介导的神经细胞生长中发挥重要的作用。

重症肌无力相关自身抗体研究进展

重症肌无力(MG)是一种多因素调控的自身免疫性疾病,患者血清中自身抗体通过攻击离子通道蛋白和神经肌肉接头处的蛋白,从而影响神经肌肉之间的递质传递。对于MG患者血清中ACh R-Ab、Mu SK-Ab的检测已经广为人知。近年来研究发现,MG患者体内还存在其他自身免疫抗体,例如脂蛋白受体相关蛋白4抗体、兰尼定碱受体(Ry R)抗体、血清连接素(Titin)抗体和突触前膜(Prsm)抗体。尽管MG患者血清中ACh R-Ab、Mu SK-Ab和这些MG相关的肌肉自身抗体水平与疾病严重程度相关性并不明确,且在疾病发生中的作用机制尚不清楚,但为鉴定MG的亚型提供了重要依据。本文主要就重症肌无力相关自身免疫抗体有关的研究进展予以一些简要论述。

LRP4抗体阳性的重症肌无力研究进展

自身免疫性疾病是继癌症和心血管疾病后的第三类最为常见的疾病,其在人群中的发生率约为5%,自身免疫性疾病目前仍呈上升趋势,已逐渐成为影响人类健康的主要疾病之一。作为一种最经典的神经系统自身免疫疾病,重症肌无力（myasthenia gravis,MG）是一类异质性的神经肌肉接头（neuromuscular junction,NMJ）突触后膜信号传递障碍的配体门控离子通道病[1]。

重症肌无力患者肌细胞中LRP4胞内区与SNX17的相互作用

目的:探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白4(LRP4)和分拣微管连接蛋白17(SNX17)在重症肌无力(MG)患者肌细胞中相互作用关系。方法:分别构建原核表达载体p ET30a-LRP4胞内区和真核表达载体p EASY-Blunt M2-SNX17,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达相对分子质量约为17 800的His-LRP4胞内区,在HEK293T细胞中诱导表达相对分子质量约为53 000的Myc-SNX17。利用抗Myc单克隆抗体磁珠与抗His单克隆抗体磁珠进行双向免疫共沉淀(Co-IP),以验证LRP4、SNX17两种蛋白分子是否存在相互作用。结果:成功构建了原核表达载体pE T30a-LRP4胞内区和真核表达载体pE ASY-Blunt M2-SNX17;抗Myc单克隆抗体磁珠与His-LRP4混合后不发生共沉淀,如再与Myc-SNX17混合则可发生共沉淀;抗His单克隆抗体磁珠与Myc-SNX17混合后不发生共沉淀,再与His-LRP4胞内区混合可发生共沉淀。结论:原核表达的LRP4胞内区蛋白与真核表达的SNX17体外可发生直接结合。

重症肌无力相关抗体研究进展

重症肌无力（MG）是一种神经肌肉接头传递障碍疾病。1973年Patrick和Lindstrom发现了抗乙酰胆碱受体抗体是导致MG的自身抗体。2000年Hoch等发现了除AChR抗体以外的新抗体肌肉特异性酪氨酸激酶抗体,随后2011及2012年低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体也在一部分患者中被检测到。