脂蛋白脂肪酶(LPL)基因缺陷相关疾病与治疗进展

脂蛋白脂肪酶(LPL)是人体脂蛋白中甘油三酯代谢的关键限速酶,由心肌、骨骼肌、脂肪细胞等实质细胞合成,分泌到细胞间隙与硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)结合,在肝素的作用下解离,被毛细血管内皮细胞上的糖基化磷脂酰肌醇锚定高密度脂蛋白结合蛋白1(GPIHBP1)捕获转位入血,将血液中脂蛋白中核心甘油三酯水解,释放游离脂肪酸,供机体氧化利用或储存。其活性受多种互作蛋白调节,包括ApoCs、ANGPTLs、LMF1等。编码LPL的基因发生突变、蛋白合成加工过程出现错误或相关互作蛋白异常都会导致LPL缺失或功能异常,出现血脂升高或伴发胰腺炎等临床症状,严重威胁患者的生命健康。目前LPL缺陷相关疾病的临床常规治疗手段是降脂药与严格饮食控制相结合,治疗效果并不理想。近年来,以LPL及其互作蛋白基因为靶点的药物相继进入临床研究和上市阶段,取得了良好的临床效果,其中以基因替代、寡核苷酸和小RNA类药物最受关注。本综述结合LPL的特性、LPL缺乏症(LPLD)的病理机制,总结现有的治疗方法及药物研发进展,以期对LPLD的药物研发和医学干预提供思路。

无量山乌骨鸡肝脏组织发育特征及脂蛋白脂酶基因表达研究

【目的】明确无量山乌骨鸡肝脏组织发育过程中脂质沉积和脂酶活性的变化特征以及与脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)基因表达的相关性。【方法】以1(D1)、42(D42)、84(D84)、126(D126)日龄共4个阶段的无量山公鸡和母鸡为研究对象,测定体重和肝脏组织重量并计算肝脏指数,HE石蜡切片染色鉴定肝脏组织的形态学变化,采用甘油三酯(triglyceride,TG)检测试剂盒(单试剂GPO-PAP法)检测肝脏组织中TG含量,采用比色法检测LPL和肝酯酶(hepaticlipase,HL)活性,采用实时荧光定量PCR检测肝脏组织中LPL基因mRNA表达量,采用Pearson相关性分析确定LPL基因表达量和肝脏组织各指标之间的相关性。【结果】无量山乌骨鸡公鸡和母鸡在不同生长阶段肝脏重差异均显著(P<0.05),D42和D84肝脏指数分别与D1和D126相比差异显著(P<0.05);公鸡和母鸡肝脏组织中TG含量均在D84时出现峰值;母鸡LPL和HL活性在D126时达到顶峰且显著高于其他阶段(P<0.05),公鸡LPL和HL活性在D42时达到顶峰,公母鸡总脂酶活性分别在D42和D126时达到顶峰且显著高于其他阶段(P<0.05);公鸡和母鸡肝脏组织LPL基因mRNA表达的峰值分别在D42和D1,且母鸡LPL基因mRNA表达量在D1、D42和D126共3个发育阶段均与HL活性呈显著相关(P<0.05)。【结论】无量山乌骨鸡肝脏组织重量、肝脏指数、TG含量、脂酶含量和LPL基因mRNA表达量在不同发育阶段变化较大,而成鸡脂酶活性主要受性别影响,母鸡中LPL基因mRNA表达量与HL活性显著相关。结果为进一步研究无量山乌骨鸡肝脏脂肪代谢调控机制提供科学依据。

血清胱抑素C、尿微量白蛋白、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白联合检测在早期肾损伤患者中应用价值

目的:探究血清胱抑素C(CysC)、尿微量白蛋白(mAlb)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)联合诊断在早期肾损伤中应用效果。方法:将2022年1月—2024年1月在漳州市中医院诊治糖尿病患者80例,根据肾小球滤过率(GFR)水平分为早期肾损伤组(A组)38例、单纯糖尿病组(B组)42例,并选择同期体检健康人员38例纳入对照组(C组),检测所有患者血清CysC、NGAL、尿mAlb水平,分析其对早期肾损伤的诊断价值。结果:与C组比较,A组、B组CysC、mAlb、NGAL水平均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与B组比较,A组CysC、mAlb、NGAL水平均高,差异均有统计学意义(P<0.05)。CysC、mAlb、NGAL敏感度均低于联合诊断,差异均有统计学意义(P<0.05);CysC、mAlb、NGAL单独诊断特异度与联合诊断特异度差异均无统计学意义(P>0.05);CysC、mAlb、NGAL准确度均低于联合诊断,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:CysC、mAlb、NGAL水平在早期肾损伤患者中呈异常高表达,且联合诊断早期肾损伤有着较高效能,可对早期肾损伤进行较为准确的鉴别。

外源茉莉酸对脂氧合酶基因LOX3敲除的粳稻防御响应的影响

【目的】揭示外源茉莉酸(Jasmonic acid,JA)对脂氧合酶基因LOX3敲除水稻株防御响应的影响,为利用外源JA等激发子提高农作物因抗性相关基因丧失导致的水稻防御响应降低问题提供基础数据。【方法】以感病粳稻丽江新团黑谷(LTH)及其LOX3敲除水稻株系(Δlox3#1、Δlox3#10和Δlox3#20)为材料,开展水稻株高、分蘖数和百粒重等表型分析、过氧化物酶(POD)、活性氧(ROS)和木质素等抗菌化合物活性(含量)测定,以及防御相关基因表达分析;进一步对供试水稻进行稻瘟菌接种,调查供试水稻稻瘟病症状,检测稻瘟菌接种水稻中抗菌化合物活性(含量)及防御相关基因表达等,并观察稻瘟菌在水稻中的侵染进程;在此基础上,使用外源JA处理稻瘟菌接种36和48 hpi时的Δlox3敲除水稻株和LTH,分析JA对水稻稻瘟病症状及稻瘟菌侵染的水稻中抗菌化合物活性(含量)和防御相关基因表达等的影响,同时观察JA对稻瘟菌侵染进程的影响。【结果】Δlox3敲除水稻株种子发芽速度快于野生型,但株高、分蘖数和百粒重等与野生型相近;稻瘟菌接种的Δlox3敲除水稻株稻瘟病症状较稻瘟菌接种的野生型水稻严重,且胼胝质数、POD活性及木质素含量降低,ROS含量和死细胞数增加,OsWRKY45、OsPR1a和OsPOX1基因下调幅度和稻瘟菌菌丝定殖量明显高于稻瘟菌接种野生型水稻;外源JA可有效减缓稻瘟菌接种36和48 hpi的Δlox3敲除水稻株稻瘟病症状,且JA提高了稻瘟菌接种36和48 hpi的Δlox3敲除水稻株中胼胝质数、POD活性和木质素含量以及防御相关基因OsWRKY45、OsPR1a和OsPOX1表达水平,而降低了OsRbohB表达量及ROS含量和细胞死亡数,同时限制了稻瘟菌菌丝扩展;其中JA对稻瘟菌接种48 hpi的Δlox3敲除水稻株稻瘟病症状减轻效果优于JA对稻瘟菌接种36 hpi的Δlox3敲除水稻株,主要体现在JA使稻瘟菌接种48 hpi的Δlox3敲除水稻株中抗菌化合物增加幅度、防御相关基因表达水平、细胞死亡数和稻瘟菌菌丝扩展受限等优于JA处理稻瘟菌接种36 hpi的Δlox3敲除水稻株。【结论】LOX3基因敲除提升了水稻种子发芽速度而降低了水稻抗瘟性,外源JA则减缓LOX3敲除导致的水稻防御响应降低,提高了水稻抗瘟性。JA在减缓农作物因抗性基因持久性短而造成的抗性降低或丧失方面具有潜在的应用前景。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在克罗恩病临床诊断中的应用价值

克罗恩病(CD)是一种以慢性、非特异性炎症为特征的自身免疫性肠道疾病,其病因及发病机制仍未明确。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是从中性粒细胞中分离出的一种分泌性糖蛋白,广泛参与肠道炎症反应、细胞凋亡、肿瘤进展等病理生理过程。NGAL在CD的临床诊断及活动性监测方面具有生物标志物的潜能。就NGAL在CD不同临床样本中的应用价值进行综述,以期为CD的临床诊治提供参考。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和生长分化因子15在高血压肾损伤中的诊断价值

目的探讨血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、生长分化因子15(GDF-15)联合检测在老年H型高血压患者肾损伤中的诊断价值。方法选取2021年4月至2022年6月承德医学院附属医院神经内科及全科医疗科收治的H型高血压患者177例,依据估算肾小球滤过率分为肾功能损伤组81例和肾功能正常组96例。收集2组患者一般资料、实验室检查指标,受试者工作特征曲线(ROC)分析血清NGAL、GDF-15联合检测对老年H型高血压患者肾损伤的诊断价值,Pearson相关性分析血清NGAL、GDF-15水平与老年H型高血压患者肾损伤的相关性。结果肾功能损伤组收缩压水平高于肾功能正常组[(148.53±14.62)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)vs(138.75±13.36)mm Hg,P<0.01],2组舒张压比较差异无统计学意义(P>0.05);肾功能损伤组肌酐、尿素、β_2微球蛋白(β_2-MG)、胱抑素C(Cys C)、尿微量白蛋白(MA)、NGAL及GDF-15水平高于肾功能正常组(P<0.01);ROC曲线分析显示,NGAL、GDF-15联合检测显著高于NGAL、GDF-15单独检测(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,血清NGAL、GDF-15水平与肌酐、尿素、β_2-MG、Cys C、MA水平均呈正相关(P<0.01)。结论老年H型高血压患者出现肾损伤后血清NGAL、GDF-15水平升高,血清NGAL、GDF-15联合检测在老年H型高血压患者肾损伤诊断中具有较高的诊断价值。

胆碱脂酶、触珠蛋白在反复呼吸道感染儿童血清中的表达水平及其对预后的评估价值

目的探讨胆碱脂酶(CHE)、触珠蛋白(HPT)在反复呼吸道感染(RRTI)儿童血清中的表达水平及其对预后的评估价值。方法选取112例RRTI患儿纳入RRTI组,随机选取同期健康体检儿童95例纳入对照组。根据疾病的严重程度,将RRTI组患儿分为轻度组38例、中度组40例和重度组34例。检测血清CHE、HPT、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)水平以及CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)水平。分析RRTI患儿的CHE与HPT的相关性。分析血清CHE、HPT的表达水平对RRTI患儿预后的预测价值。结果RRTI组患儿的CHE表达水平低于对照组,HPT水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度组RRTI患儿的CHE水平低于中度组和轻度组,中度组低于轻度组;重度组RRTI患儿的HPT水平高于中度组和轻度组,中度组高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。RRTI患儿的CHE表达水平与HPT表达水平呈负相关(r=-0.637,P<0.001)。RRTI组的IL-1、IgA、IgM水平和CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)低于对照组,IL-6水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。RRTI患儿CHE表达水平与IL-1、IgA、IgM、CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)呈正相关,与IL-6呈负相关;HPT表达水平与IL-1、IgA、IgM、CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)呈负相关,与IL-6呈正相关(P<0.05)。预后良好RRTI患儿的血清CHE表达水平高于预后不良RRTI患儿,HPT水平低于预后不良RRTI患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。CHE、HPT联合预测RRTI患儿预后的曲线下面积(AUC)大于其单独预测的AUC,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在RRTI患儿血清中,CHE呈低表达,HPT呈高表达。CHE、HPT联合评估RRTI患儿预后的价值较高。

改良根治术与保乳手术治疗早期乳腺癌的疗效及对中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和基质金属蛋白酶-9影响对比

目的对比改良根治术与保乳手术治疗早期乳腺癌(EBC)的疗效及对中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法以2014年1月至2017年4月河北省秦皇岛市第一医院收治的145例EBC患者作为研究对象,按照不同的治疗方式分为保乳手术组70例与改良根治术组75例。两组术后均随访1、5年。对比两组患者的手术指标及手术前后血清NGAL、MMP-9水平变化情况,采用创伤后应激障碍问卷(PCL-C)评估创伤后应激障碍(PTSD),比较两组患者乳房美容效果满意度及术后1、5年的局部复发率、生存率、远处转移率。结果保乳手术组患者术中出血量少于改良根治术组,手术时间、切口长度、住院时间短于改良根治术组(P<0.05);两组的清除淋巴数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术前两组患者的血清NGAL、MMP-9水平比较差异无统计学意义,术后3、5 d时,保乳手术组的NGAL、MMP-9水平均低于术前及对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。出院时,保乳手术组的PTSD阳性率、PCL-C总评分均低于改良根治术组,乳房美容效果满意度高于改良根治术组(P<0.05)。两组患者术后1、5年的局部复发率、总生存率、远处转移率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论与改良根治术相比,保乳手术改善早期乳腺癌患者的效果明显,可改善患者的手术情况,降低创伤后应激反应,提高患者的乳房美容效果满意度,且对近远期患者的预后并无不利影响,同时并未增加外周血NGAL、MMP-9的表达,安全性较高。

尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和白细胞介素-6水平对心脏外科术后患者严重液体超负荷的风险价值

目的分析尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和白细胞介素-6(IL-6)水平对心脏外科术后患者严重液体超负荷(FO)的风险价值。方法选取2020年4月—2023年3月在成都市第三人民医院接受心脏外科手术的患者220例,根据术后24 h FO,将FO≥10%的患者记为A组,将FO<10%的患者记为B组。分析两组一般资料,比较两组术前及术后尿液NGAL和IL-6水平,采用logistic回归模型分析心脏外科术后24 h内患者发生严重FO的危险因素,绘制ROC曲线,分析尿液NGAL、IL-6对患者发生严重FO的风险价值。亚组分析不同原发病对FO的影响。结果A组男性ICU停留时间比例高于B组(P<0.05),术前白蛋白水平及术后当天尿量低于B组(P<0.05),两组体重指数、年龄、病程、手术时间、术中尿量、原发疾病类型、术前左室射血分数、肌酐水平、白细胞计数、血红蛋白水平、机械通气时间、体外循环时间,以及急性肾损伤、左心功能不全、高血压、心力衰竭、糖尿病占比比较无差异(P>0.05);两组术后2 h、术后12 h尿液NGAL和IL-6水平均高于术前(P<0.05),术后12 h尿液NGAL和IL-6水平均高于术后2 h(P<0.05),且A组术前、术后2 h及术后12 h均高于B组(P<0.05);logistic回归分析发现,术前尿液NGAL和IL-6水平高是心脏外科术后患者发生严重FO的危险因素(P<0.05);ROC结果显示,术前尿液NGAL和IL-6水平对心脏外科术后患者发生严重FO的最佳截断点分别为48.04 ng/mL和32.26 pg/mL,AUC分别为0.865和0.704,二者联合检测AUC为0.894。冠心病、先天性心脏病、心脏瓣膜病亚组之间FO情况、ICU停留时间、体外循环时间、术后当天尿量及术前NGAL和IL-6之间无显著差异(P均>0.05)。结论心脏外科术后患者尿液NGAL和IL-6水平异常升高,术前尿液NGAL和IL-6水平是其发生严重FO的危险因素。

4株滑液囊支原体分离株P80脂蛋白的基因克隆及序列分析

为研究滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)P80家族脂蛋白的功能及其异同,通过PCR方法从4株滑液囊支原体分离株中分别扩增P80-1,P80-2,P80-3蛋白的基因序列并进行测序,通过生物信息学方法对P80家族脂蛋白的蛋白序列进行分析,寻找保守结构域、抗原表位,并预测功能.结果表明,P80家族脂蛋白均为碱性亲水性稳定蛋白,在N端具有较强疏水性,只有P80-2蛋白具有跨膜螺旋区;P80家族脂蛋白信号肽的位置与疏水区结果相一致;3条P80蛋白具有12个相同的保守结构域及2~4个不同的结构域;有31~32个抗原表位;二级结构均以α-螺旋和无规则卷曲为主;三级结构预测显示,P80-1蛋白具有ABC转运蛋白的功能,P80-2蛋白为周质结合蛋白Ⅱ型,P80-3蛋白具有细胞黏附功能.研究结果可为MS P80家族脂蛋白功能的深入研究以及MS致病机制、病原诊断和疫苗研制提供参考.

髓过氧化物酶和脂蛋白相关磷脂酶A_(2)与急性冠状动脉综合征关系的研究进展

心血管疾病是全球死亡的主要原因。急性冠状动脉综合征(ACS)作为一种临床心脏急症,及时开通病变血管能够明显改善患者预后。对于胸痛患者,如果能够在初期尽早鉴别ACS并采取精准处理措施,将会极大地降低患者的死亡风险,同时改善患者预后。近年来,髓过氧化物酶(MPO)和脂蛋白相关磷脂酶A_(2)(Lp-PLA_(2))与ACS之间关系的研究取得了一定进展,这有助于深入理解ACS的发病机制,对ACS的发生、发展及预后评估有明显预测价值。未来深入研究MPO和Lp-PLA_(2)与ACS的关系将为ACS患者的治疗和预后提供临床借鉴。

围术期药物对中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的影响

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是一种分子量约为25 kDa的小分子脂蛋白,主要由肝脏和脂肪组织合成,并由中性粒细胞等免疫细胞携带和释放[1]。其在人体的生理和病理过程中,特别是在炎症反应和组织损伤修复中发挥着关键作用。

血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9和脂多糖对老年非瓣膜性心房颤动患者心脑血管病死亡的预测价值分析

目的探讨血清前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)、脂多糖对老年非瓣膜性心房颤动(NVAF)患者心脑血管病死亡的预测价值。方法选取2016年10月至2020年12月海南省海口市人民医院收治的老年NVAF患者575例,随访3年根据是否发生心脑血管病死亡分为死亡组(74例)和存活组(501例),采用酶联免疫吸附试验法检测血清PCSK9、脂多糖水平。通过多因素Logistic回归分析老年NVAF患者心脑血管病死亡的因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PCSK9、脂多糖水平对老年NVAF患者心脑血管病死亡的预测价值。结果随访3年,575例老年NVAF患者心脑血管病死亡率为12.9%(74/575)。死亡组血清PCSK9、脂多糖水平均高于存活组(均P<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,年龄增加、CHA 2DS 2-VASc评分增加、急性心肌梗死、卒中/短暂性脑缺血发作、心力衰竭和PCSK9升高、脂多糖升高为老年NVAF患者心脑血管病死亡的独立危险因素(均P<0.05)。ROC曲线显示,血清PCSK9、脂多糖水平联合预测老年NVAF患者心脑血管病死亡的曲线下面积为0.873,大于血清PCSK9、脂多糖水平单独预测的0.781、0.795(均P<0.001)。结论血清PCSK9、脂多糖水平升高是老年NVAF患者心脑血管病死亡的独立危险因素,血清PCSK9、脂多糖水平联合对老年NVAF患者心脑血管病死亡的预测价值较高。

基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体临床前神经系统安全性评价

目的通过评价AAV5-脂蛋白脂酶变异体(GC304)腺相关病毒注射液对C57BL/6N小鼠中枢神经系统的影响,以确定受试物可能关系到人的安全性问题。方法共使用40只小鼠,雌雄各半,分别单次尾静脉给予溶媒对照、1.0×10^(13)、5×10^(13)、1.5×10^(14)vg·kg^(-1)GC304腺相关病毒注射液,采用功能观测组合试验方法(FOB),分别在给药前和给药后1、4、24、48、96 h,7、14 d观察小鼠运动功能、感觉功能、自主活动等行为,评价受试物对小鼠中枢神经系统的影响,并在给药后第14天检测血清TG、白蛋白和总蛋白改变。结果本研究前期,采用荧光定量PCR方法检测小鼠脑中目的基因(LPL),其结果显示给予1.5×10^(14)vg·kg^(-1)GC3042周后,仍可在脑区内检测到目的基因(LPL)的拷贝数,基于上述数据开展了GC304行为学检测,其结果显示给予GC304后,可引起与药理作用相关的甘油三酯的明显降低,但在给药后2周内,GC304各剂量组动物笼内观察、手持观察、开放场观察、反射评价各指标均未见明显异常。结论GC304可进入脑区,且给药后14 d内,目的基因在脑区内仍有少量分布,但其不会诱导产生神经毒性,为临床用药提供了参考。

前蛋白转换酶枯草溶菌素9抑制剂降低脂蛋白(a)作用的机制

脂蛋白(a)(lipoprotein(a),Lp(a))在结构上与低密度脂蛋白相似,是动脉粥样硬化性心血管疾病发病的独立危险因素和潜在的治疗靶点。前蛋白转换酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)抑制剂可有效降低Lp(a)的循环水平并减少心血管事件风险。本文综合近年来的相关研究,阐述PCSK9抑制剂减少Lp(a)合成和促进其降解的相关机制,分析该领域所面临的挑战和未来的发展方向。

脂氧合酶对甜瓜果实后熟软化生理及相关基因表达的影响

为探究甜瓜果实在采后贮藏过程中脂氧合酶对果实后熟软化生理及相关基因表达的影响,以西州蜜17号为试验材料,通过对甜瓜果实贮藏期间脂氧合酶活性、乙烯释放量、果实硬度、呼吸强度、果胶酶活性、淀粉酶活性以及相关基因表达量进行测定,研究甜瓜果实采后脂氧合酶代谢、乙烯产生、后熟软化生理及相关基因表达的作用关系。分别将甜瓜果实在20℃贮藏(对照组)、经1-MCP处理后20℃贮藏、2℃贮藏,分析甜瓜果实中LOX活性与乙烯释放量的变化趋势。结果表明,在甜瓜果实后熟软化过程中,LOX活性上升先于乙烯释放量的增加,而在乙烯释放量与呼吸强度跃变后,LOX活性逐渐下降。同时,果实中果胶酶与淀粉酶活性及其基因表达量在跃变现象发生后显著增加,果实硬度随之迅速下降,说明果胶酶与淀粉酶基因表达增强和酶活性升高是甜瓜果实发生软化的关键因素。此外,LOX活性升高能够启动乙烯释放量的增加,促使果实发生呼吸跃变并进入后熟阶段,但乙烯对LOX却没有调控作用。由此可知,LOX活性对果胶和淀粉的变化没有直接影响,而是通过启动乙烯的释放来调节果胶和淀粉的代谢反应,使果实发生软化。

薰衣草非特异性脂质转移蛋白基因nsLTP2-1和nsLTP2-2的克隆与功能分析

非特异性脂质转移蛋白(nsLTP,non-specific lipid transfer proteins)在植物脂质转运和分泌中发挥重要作用。本研究从薰衣草(Lavandula angustifolia)中克隆到2个II型nsLTP基因,命名为nsLTP2-1和nsLTP2-2,并对其进行功能分析。生信分析表明,nsLTP2-1和ns LTP2-2分别编码119个和117个氨基酸,具有脂转移蛋白(LTP,lipid transfer proteins)保守结构域和8个高度保守的半胱氨酸残基;系统进化分析显示它们处于两个分支,与同科的紫苏(Perilla frutescens)相似性最高。基因表达分析显示2个基因均在花蕾中高表达,在叶片、茎和花瓣中几乎不表达,在花萼中的表达存在差异,nsLTP2-1和nsLTP2-2分别在成熟花萼和幼嫩花萼中表达量更高;2个基因在花蕾和叶片中的表达均受到强光诱导,且在花蕾中的表达均受脱落酸诱导,而叶片中nsLTP2-1和nsLTP2-2的表达分别受茉莉酸甲酯和乙烯诱导。亚细胞定位显示2个nsLTPs均定位在细胞膜和细胞壁上,可能与次生代谢物的转运有关。过表达nsLTP2-1和nsLTP2-2烟草叶片经尼罗红染色后,经485~543 nm激发光激发,叶片腺毛头部的荧光显示多于野生型,说明本研究中的nsLTPs可能在脂类的合成和转运中起重要作用。这些结果为明确薰衣草脂转移蛋白在脂类及萜类转运中的功能研究提供了参考。

载脂蛋白E基因多态性及脂质代谢水平与胆囊结石形成的关系研究

目的探讨载脂蛋白(Apo)E基因多态性及脂质代谢水平与胆囊结石形成的关系。方法回顾性选取2022年6月至2023年6月在温州市人民医院诊断为胆囊结石的100例患者作为胆囊结石组,另选取同期在本院体检的100名健康者作为对照组。使用基因检测试剂盒进行多通道荧光定量分析Apo E基因多态性。比较两组Apo E基因型分布、等位基因频率分布以及血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、非高密度脂蛋白胆固醇及脂蛋白水平差异。采用logistic回归分析胆囊结石形成的独立危险因素,采用ROC曲线评估危险因素对胆囊结石的预测效能。结果胆囊结石组患者TC、HDL-C、LDL-C水平均高于对照组(均P<0.05)。Apo E基因多态性分析显示,胆囊结石组ε2、ε4等位基因频率均高于对照组(均P<0.01)。胆囊结石组E2/3、E2/4、E3/4、E4/4及E2/4+E3/4+E4/4基因型频率均高于对照组(均P<0.01)。logistic回归分析显示,E2/3、E2/4及E3/4基因型、性别、HDL-C水平及吸烟史均是胆囊结石形成的独立危险因素(均P<0.05)。而E2/4、E3/4、TG、HDL-C可作为胆囊结石的预测指标,其联合预测的灵敏度为0.710,特异度为0.910,约登指数为0.620,截断值为0.600,AUC为0.880。结论胆囊结石患者存在Apo E基因多态性,且Apo E基因多态性、性别、HDL-C水平及吸烟史与胆囊结石的形成密切相关,E2/4、E3/4、TG、HDL-C可作为预测胆囊结石形成的潜在指标。

牡丹非特异性脂质转移蛋白基因PsLTP的生物信息学分析

[目的]了解牡丹非特异性脂质转移蛋白基因LTP的基因特征及其编码蛋白的生物学特性,探索其生物功能。[方法]运用Blast、ORF-Finder、ProtParam、SignalP 4.1、ProtScale和TMHMM 2.0 Server等生物信息学软件,分析牡丹nsLTP基因序列及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽、磷酸化位点、保守结构域等,并运用DANMAN、MEGA软件进行多序列比对和系统发育树构建。[结果]牡丹nsLTP基因(NCBI登录号为:JZ840269.1)序列全长为685 bp,开放阅读框长为354 bp,编码蛋白包含117个氨基酸,理论等电点为8.93,为不稳定性蛋白。牡丹nsLTP蛋白为疏水性蛋白,含有信号肽但不含跨膜结构域,NetPho Server预测其含有8个丝氨酸和3个酪氨酸磷酸化位点及5个苏氨酸磷酸化位点。PsnsLTP蛋白具有植物LTP蛋白典型结构,即4个α-螺旋,4对二硫键,1个可结合和容纳脂质分子的疏水结构。多序列比对及系统发育树分析显示,PsLTP蛋白与绒毛烟草LTP蛋白(XP_009608993.1)的相识度62.7%,且进化树聚为同一小分支,遗传距离较近。[结论]通过对牡丹nsLTP基因特性及蛋白结构研究,系统性研究了牡丹nsLTP基因的生物信息学特性,为牡丹抗病抗逆功能基因的研究提供了依据,也为其他植物nsLTP基因研究提供了参考。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、肾损伤分子-1联合尿微量白蛋白检测对胰腺炎并发急性肾损伤的诊断价值

目的分析尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子-1(KIM-1)联合尿微量白蛋白(MAU)检测在急性胰腺炎(AP)并发急性肾损伤(AKI)早期诊断中的价值。方法选取2020年7月至2023年7月北京积水潭医院贵州医院收治的120例AP患者作为研究对象,根据入院后7 d内是否发生AKI分为AKI组、非AKI组,患者均于入院当日采集尿液,检测NGAL、KIM-1、MAU水平。比较两组患者一般资料及尿液NGAL、KIM-1、MAU水平,分析NGAL、KIM-1和MAU水平与急性生理学和慢性健康评估Ⅱ(APACHEⅡ)评分的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)评估NGAL、KIM-1和MAU单独及联合检测对AP并发AKI的预测价值。结果两组患者年龄、性别、体重指数(BMI)、糖尿病史、高血压史、发病至入院时间、基线血肌酐水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);AKI组APACHEⅡ评分高于非AKI组,差异有统计学意义(P<0.05);AKI组尿液NGAL、KIM-1、MAU水平均高于非AKI组,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析显示,尿液NGAL、KIM-1、MAU水平与APACHEⅡ评分均呈正相关(P<0.05);ROC曲线显示,尿液NGAL、KIM-1、MAU预测AP并发AKI的最佳截断值分别为158.50 ng/ml、3.23 ng/ml和23.85 mg/L,对应的AUC分别为0.872、0.853和0.841,联合诊断AUC为0.912。结论尿液NGAL、KIM-1和MAU检测对AP并发AKI具有较高的预测价值,可提高早期诊断效能。