CLN5基因纯合突变致神经元蜡样脂褐质沉积症的近亲婚配家系分析

目的 对一个一级表兄妹婚配的神经元蜡样脂褐质沉积症(NCL)家系进行临床表型和基因型分析。方法 回顾分析该家系中2例患者的临床特征,并采用全外显子测序、Sanger测序对患儿及其父母进行分子遗传学分析。结果 2例患者为一级表兄妹婚配的子代,均为女性,以难治性癫痫、进行性智力运动倒退、视力减退为主要表现。CLN5基因检查发现2例同胞姐妹为c.377G>A(p.Cys126Tyr)纯合突变,其父母该位点为杂合变异。结论 c.377G>A(p.Cys126Tyr)纯合突变是晚发婴儿型神经元蜡样脂褐质沉积症家系的分子发病机制,与先证者父母近亲结婚有关。

神经元蜡样质脂褐质沉积症─比较脑、周围神经及肌活检的诊断价值

本文对４例青少年型ＮＣＬ的脑、周围神经及肌活检进行了超微结构的对比研究。４例脑皮层神经元和胶质细胞胞浆内，可见大量脂褐素体和指纹体，而在周围神经及肌组织内，均未见具有诊断意义的沉积物，与以往文献报道不尽一致。指出周围神经及肌活检，诊断ＮＣＬ的价值尚需进一步观察。

六味地黄汤及其配伍对过氧化脂质及脂褐质含量的影响

六味地黄汤全方能显著降低高龄小鼠血清过氧化脂质及肝脏脂褐质含量且降至与低龄小鼠相似。但将全方析成“三补”、“三泻”两种组方,则对高龄鼠的过氧化脂质无明显影响,对肝脂褐质作用也不如全方。三种组方对心脏脂褐质均无明显影响。

玉米油和猪油对大鼠血脂血糖代谢和脑脂褐质影响的比较研究

采用幼年ＳＤ雄性大鼠３０只，体重１５０±２０ｇ，随机分成三组，每组１０只：（１）基础饲料组：普通大鼠饲料；（２）猪油组：基础饲料中加入１０％猪油和１．５％胆固醇；（３）玉米油组：在基础饲料中加入１０％玉米油和１．５％胆固醇，饲养９周，比较玉米油和猪油对大鼠血脂血糖和脑脂褐质的不同影响。结果表明，玉米油组ＴＣ和ＬＤＬ－Ｃ水平较猪油组低，虽然两组均高于基础饲料组。玉米油组的ＨＤＬ－Ｃ比猪油升高不显著，但ＨＤＬ－Ｃ／ＴＣ（％）增加，同时ＬＤＬ－Ｃ／ＨＤＬ－Ｃ比值下降。基础饲料组，猪油组和玉米油组的大鼠平均血清ＴＧ分别为１.２８，１.２１和１.４５（ｍｍｏｌ／Ｌ），各组之间的差别不显著。高脂饲料组动物的空腹血糖（ＳＧ）较基础饲料组高，但差别无统计学意义。三组不同饲料大鼠的脑脂褐质（ＬＰＦ）含量测定结果显示:基础饲料组大鼠的ＬＰＦ平均值１２.９Ｕ／ｇ蛋白质，而玉米油组和猪油组均明显升高，分别为２８.３和２８.８Ｕ／ｇ蛋白质。在以血脂各项指标为自常量，大脑ＬＰＦ含量为因变量的相关分析中发现，ＬＰＦ与ＴＣ和ＬＤＬ－Ｃ呈正相关，相关系数分别为０.６９１和０.５４７，Ｐ＜０.０１．

2450MHz微波辐射对大鼠海马长时程增强和脑组织脂褐素的影响

目的探讨微波对学习记忆影响的作用机制。方法对海马诱发电位的长时程增强 (LTP)和脑脂褐素含量进行研究 ,用 2 4 5 0MHz微波理疗机为照射源 ,以大鼠为实验对象 ,分别采用在体海马诱发电位法和分光光度法。结果 1 0 2 5mW/cm2 强度范围内的连续微波 ,可以对弱条件刺激和强条件刺激引发的LTP的群峰电位 (PS)峰值产生抑制作用 ,并存在强度 -效应关系 ,在 2 5mW/cm2 时脂褐素含量显著高于对照组和 1 0mW/cm2 组 (P <0 .0 5 )。结论 1 0 2 5mW/cm2 强度范围内的 2 4 5 0MHz连续微波可以通过抑制海马LTP的生成和脑脂褐素含量增加 ,造成学习记忆损害。

金莲花中荭草苷和牡荆苷对D-半乳糖致衰老小鼠脂褐素和脑组织形态学的影响

目的研究金莲花黄酮单体荭草苷和牡荆苷对D-半乳糖致衰老小鼠脑重、脂褐素和脑组织形态学的影响。方法选用昆明种小鼠(雌雄各半),随机分为正常组、模型组、荭草苷和牡荆苷高、中、低各三个剂量组和维生素E对照组,每组10只。小鼠腹腔注射D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型,8 w造模成功后,各治疗组从第9周开始每日上午分别口服灌胃给药,1次/d。给药8 w后,取脑,称重,采用荧光分光光度计测定脑组织中脂褐素的含量,HE染色光镜观察细胞形态,透射电镜观察小鼠海马细胞超微结构的变化。结果与模型组相比,荭草苷和牡荆苷能显著增加小鼠脑重,降低小鼠脑组织中脂褐素的含量。光镜观察,模型组小鼠神经细胞数量明显减少,细胞排列不整齐,细胞空泡变性。各治疗组比模型组都有所恢复,其中以荭草苷和牡荆苷高、中剂量组恢复效果明显。电镜观察小鼠海马区神经细胞发现,模型组神经细胞中细胞核膜的结构不清和变形,脂褐素的沉积增多,线粒体损伤,部分内质网扩张、肿胀和空泡样变,各治疗组比模型组细胞核膜都有所恢复,以荭草苷和牡荆苷高、中剂量组和维生素E组恢复效果明显。结论金莲花中荭草苷和牡荆苷能够提高小鼠脑重,降低小鼠脑组织中脂褐素的含量,改善衰老小鼠海马区神经细胞的结构。荭草苷中、低剂量组的作用优于牡荆苷,荭草苷和牡荆苷的高剂量组与维生素E作用相当。

游泳应激对衰老小鼠学习记忆及脑内脂褐素含量的影响

用Ｄ－半乳糖化造成衰老小鼠模型，以游泳作为应激刺激，观察小鼠脑内脂褐素含量的变化以及跳台试验和一次性被动回避试验中小鼠学习记忆能力的影响。结果：①Ｄ－半乳糖组脑内脂褐素含量与空白组相比显著增加（Ｐ＜０．０１）；②Ｄ－半乳糖＋游泳应激组的脂褐素含量与Ｄ－半乳糖组相比明显减少（Ｐ＜０．０５）；③Ｄ－半乳糖＋游泳应激组其一次性被动回避试验的潜伏期以及跳台试验３０分后正确率均高于单纯Ｄ－半乳糖组（Ｐ＜０．０５）。

恒定磁场对老龄小鼠脑、心、肾脂褐素及心、肾、胸腺抗氧化酶含量的影响

目的 :研究恒定磁场对老龄小鼠脑、心、肾组织脂褐素 (L PF)及心、肾、胸腺组织谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH - Px)含量的影响。方法 :将 2 0只雌性老龄小鼠随机分为实验组 (n=10 )与对照组 (n=10 )。把实验组老龄小鼠放入磁场强度为 2 0 0 m T的铁箱中 ,每日曝磁 1h,连续 30 d。结果 :实验组老龄小鼠脑组织脂褐素含量 [(0 .16 0± 0 .0 2 4 )μg· g- 1 ]较对照组 [(0 .30 4± 0 .0 6 1)μg· g- 1 ]比较差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;心、肾组织脂褐素含量 [(0 .0 82± 0 .0 0 9)及 (0 .32 9± 0 .0 2 4 )μg· g- 1 ]与对照组 [(0 .0 92± 0 .0 11)及 (0 .382±0 .0 33)μg· g- 1 ]比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。实验组心、肾及胸腺 GSH- Px活性 [(9.6 3± 1.5 2 )、 (30 .6 8±4 .5 0 )及 (96 .72± 10 .94 ) NU· m L- 1 ]较对照组 [(7.6 3± 1.4 8)、 (2 4 .0 9± 4 .4 9)及 (85 .6 8± 7.12 ) NU· m L- 1 ]明显升高 (P<0 .0 5及 P<0 .0 1)。结论 :磁场强度 2 0 0 m T的恒定磁场有降低老龄小鼠器官组织中脂褐素含量、抵抗自由基及提高抗氧化酶活性的作用。

黄精对小鼠超氧化物歧化酶和心肌脂褐素的影响

黄精(Polygonatum Sibiricum Re-doute)为百合科植物,药用其干燥根茎。《别录》:“主补中益气,除风湿,安五脏”。《纲目》:“黄精补诸虚、止寒热、填精髓”。近代药理研究证明,黄精有增加冠脉血流量和减轻动物动脉粥样硬化作用。

运动训练对大鼠大脑、心肌脂褐素含量及自由基代谢的影响

观察了８周中等运动强度训练对大鼠力竭运动后和安静时大脑皮层和心肌脂质过氧化水平，超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性，还原性谷胱甘肽（ＧＳＨ）和脂褐素含量的影响。结果显示：中等运动强度训练，可降低大鼠大脑皮层和心肌力竭运动后和安静时脂质过氧化水平，减少脂褐素的产生，提高超氧化物歧化酶活性，增加安静时两组织还原性谷胱甘肽含量。此结果表明，适量的运动训练具有一定的抗衰老作用。

大豆磷脂对小鼠心肝脾中丙二醛和脂褐素含量的影响

观察大豆磷脂对小鼠SOD、丙二醛 (MDA)和脂褐素 (LF)含量的影响。雄性小鼠 4 0只 ,分为 4组 ,实验组按 2 5、5、10g (kgBW)剂量的大豆磷脂和对照组生理盐水连续灌胃 18d后 ,测定小鼠肝组织中的SOD活性 ,测定小鼠心、肝和脾组织中丙二醛和脂褐素的含量。结果表明 ,3种剂量的大豆磷脂均能显著提高肝组织中SOD的活性 (P <0 0 5 ) ,均能极显著降低心肌中丙二醛的含量 (P <0 0 1) ,均显著降低肝组织中丙二醛的含量 (P <0 0 5 ) ;2 5g (kgBW)剂量的大豆磷脂显著降低脾组织中丙二醛的含量 (P <0 0 5 ) ;但 3种剂量的大豆磷脂对肝、心和脾组织中的脂褐素含量均没有明显的影响。

褐藻多糖硫酸酯对老龄小鼠过氧化酶和脂褐素的影响

目的研究褐藻多糖硫酸酯(APS)对老龄小鼠过氧化物酶(POD)、脂褐素(LPF)的影响。方法愈创木酚比色法(Ⅰ法)测定对照组、APS组POD活性,荧光分光光度法测定对照组、APS组LPF含量。结果老龄小鼠APS组脑、心、肝、肾POP活性明显升高,与对照组比较差异显著(P<0.05,P<0.01);APS组脑、心、肝、肾LPF含量明显降低,与对照组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。结论APS能够提高POD活性,降低LPF含量,增强机体抗衰老作用。

大鼠补硒后血谷胱甘肽过氧化酶，维生素E和脑脂褐质的变化

采用猪油（Ｌ）或玉米油（Ｍ）加胆固醇饲料诱导大鼠高脂血症模型以含硒量约为３．５ｍｇ／ｋｇ的富硒饲料Ｌａｒｄ－Ｓｅ（Ｌ一Ｓｅ），Ｍａｉｚｅｏｉｌ－Ｓｅ作为干预因素，观察实验性高脂血症大鼠补硒后血液ＧＳＨ－Ｐｘ，ＶＥ和大脑脂褐质（ＬＰＦ）的变化。结果表明，Ｌ－Ｓｅ组的ＧＳＨ－Ｐｘ活性比Ｌ组升高４２．８６％；玉米油是否加硒的两组（Ｍ和Ｍ－Ｓｅ）动物血清ＶＥ浓度均高于Ｌ，Ｍ－Ｓｅ组比Ｍ组升高２４．７７％。但富硒的Ｌ－Ｓｅ组ＶＥ水平比Ｌ组升高近７３％。此外，补硒动物（Ｌ－Ｓｅ和Ｍ－Ｓｅ）的大脑ＬＰＦ明显低于非补硒组。相关分析的结果显示，血Ｓｅ，肝Ｓｅ含量与ＧＳＨ－Ｐｘ呈明显正相关，血硒与血清ＶＥ呈正相关，肝硒与大脑ＬＰＦ呈明显负相关。上述结果提示，富硒饲料对增强高血脂大鼠体内抗氧化能力，减少脂质过氧化作用有效。

沙棘提取物对老龄大鼠脑脂褐素的影响

目的和方法 采用胡颓子科野生类植物沙棘提取物灌胃 Wistar老龄鼠 30 d后 ,观察类其对老龄鼠脑组织脂褐素 (L ipofusion)的影响及血清中脂质过氧化物 (MDA)水平。结果 实验组老龄鼠脑组织脂褐素含量及血清中脂质过氧化物水平明显低于老龄鼠对照组。结论 沙棘提取物是一种较强抗氧化剂 。

艾灸对老龄小鼠内脏组织脂褐质水平的影响

本研究应用荧光技术观察了艾灸前后老龄小鼠内脏组织脂褐质的水平，结果发现，艾灸后老龄小鼠的心、脑、肾组织中的脂褐质较对照组明显下降，其差异有非常显著性意义。说明艾灸能减少内脏组织中脂褐质的沉积，防止其对内脏的损害，从而延缓内脏组织的衰老，维持其正常的生理功能。由此可见，艾灸在净化血液。

寿聪胶囊对老年性痴呆模型大鼠总抗氧化力、脂褐质及脑组织形态学的影响

目的观察寿聪胶囊对老年性痴呆大鼠脑组织及血清中总抗氧化力(TAOC)、脂褐质(LIP)及脑组织形态学的影响,以进一步探讨寿聪胶囊防治老年性痴呆的作用机制。方法选用Wistar雄性大鼠,随机分成空白对照组、模型对照组、脑复康组及寿聪胶囊低、高剂量组,每组9只。大鼠颈部注射D-半乳糖合并腹腔注射东莨菪碱制备老年性痴呆(AD)大鼠复合模型,应用中药复方寿聪胶囊进行防治,采用分光光度法测定脑组织及血清中TAOC、LIP的含量,光镜下观察脑组织形态学的变化。结果与模型组相比,寿聪胶囊能显著提高AD大鼠脑匀浆及血清中TAOC的活性,降低LIP的含量;而且明显减轻AD的病理损害。结论提示增强脑组织及血清中TAOC活性、降低LIP含量可能是寿聪胶囊防治AD的作用机制之一。

小鼠脑组织中脂褐素和丙二醛相关关系的观察

目的观察小鼠脑组织中脂褐素与丙二醛（ＭＤＡ）的关系。方法分别测量小鼠脑组织中ＭＤＡ的含量与脂褐素的含量，以脑组织中ＭＤＡ的含量代表自由基水平，观察其与脂褐素的关系。结果两者呈曲线相关（ｒ＝０．７４，Ｐ＜０．００２）。结论脂褐素相对于自由基呈一种指数增长，而且从一个新的角度在某种程度上支持了脂褐素作为老年性反应指标的可靠性。

胆囊收缩素对实验性神经细胞老化过程中脂褐素的影响

目的 观察 CCK8对实验性神经细胞老化过程中脂褐素的影响。方法 采用 NBA2 细胞无血清培养建立神经细胞老化实验模型 ,以显微荧光分光光度仪测定单个细胞内脂褐素自发荧光值作为细胞老化指标 ,观察 CCK8对细胞老化过程的影响。结果 在无血清培养条件下 ,细胞内脂褐素荧光值随培养时间的延长而累积性增加 (P<0 .0 1 )。将 CCK8加入无血清培养液 ,CCK8作用 1 0 d和 1 5 d都可显著降低细胞内脂褐素荧光值 (P<0 .0 1 )。结论 在无血清培养条件下 ,NBA2 细胞由分裂增殖变为分化成熟老化 ,反映了神经细胞的老化过程。而 CCK8可以延缓细胞的老化进程。

还少丹对老年小鼠脂褐素含量和DNA分子结构稳定性的影响

目的 研究还少丹对老龄小鼠脂褐素含量和DNA分子结构稳定性的影响。方法将36只昆明种老年小鼠(20月龄),按体质量随机分为3组,另设12只2月龄同种小鼠作为青年对照组,共4组:①老年对照组;②老年还少丹组;③老年维生素E(VE)组;④青年对照组。连续喂养10周后,采用荧光分光光度法测定脑组织的脂褐素水平和肝组织DNA双链解旋剩余率;用紫外分光光度法测定肝组织DNA碱变性增色效应。结果青年对照组、老年还少丹组、老年VE组的脂褐素含量明显低于老年对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与老年对照组比较,青年对照组和老年还少丹组的DNA碱变性增色效应明显降低,而DNA双链解旋剩余率显著增高,差异均具有统计学意义(P<0.05),而老年VE组的差异无统计学意义(P>0.05)。结论还少丹能有效降低脂褐素的含量,保护DNA结构的稳定性,达到延缓衰老的目的 。