脂质分析技术及其在植物种子脂质代谢调控研究中的应用进展

脂质是一类具有独特生理功能活性的化合物,参与调节多种植物应答非生物胁迫过程,对维持植物组织中生理动态平衡至关重要。脂质组学(Lipidomics)自2003年被提出后,已迅速发展成为对脂质整体系统分析的一门新兴学科,为传统代谢组学注入新的技术支撑,有助于阐明脂类物质在植物中的代谢调控机制。同时,质谱成像技术因其具有无标记、非特异性、高灵敏度、多物质同时分析等优势,被广泛应用到植物组织中各类脂质分子的空间分布研究。介绍了脂质组学和质谱成像技术的研究现状,重点综述脂质分析技术在植物种子脂质代谢调控研究中的最新进展,特别是新兴质谱成像技术在植物种子中脂类物质的成像应用。脂质组学和质谱成像技术作为目前多组学技术的重要补充,将为植物代谢途径和调控机制的深入探究提供新的契机。亚微米级高空间分辨率质谱成像技术的不断发展,将进一步推动植物在空间分辨水平的脂质代谢调控网络的深入解析和前沿应用研究。

n-3多不饱和脂肪酸对大鼠结直肠癌的影响及与脂质代谢相关基因的研究

目的探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3PUFAs)对大鼠结直肠癌的影响及与脂质代谢相关基因的研究。方法选取60只SPF级SD大鼠,将大鼠随机分为实验组与对照组,每组各30例。以N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)经灌肠方式诱导大鼠大肠癌模型。同时,于建立模型1周前,对照组喂养含葵花籽油饲料(n-6PUFAs),实验组喂养含鱼油饲料(n-3PUFAs),直至16周。处死大鼠并解剖,寻找原发肿瘤并观察周围淋巴结转移情况。将可疑组织进行HE染色,行常规病理学检查。采用气象色谱方法测定无病变结肠组织n-3PUFAs含量。采用RT-PCR方法检测脂质代谢关键调控基因:脂肪酸合成酶(FAS)、环氧合酶2(COX-2)、5-脂氧合酶(5-LOX)和过氧化物酶增殖活化受体(PPARβ及PPARγ)的mRNA表达。结果实验组的肿瘤发生率低于对验组的肿瘤发生率(P<0.05)。实验组无病变结肠组织n-3PUFAs含量高于对照组(P<0.01)。实验组FAS、COX-2、5-LOX和PPARβmRNA的表达低于对照组(P<0.05或P<0.01),实验组PPARγmRNA的表达高于对照组(P<0.01)。结论 n-3PUFA通过影响脂质代谢关键调控基因的表达,起到抗肿瘤的作用。

右美托咪定抑制肝细胞脂质累积的作用及机制研究

目的:探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对肝细胞脂质代谢过程的调控作用及可能机制。方法:分离小鼠原代肝脏细胞,用游离脂肪酸处理24 h构建肝细胞脂质累积模型,分别用浓度200 ng/mL,500 ng/mL和1000 ng/mL的DEX药物处理原代肝脏细胞24h。收集细胞进行油红O染色观察细胞中脂质累积情况;通过实时荧光定量PCR和免疫印迹技术检测细胞脂质代谢关键基因的表达情况;通过实时荧光定量PCR检测DEX处理不同作用时间点α_(2A)-肾上腺素受体的表达变化情况;进一步通过免疫印迹技术探究DEX对相关信号通路蛋白表达的影响。结果:不同浓度DEX药物处理原代肝脏细胞后,细胞中脂质累积明显减少,且呈剂量依赖性。与脂肪酸和甘油三酯合成的关键基因如脂肪酸合成酶、硬脂酰辅酶A去饱和酶1及过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达显著被抑制(P<0.05);α_(2A)-肾上腺素受体的表达先升高后被抑制;DEX药物可显著降低原代肝脏细胞P65和P38的磷酸化水平(P<0.05)。结论:DEX可减轻肝脏细胞脂质累积,其机制可能与细胞α_(2A)-肾上腺素受体和MAPK/NF-κB信号通路被抑制有关。

丹参素上调LCAT和CYP7A1的表达对高血脂大鼠脂质紊乱的调节作用

为探究丹参素(Salvianic acid,SA)对高脂血症大鼠的调节作用及机制,将40只SD大鼠随机分为正常对照组(S,n=10)、高血脂模型组(M,n=10)、丹参素高剂量组(SAH,n=10)和低剂量组(SAL,n=10)。高脂饲料喂养建立高脂血症模型,边造模边灌胃给药。8周后,采用ELISA法测定各组大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白AI(apo AI)和载脂蛋白B(apo B)的含量;RT-PCR和Western-blot检测卵磷脂胆固醇脂酰基转移酶(LCAT)和胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)的表达;HE染色检测肝脏组织病理学形态。结果发现丹参素能明显降低模型大鼠TC、TG、LDL-C和apo B含量(p<0.05),上调HDL-C、apo AI、LCAT和CYP7A1的表达,同时减轻肝脏脂肪病变,高剂量组效果更显著。因此,丹参素对高血脂大鼠血脂紊乱的调节作用机制可能与调控脂质代谢载脂蛋白、LCAT和CYP7A1的表达有关。