人溶菌酶cDNA克隆与CHO/dhfr-细胞中的分泌性表达

目的探讨人溶菌酶(hLYZ)cDNA的克隆及在二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO/dhfr-)中的分泌性表达。方法采用RT-PCR的方法,从人胎盘组织中克隆hLYZ cDNA,构建hLYZ真核分泌性表达载体,利用脂质体共转染CHO/dhfr-细胞,筛选得到表达hLYZ的CHO抗性细胞株。结果 hLYZ基因成功连接到真核分泌性表达质粒pSecTag2/HygroB上,hLYZ融合蛋白在二氢叶酸还原酶/CHO-k1表达系统中得到成功表达。结论成功构建真核可溶性表达载体pSecTag 2/Hypro-hLYZ,为规模化、工程化生产hLYZ奠定基础。