髓过氧化物酶响应的荧光探针脂质体的制备及体外细胞成像研究

目的:制备髓过氧化物酶响应的鲁米诺-Cy5荧光探针脂质体,优化制备工艺,并探究体外细胞成像效果。方法:以卵磷脂、胆固醇以及胶原蛋白为脂质体原料,通过薄膜水合法制备鲁米诺-Cy5荧光探针脂质体,采用单因素分析和响应面实验优化制备工艺,同时采用经LPS刺激后出现炎症反应的RAW264.7小鼠巨噬细胞为模型,探寻髓过氧化物酶响应的荧光探针脂质体的细胞成像效果。结果:当鲁米诺∶Cy5质量比为2∶1、膜材比为4∶1、水合温度为40℃时,荧光探针脂质体包埋效果最好,鲁米诺包封率为57.26%、Cy5包封率为60.22%。鲁米诺-Cy5荧光探针脂质体平均粒径为205.01 nm,Zeta电位为-30.41 mV。细胞成像结果显示,在经LPS刺激后出现炎症反应RAW264.7小鼠巨噬细胞中,荧光探针脂质体中的鲁米诺能够响应髓过氧化物酶活性发出蓝色荧光,同时,该蓝色荧光能够激发荧光脂质体中Cy5在677 nm发出红色荧光,实现深层炎症细胞的成像检测。结论:鲁米诺-Cy5荧光探针脂质体在体外能够响应髓过氧化物酶,并能通过生物发光共振能量转移(bioluminescence resonance energy transfer,BRET)实现对深层炎症细胞的成像检测,在肿瘤、癫痫等导致的炎症反应的评价和治疗中具有一定的应用价值。

LewisY拟糖脂脂质体探针的制备及免疫活性检测

目的 :自行合成LewisY拟糖脂并寻找一种合适的标记拟糖脂的方法。方法 :应用LewisY四糖合成了LewisY拟糖脂 ,以此制备了含3H 胆固醇标记和LewisY拟糖脂的脂质体 ,利用LewisY糖特异性的抗体鉴定了糖脂的免疫学活性 ,并检测了LewisY拟糖脂 脂质体与该抗体的结合能力。结果 :在适宜条件下 ,LewisY四糖拟糖脂的合成率为 4 0 % ,合成的特异性糖脂高效薄层层析为单一条带 ;制备的LewisY拟糖脂 脂质体与Lewis寡糖抗体具有特异结合能力。结论 :以3H 胆固醇标记的LewisY拟糖脂 脂质体是一种效果良好的间接标记的拟糖脂探针。

利用乳腺钼靶对纳米探针的成像预测纳米化疗药物的疗效

目的 利用数字化乳腺钼靶机检测肿瘤内部X线纳米探针对比剂的摄取量，前瞻性地预测临床使用的纳米化疗药物的疗效。方法 对所有动物的操作程序均获得了动物保护和使用委员会的许可。首先构建有较长循环时间的100nm大小的注射用脂质体探针，载碘量为155mg／mL。