心腔内超声心动图联合三维标测系统指引下脉冲场消融心房颤动一例

本文报道了1例在心腔内超声心动图联合三维标测系统引导下进行脉冲场消融阵发性心房颤动手术,术中顺利达到肺静脉隔离的消融终点,取得了良好的临床效果,初步证实该技术的安全性及可行性。

脉冲场凝胶电泳结合PCR技术在霍乱弧菌研究中的应用

脉冲场凝胶电泳(PFGE,Pulse Field Gel Electrophoresis)结合PCR(Polymerase Chain Reaction)技术在病原微生物检测中得到越来越广泛的应用,并且逐步成为“金标准”。霍乱弧菌是人类霍乱的病原体,可存在于水产品中,其引发的食源性霍乱暴发已是全球公共卫生问题之一,通过采用脉冲场凝胶电泳结合PCR技术,将为霍乱弧菌导致的疫情防控提供更加准确可靠的手段。为了对PFGE结合PCR技术在霍乱弧菌检测领域的应用提供参考,文章对PFGE结合PCR技术在霍乱弧菌的分子鉴定、分子分型和耐药性研究等方面进行了总结,并对其在霍乱弧菌株间竞争作用的新研究方向进行展望。

危重监护病房铜绿假单胞菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分析

目的 了解我院危重监护病房 (简称 ICU)铜绿假单胞菌的耐药性。建立一种快速、准确、可靠、重复性好的基因分型方法来研究 ICU铜绿假单胞菌的分子流行病学。方法 采用全自动鉴定仪 ( Walkaway-4 0 DADE Microscan Inc)鉴定铜绿假单胞菌 ,并根据半定量微量肉汤系统测定 7种常用抗生素对细菌的最低抑菌浓度 ,确定其耐药情况。用脉冲场凝胶电泳 (简称 PFGE)对限制性酶切片段分离。通过对每一株菌染色体DNA指纹图谱的比较分析其克隆构成 ,了解其流行状况。结果 2 4株菌对 7种抗生素的耐药性由高到低依次为 :环丙沙星 ( 87.5 % ) ,庆大霉素 ( 75 % ) ,亚胺培南 ( 6 6 .7% ) ,头孢曲松 ( 6 6 .7% ) ,哌拉西林 ( 2 9.2 % ) ,头孢他啶 ( 2 0 .8% ) ,阿米卡星 ( 12 .5 % )。8株菌经 PFGE分析初步证实其中 4株菌具有明显相关性。结论 铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药率高 ,多重耐药情况严重。 PFGE具有分辨力高、重复性好的特点 ,是研究

阪崎肠杆菌脉冲场凝胶电泳分型及耐药研究

目的:研究北京、新疆、广东、辽宁等地和新西兰、美国、印度进口食品中分离的阪崎肠杆菌(ES)分子型别和耐药情况。方法:用限制性内切酶XbaⅠ酶切ES染色体DNA进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)实验,用BioNumerics软件对不同地区分离的ES进行比对,分析菌株之间的相似度。用Vitek2进行药敏实验,分析ES耐药情况。结果:38株ES(其中ES12为标准菌株)分成37个PFGE型,相似度在25%～100%,未表现出优势带型和地区特异性,而部分食品被遗传紧密相关的ES克隆株污染。药敏实验结果显示37株ES共有9种耐药谱,部分菌株对呋喃类、头孢类、β-内酰胺类耐药。结论:建立的PFGE方法可应用于ES的分子分型和溯源。

腹泻患儿粪便中沙门菌的血清型、药敏分析及脉冲场凝胶电泳分子分型研究

目的研究2019年北京市朝阳区0~10岁腹泻患儿粪便中分离出的沙门菌的血清型、脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分子分型研究及耐药特点。方法对分离自腹泻患儿病例的47株沙门菌进行血清分型,采用微量肉汤稀释法进行27种抗生素的药敏实验;采用PFGE脉冲场凝胶电泳进行指纹图谱分型研究。结果47株沙门分为8种血清型,优势血清型有2种,分别为肠炎沙门菌23株占48.94%,鼠伤寒沙门菌14株占29.79%。47株沙门菌对磺胺异恶唑耐药率(57.45%)最高,其次为氨苄西林(48.94%)和链霉素(48.94%)。23株肠炎沙门菌可分成8个PFGE指纹图谱,14株鼠伤寒沙门菌可分成13个PFGE指纹图谱。结论北京市朝阳区0~10岁儿童食源性沙门菌血清主要为肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌,各血清型的耐药性有所不同,PFGE指纹图谱呈多样性。

阪崎肠杆菌脉冲场凝胶电泳分型的研究

目的对29株阪崎肠杆菌分离株和2株阪崎肠杆菌模式株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型研究。方法分别利用限制性内切酶XbaⅠ和SpeⅠ酶切阪崎肠杆菌染色体DNA进行PFGE分析,利用BioNumerics软件进行聚类分析。结果31株阪崎肠杆菌使用XbaⅠ和SpeⅠ酶切分别有30种PFGE带型。除ES004和ES005外,其他29株阪崎肠杆菌经XbaⅠ或SpeⅠ酶切后的PFGE条带之间均存在不同程度的差异。来源于同品牌同批次中不同包装的产品中的ES004和ES005分离株XbaⅠ和SpeⅠ酶切图谱完全一致(相似度为100%)。根据BioNumerics软件分析结果可知,除分离株ES004和ES005外,其他分离株的带型和样品来源之间无显著相关性。结论虽然XbaⅠ酶切的PFGE带型平均条带少于SpeⅠ,但对阪崎肠杆菌具有足够的分辨率。两种PFGE分型方法都可应用于阪崎肠杆菌的分子分型和溯源。

脉冲场电泳分析布鲁菌标准菌株

目的探索一种布鲁菌分型的快速、准确、可靠的分子生物学方法。方法建立脉冲场凝胶电泳(PF-GE)的分子生物学分型方法,比较染色体限制性内切酶图谱,确定菌株的亲缘关系。结果在分析的19株布鲁菌标准菌株中,6种布鲁菌的PFGE图谱各不相同,但猪种菌和犬种菌的PFGE图谱只有1条带不同。羊种菌和猪种菌内各生物型均可在各自种内被区别,但牛种菌各生物型被区分为3类。从系统发生的观点来看,羊、牛、猪种菌是从共同祖先进化来的,犬种菌可认为是猪种菌的主要株或是刚从该种布鲁菌进化而来的株。沙林鼠种菌与牛种菌关系密切,而绵羊附睾种菌与猪种5型菌遗传距离也较近。结论PFGE方法可用于布鲁菌的基因分型的研究,是对传统分型方法一种较好的补充。

上海市禽源阿贡纳沙门氏菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分型研究

为了解上海市2010-2011年零售禽肉及禽类粪便中阿贡纳沙门氏菌（S．agona）的流行、耐药性和分子分型情况，本研究通过对零售禽肉及禽类粪便中的沙门氏菌进行分离鉴定得到14株禽源阿贡纳沙门氏菌，通过K-B法进行耐药性分析，并应用脉冲场凝胶电泳（pulsefieldgelelectrophoresis，PFGE）技术对菌株进行分型研究。结果显示，14株禽源阿贡纳沙门氏菌对头孢替呋、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢噻甲羧肟、甲氧氨苄嘧啶等敏感，对磺胺异恶唑等具有较强耐药性（21．4％），对链霉素中度敏感率较高（92．8％），PFGE分型分为6个基因型。结果表明部分菌株间具有高度的同源性，且耐药菌株与PF—GE型间存在相关性。

脉冲场凝胶电泳在肠炎沙门菌食源性疾病溯源中的应用

目的对2006年广州地区食源性疾病中分离的肠炎沙门菌进行分子分型,探讨广州地区肠炎沙门菌的分子型别和多态性,为食源性疾病溯源及致病菌数据库的建立提供依据。方法采用限制性内切酶XbaI,对2006年分离到的菌株进行PFGE分子分型,使用BioNumericsVersion4.0软件(使用Dice系数和UPGMA法)对菌株进行聚类分析,并与深圳市的肠炎沙门菌PFGE型别进行比较。结果所有74株肠炎沙门菌均得到一致的PFGE克隆型,表明两次不同的食源性疾病均由同一PFGE型引起。广州与深圳的肠炎沙门菌PFGE图谱的比较表明,两地食源性疾病分离株具有很近的亲缘关系。结论PFGE分子分型与流行病学资料紧密结合可增强对肠炎沙门菌食源性疾病的溯源和预警。

副溶血弧菌脉冲场凝胶电泳技术分子分型分析

目的分析副溶血弧菌菌株之间的相关性,建立深圳市副溶血弧菌的DNA指纹图谱数据库。方法56株副溶血弧菌基因组DNA经NotI酶切,通过脉冲场凝胶电泳获得电泳图谱,利用BioNumerics软件对图谱进行聚类分析。结果56株副溶血弧菌被分为34种脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)图谱,聚类分析显示,在90%的相似性水平上,28株细菌谱型属于同一个群,其中27株均为食物中毒患者分离株,并各年度均有分离。结论深圳地区存在遗传谱系紧密相关的副溶血弧菌流行克隆。建立DNA指纹图谱数据库为建立分子分型监测网络打下了良好的基础,有助于副溶血弧菌所致食源性疾病的及时主动监测和传染来源追踪。

云南省食源性沙门菌血清分型及脉冲场凝胶电泳的指纹图谱

目的研究云南省食源性沙门菌的血清型,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法对优势血清型进行分子分型,建立云南省食源性沙门菌PFGE指纹图谱资料库,为食源性疾病溯源提供数据.方法对2013年至2016年从云南省食源性疾病监测中分离到的322株食源性沙门菌进行血清学分型,采用Bio Numerics软件对148株沙门菌DNA酶切图谱进行类聚分析,通过聚类比较分析菌株间的相关性,建立指纹图谱库.结果 322株沙门菌血清分型主要包括A、B、C、D、E、F、G群等7个群,鼠伤寒沙门氏菌是主要血清型,占11.4%(37/322).采用Bio Numerics软件对148株沙门菌DNA酶切图谱进行类聚分析,根据电泳产生条带的位置和数量的不同,共分为102个不同的PFGE带型.按照90%的相似度,这些PFGE带型可以分为39个大小不一的聚类群,呈现多样性.结论云南省食源性沙门菌分子分型复杂,以鼠伤寒沙门氏菌为主,PFGE带型呈现多样性.

重症监护病房医院感染铜绿假单胞菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分型

目的了解ICU铜绿假单胞菌(Pa)感染的分子流行病学特征。方法对ICU临床分离的14株Pa菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型及耐药性检测。结果14株Pa分6个PFGE型别,分别命名为A、B、C、D、E和F型,其中A型为优势流行菌株共8株(57.1%),B型2株(14.3%),其余型别各有1株(分别占7.1%)。Pa对头孢他啶等15种抗菌药物产生不同程度的耐药性,其中8株A型Pa为泛耐药菌株。结论PFGE分型A型Pa菌株具有同源性,是本次ICU发生Pa医院感染的流行株,PFGE分型技术可以准确和快速地用于Pa引起医院感染溯源分型。

杭州甲型副伤寒分离菌株脉冲场凝胶电泳分型

目的研究杭州部分地区甲型副伤寒暴发与散发分离菌株的分子流行病学关系及菌株耐药状况。方法对2002-2005年杭州地区L县和X区5起暴发疫情和10起散发病例的分离菌株,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方法进行分子分型,采用纸片法(K-B法)测定2种分离株的抗生素敏感性。结果分离自2个地区的15株菌株被分为A、B、C、D共4型,A、B、C等3个型密切近缘,同属一个克隆系。L县2005年7月和8月2起暴发菌株和8月3株散发菌株的PFGE型别均属B型,X区2004年12月和2005年9月的2起暴发菌株和9,10月的6株散发菌株的PFGE型别同属C型。4个型别的菌株对复方磺胺甲唑和利福平均100%耐药,对头孢唑啉、头孢曲松、链霉素、庆大霉素、阿米卡星、氯霉素、诺氟沙星、环丙沙星、呋喃唑酮均敏感,对氨苄西林、多西环素和四环素等不同程度耐药。结论除1株散发菌株外,2002-2005年分离自杭州L县和X区的甲型副伤寒病原菌属于同一克隆系。散发病例可能均属于暴发流行后的散发流行。

奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌脉冲场凝胶电泳分型研究

为探讨新疆北疆奶牛乳房炎致病菌的流行规律,本研究采用SmaⅠ酶切,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型的方法对43株分离自新疆6个规模奶牛场隐性乳房炎奶样的金黄色葡萄球菌进行了分子分型比较研究。结果表明,所有菌株都能被PFGE法分型,43株金黄色葡萄球菌可分为A、B、C、D和E5个基因型。A型株(22株,51.2%)有13个亚型,相似度在81.8%～96.8%之间,在5个奶牛场均分离到,是主要的流行株;B型(25.6%)、C型(14.0%)、D型(7.0%)各型别内菌株间的相似度为100%,E型仅有1株。不同地区主要流行株有差别:乌鲁木齐主要流行A型菌株,昌吉以A型和B型菌株为主,而奎屯主要流行C型和B型。有2个奶牛场流行株只有1个基因型,也有2种基因型(3个牛场)或3种基因型(1个牛场)同时存在,但以1种为优势株。这些结果提示,不同地区主要流行株有差别,多数奶牛场以1种流行株感染为主,不同牛场可能流行相同的菌株,在较大地域范围内某些流行株具有侵染优势。

食源性金黄色葡萄球菌脉冲场凝胶电泳分型分析

对石家庄地区食源性金黄色葡萄球菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,建立石家庄市金黄色葡萄球菌PFGE分型的数据库,探讨引起食物中毒金黄色葡萄球菌菌株和其他食源性金黄色葡萄球菌的分子特征。利用PFGE分型技术对2010至2012年石家庄市的75株食源性金黄色葡萄球菌进行全基因组分析,DNA酶切图谱用BioNumerics软件进行聚类分析。75株食源性金黄色葡萄球菌的PFGE图谱的相似性系数在54%～100%之间,经聚类分析得到45个PFGE型别,6起食物中毒的金黄色葡萄球菌分别由PFGE01型、PFGE02型、PFGE11型、PFGE12型、PFGE15型和PFGE45型引起。建立的金黄色葡萄球菌PFGE分型数据库分子型别较多,且存在差异明显的多个克隆系,对石家庄地区金黄色葡萄球菌引起食物中毒的防控和溯源工作有重要意义。

鸡肉生产链中沙门氏菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分型分析

【目的】了解拥有养殖-屠宰-运输-销售环节的现代化农牧食品企业鸡肉生产链各环节中沙门氏菌耐药情况及分子分型特征。【方法】本研究对在2020年10月-2021年09月从苏北某农牧食品企业下属的养殖场、屠宰厂、运输车辆、专营店分季度连续采集样品中分离得到的37株沙门氏菌,采用纸片扩散法进行13种常用抗菌药物敏感试验,PCR进行11种耐药基因检测、脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型检测。【结果】37株沙门氏菌均耐药,对氨苄西林耐药率最高,为67.57%,对多西环素、庆大霉素、四环素耐药率超过50%,对头孢西丁耐药率最低,为8.11%,各环节沙门氏菌分离菌株对氨苄西林的耐药率均超过50%,沿该鸡肉生产链氨苄西林耐药率呈现下降趋势,耐药率同样呈现下降趋势的抗菌药有头孢他啶、头孢曲松、环丙沙星、四环素,耐药率呈现上升趋势的抗菌药有头孢西丁、甲氧苄氨嘧啶、庆大霉素、丁胺卡那霉素;耐3种及以上抗菌药的菌株为34株,多重耐药率为94.59%,养殖环节、运输环节和销售环节沙门氏菌分离株的多重耐药率均为100%;养殖环节沙门氏菌分离株耐药物种类数最多集中在耐7种及以上抗菌药,对8种抗菌药的耐药率高于其他环节;耐药基因中bla PSE的检出率最高,为56.76%,未检测到tetC耐药基因;PFGE分型共有26种不同的PFGE带型产生,相似度100%的带型有7组。【结论】苏北某农牧食品企业鸡肉生产链中沙门氏菌有较高的耐药性,多重耐药严重,养殖环节耐药性高于其他环节,PFGE分型提示耐药菌株能够沿生产链“养殖-屠宰”的途径传播,且长期存在,养殖环节避免耐药沙门菌的产生是保障鸡肉产品安全生产关键点。

广东省伤寒沙门菌株的脉冲场凝胶电泳分型研究

目的运用脉冲场凝胶(PFGE)电泳研究广东省伤寒沙门菌的分子流行病学。方法用PFGE对菌株进行分子分型,所得结果用Bionumerisc V4．0软件进行聚类分析。结果来自广东省6个地区的51株伤寒沙门菌,根据电泳图谱分析,可分为45个PFGE型别,菌株间的相似值在38．27％～100．00％,6个地区间没有同源的菌株,同一个地区不同年份也没有同源的菌株,而同一地区同一年份可出现同源的菌株。结论PFGE是一种敏感的研究伤寒沙门菌分子流行病学的基因分型方法。

脉冲场凝胶电泳技术对海南省两起奇异变形杆菌引起的食物中毒分析

目的对2007年7月19和22日发生的两起食物中毒事件中分离到的奇异变形杆菌进行分析,判断暴发原因。方法对患者和食物样品进行常规分离培养鉴定,分离到的菌株进行PFGE分型比较。结果自海南定安县食物中毒中采集的患者和食物51份标本分离出14株奇异变形杆菌,澄迈县食物中毒调查中采集的5份患者标本分离出3株奇异变形杆菌。这些菌株经PFGE聚类分析得到8种带型,相似性百分比在28.1%～100.0%之间。定安县分离的14株菌株中有9株菌带型一致,澄迈县暴发分离株中有2株菌带型一致。结论这两起食物中毒中分别分离的具有相同带型特征的奇异变形杆菌应是引起暴发的原因。