离子色谱-脉冲安培电化学检测引流组织液中的妥布霉素

建立了一种离子色谱(IC)分离,脉冲安培电化学法(PAD)直接检测人体引流组织液中妥布霉素的分析方法。采用高交换容量阴离子交换柱和低浓度KOH在线淋洗分离,不需要采用衍生化和离子对-柱后加碱等实现分离,并可在短时间内完成妥布霉素的测定。采用本方法测定的妥布霉素线性范围为0.05～10mg/L,线性相关系数为0.9997,保留时间、峰面积和峰高的相对标准偏差分别为0.14%,0.38%和0.81%,检出限为7.11-g/L。本方法成功应用于骨髓炎患者引流组织液中妥布霉素的测定,样品实际加标回收率为100.8%。

微量扩散-离子色谱/脉冲安培电化学检测法快速分析工业废水中的氰化物

建立了微量扩散-离子色谱/脉冲安培检测法(IC/PAD)用于测定工业废水中的氰化物。对于基质复杂的工业废水,先通过微量扩散法进行净化富集,再采用IC/PAD法对样品中的氰化物进行分析检测。在最佳条件下,氰化物在1.0~200.0μg/L范围内具有良好线性,工业废水中氰化物的检出限和定量限分别为0.15μg/L和0.50μg/L,方法加标回收率在88.6%~108.5%之间。本方法灵敏度高、快速安全、操作简便,为工业废水中氰化物的检测提供了一个新的选择。

巴戟天药材寡糖化学成分的高效阴离子交换色谱-脉冲安培电化学检测器指纹图谱研究

目的建立巴戟天药材寡糖化学成分的高效阴离子交换色谱-脉冲安培电化学检测器(HPAEC-PAD)特征指纹图谱,为制定巴戟天药材质量标准提供参考数据。方法利用HPAEC-PAD,色谱条件为,Hamilton RCX-10(4.1 mm×250 mm,7μm),100 mmol.L-1 NaOH溶液(A)-100 mmol.L-1 NaOH,500 mmol.L-1 NaAc混合溶液(B)流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL.min-1,柱温为30℃,检测电压0.1V,分析时间为40 min。结果建立了巴戟天药材寡糖化学成分的HPAEC-PAD指纹图谱,并标定出巴戟天药材20个共有峰,其中3个峰经与对照品比对为蔗果三糖、耐斯糖(nystose)、1F-果呋喃糖基耐斯(1F-fructo-furanosylnyslose),经指纹图谱系统解决方案软件(ChromafingerTM)生成共有模式,并进行相似度和主成分分析。不同产地巴戟天药材均含有以上共有峰,但在共有峰的峰高上有差异,并可用于区别巴戟天及其常见混伪品。结论利用该方法建立的巴戟天寡糖类化学成分的指纹图谱特征性和专属性强,且该方法快速、灵敏、可靠,可用于控制巴戟天药材的质量。

利用高效阴离子交换色谱-脉冲安培电化学检测法测定不同生长年限巴戟天中6种寡糖类成分含量

目的采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培电化学检测法（HPAEC-PAD）对巴戟天不同生长期中的6种寡糖（葡萄糖、果糖、蔗糖、1-蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖）进行检测,对其动态积累规律进行分析,为研究巴戟天的最佳采收期提供参考。方法利用高效阴离子交换色谱-脉冲安培电化学检测法,色谱条件如下：Hamilton RCX-10色谱柱（4.1 mm×250mm,7μm）,100 mmol·L-1Na OH溶液（A）-100 mmol·L-1Na OH溶液,500 mmol·L-1Na OAc混合溶液（B）为流动相梯度洗脱,流速0.8 m L·min-1,柱温35℃,进样量25μL。结果随着生长年限的增加,巴戟天根中的单糖呈现减少的趋势,蔗糖则逐渐增加,聚合度为3或以上的1-蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖则在1~5年间渐增加,然后缓慢降低。结论不同生长年限巴戟天中6种寡糖成分的组成及含量相差较大,提示该类成分的合成与生长年限有一定的关系,为制定适宜的采收期提供参考。

高效液相色谱-脉冲安培电化学检测器法替代微生物检定法测定硫酸新霉素效价的研究

目的建立用于测定硫酸新霉素效价的高效液相色谱-脉冲安培电化学检测器法(HPLC-PAD)。方法建立并验证HPLC-PAD法,测定硫酸新霉素各主要组分含量及相关物质;采用在线膜抑制脱盐技术辅助LC-IT-TOF法测定硫酸新霉素杂质谱,结合组分活性研究确定了硫酸新霉素的主要活性组分;采用半制备液相色谱-蒸发光散射检测器串联制备硫酸新霉素B及硫酸新霉素C精制品,采用波谱手段进行结构确证;采用质量平衡法测定二者的纯度;采用三剂量抗生素微生物检定法测定B、C精制品各自的效价值,推导公式计算出硫酸新霉素的量效转换系数,设计实验进行交互作用考察及实际样品的验证。结果建立的HPLC-PAD方法在分离能力及方法的稳定性上均优于《欧洲药典》(EP)方法,适用于硫酸新霉素各组分的准确定量及有关物质检查;在线膜抑制脱盐技术成功地去除了流动相中的三氟乙酸,对硫酸新霉素的杂质谱进行研究,结合活性研究结果,确定新霉素B和新霉素C为新霉素的主要活性组分;成功制备获得新霉素B、C精制品,通过实验和计算获得了硫酸新霉素的量效转换系数,并通过了验证。结论初步实现了仪器法对微生物生物检定法的替代,基本完成了多组分氨基糖苷类抗生素硫酸新霉素的量效一致性研究工作。

液相色谱-脉冲安培电化学法测定硫酸阿米卡星注射液中主要组分和杂质

建立了一种新的用反相离子对液相色谱(LC)分离、以金电极为工作电极的脉冲安培电化学法(PAD)直接检测硫酸阿米卡星注射液中主要组分及杂质含量的分析方法.流动相为0.033mol·L-1草酸、0.012mol·L-1七氟丁酸、108ml·L-1乙腈,用稀NaOH调节pH至3.4.考察了各色谱参数对分离测定的影响.实验证明,该方法不需要衍生化,可直接检测硫酸阿米卡星.与报道的其他方法相比,该方法不仅能使硫酸阿米卡星注射液中的主要组分阿米卡星和杂质组分卡那霉素A得到了很好的分离,还分离出了其它一些未能确证的组分.可望今后用质谱法等对未知组分进行确证后,对硫酸阿米卡星原料药、注射液等实际样品中的各组分进行测定.

反相离子对色谱-脉冲安培电化学法测定硫酸庆大霉素中各组分含量

建立了一种新的用反相离子对液相色谱(LC)分离,以金电极为工作电极的脉冲安培电化学法(PAD)直接检测硫酸庆大霉素中各组分含量的分析方法。流动相为0.033 mol/L草酸、0.012 mol/L七氟丁酸、210 mL/L乙睛,用稀NaOH调节pH至3.4。与报道的其它方法相比,该方法能使庆大霉素各有效组分C1、C1 a、C2、C2 a很好分离,整个分析过程<30 m in。考察了各色谱参数对分离测定的影响。实验证明,本方法不需要衍生化,可直接检测硫酸庆大霉素。

液相色谱-脉冲安培电化学法测定硫酸卡那霉素中各组分含量

建立了一种用反相离子对液相色谱(LC)分离,以金电极为工作电极的脉冲安培电化学法(PAD)直接检测硫酸卡那霉素中主要组分及杂质含量的分析方法。流动相为0.033mol/L草酸、0.012mol/L七氟丁酸、105mL/L乙腈,用稀NaOH调节pH至3.4。考察了各色谱参数对分离测定的影响。实验证明,本方法不需要衍生化,可直接检测硫酸卡那霉素。与报道的其它方法相比,本方法不仅能使硫酸卡那霉素中的卡那霉素A、B得到了很好的分离,还分离出了其它一些未能确证的组分。如用质谱法等对未知组分进行确证后,对硫酸卡那霉素原料药、注射液、滴眼液及兽药等实际样品中的卡那霉素各组分进行测定。可望成为一种标准分析方法。

反相高效液相色谱-脉冲安培电化学法测定妥布霉素滴眼液含量

建立了一种反相高效液相色谱分离，脉冲安培电化学法直接检测妥布霉素滴眼液含量的分析方法。采用自制的聚苯乙烯-二乙烯基苯聚合物反相柱，以NaOH（50mmol／L）＋乙腈（0．5％）溶液为流动相，不需要衍生化和柱后加碱。对分离及检测的各参数进行优化后，妥布霉素的保留时间为6．2min，测定妥布霉素的线性范围为0．2-20mg／L，线性相关系数为0．9993，保留时间、峰面积和峰高的相对标准偏差分别为0．57％、1．31％和0．61％，检出限为9．97μg／L。方法简单、快速、准确，可用于妥布霉素滴眼液含量测定。

乳制品中乳糖的高效液相色谱-脉冲式安培电化学检测

提出了一种采用高效液相色谱-脉冲式安培电化学检测法测定乳制品中乳糖的方法。样品经乙酸锌和亚铁氰化钾溶液沉淀蛋白质、离心、过滤。氨基色谱柱(250 mm(2.0 mm,5(m)分离,乙腈-水(75+25,体积比)作流动相,流速0.2 mL/min,以0.5 mol/L氢氧化锂溶液碱液做柱后衍生,流速0.4 mL/min,分流进入脉冲式安培电化学检测器检测,外标法定量。结果表明,标准工作液在浓度50.0~1000.0 mg/L范围内,峰面积与浓度成良好的线性关系,线性相关系数(0.999,样品在0.1%,5.0%,50.0%添加水平的回收率为79.0%~99.9%,相对标准偏差为1.2%~6.8%(n=8),方法检出限为0.1%(S/N】10)。本法可满足乳制品中乳糖的定量检测需要。

硫酸依替米星含量测定及有关物质反相高效液相色谱-脉冲安培电化学法的建立

目的建立硫酸依替米星原料药含量测定和有关物质检查用的反相高效液相色谱-脉冲安培电化学（LC-PED）方法。方法以15 m L·L-1三氟乙酸溶液（含500μL·L-1五氟丙酸,1.5 g·L-1无水硫酸钠,8 m L·L-150%氢氧化钠溶液,用50%Na OH调节p H值至3.5）-乙腈（96∶4）为流动相,流速1.0 m L·min-1,脉冲安培电化学检测器检测,四波形检测电位,柱温35℃,检测器温度35℃,柱后加0.8 mol·L-1Na OH溶液,流速0.4 m L·min-1。结果 22个杂质得到分离,可将2010年版《中国药典》方法中无法分离的部分杂质有效分离;依替米星在0.24∽45μg·m L-1内线性关系良好（r=0.999 7）;方法的LOD（S/N=3）为2 ng,LOQ（S/N=10）为6 ng;进样精密度RSD（n=6）为0.8%,含量测定的重复性RSD（n=6）为0.7%,中间精密度RSD（n=18）为0.98%;有关物质的杂质总量重复性的RSD（n=6）为1.72%,杂质总量中间精密度RSD（n=18）为1.71%;溶液在12 h内稳定。结论该方法专属性好,线性范围宽,灵敏度高,重复性优,已经被2015年版《中国药典》收载。

HPLC-PAD法测定盐酸大观霉素含量及有关物质

目的建立了一种新的HPLC-PAD法测定盐酸大观霉素含量及其有关物质的分析方法。方法采用ApolloC18（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，以100mmol／L三氟乙酸为流动相，流速为1．0mL／min，柱温为30℃，柱后衍生氢氧化钠溶液浓度为21g／L，流速为0．5mL／min。脉冲安培检测器，工作电极为金电极（3mm），四电位工作模式。结果盐酸大观霉素在0．15～150μg／mL（r=0．9999）内线性关系良好，杂质A在0．05～50μg／mL（r=0．9999）内线性关系良好，杂质B在0．5～50μg／mL（r=1．0000）内线性关系良好，杂质C在0．5～50μg／mL（r=1．0000）内线性关系良好。大观霉素、杂质A、杂质B和杂质C的检测限分别为1．5、1．0、2．0和3．0ng。大观霉素、杂质A、杂质B和杂质C的精密度分别为1．5％、1．1％、1．6％和1．8％。大观霉素的回收率为96．7％～102．5％。结论该方法准确、灵敏，重复性和耐用性好，可用于盐酸大观霉素及其有关物质的实验室日常测定。

LC-PED法测定硫酸依替米星注射液及硫酸依替米星氯化钠注射液中有关物质

目的建立硫酸依替米星注射液及硫酸依替米星氯化钠注射液有关物质检查的液相色谱-脉冲安培电化学（LC—PED）检测方法，并与2015版《中国药典》收载硫酸依替米星有关物质第二法——HPLC-ELSD法进行比较。方法新建立方法以0．2mol／L三氟乙酸（含0．05％五氟丙酸，1．5g／L无水硫酸钠，用NaOH调节pH值至3．5）-乙腈=96：4为流动相，柱温为35℃，流速为1．0mL／min，四电位波形检测，柱后加碱（50％氢氧化钠溶液1→25），流速0．5mL／min。HPLC-ELSD法按照2015版《中国药典》硫酸依替米星有关物质第二法实验。结果新建立方法的LOD（S／N=3）为2ng，LOQ（S／N=10）为6ng；方法精密度良好；依替米星在0．24-451．t8：／mL（r=0．9997）内线性关系良好；与HPLC-ELSD法相比，分离能力更强，灵敏度更高，结果更加准确。结论该方法选择性更好，灵敏度更高，可作为硫酸依替米星注射液与硫酸依替米星氯化钠注射液有关物质检查的常规方法。

HPLC-PAD法测定硫酸依替米星注射液有关物质及含量

目的:建立硫酸依替米星注射液有关物质及含量的反相高效液相色谱-脉冲安培电化学(HPLC-PAD)法。方法:采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6 mm×250 mm,5μm或效能相当的色谱柱),柱温35℃。以0.2 mol·L^-1三氟乙酸溶液(含0.05%五氟丙酸,1.5 g·L^-1无水硫酸钠,0.8%(V/V)的50%氢氧化钠溶液,用50%氢氧化钠溶液调节pH值至3.5)-乙腈(95∶5)为流动相,流速为每分钟1.0 mL。柱后加碱(50%氢氧化钠溶液1→25,流速每分钟0.5 mL)。用积分脉冲安培电化学检测器检测。结果:依替米星在0.075~50μg·mL^-1(r=0.9996)内线性关系良好;单个最大杂质的重复性试验的RSD(n=6)为1.4%,总杂质的重复性试验的RSD(n=6)为1.7%,含量测定的重复性试验的RSD(n=6)为0.8%;方法的检测限(S/N=3)为75 ng·mL^-1,定量限(S/N=10)为250 ng·mL^-1;供试品溶液在12 h内稳定性良好。9批样品用药典方法(反相高效液相色谱-蒸发光散射法)和HPLC-PAD法测定,HPLC-PAD法的总杂和杂质个数结果偏高,其中6批样品HPLC-PAD法的含量结果偏低。结论:经方法学验证,该方法可以用于硫酸依替米星注射液有关物质及含量的测定。

硫酸依替米星注射液中有关物质测定方法的比较

目的系统比较电喷雾检测器、蒸发光散射检测器、脉冲安培生化学检测器3种方法测定依替米星注射液的有关物质,建立有关物质检测方法。方法建立的HPLC-CAD方法以0.2 mol·L^(-1)三氟乙酸-甲醇(95∶5)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃,雾化温度30℃,气压0.24 MPa,HPLC-ELSD和HPLC-PAD方法采用《中国药典》2015年版条件。结果 HPLC-CAD方法与HPLC-ELSD方法相比,分离度和灵敏度更高;与HPLC-PAD法比较,杂质测定结果更准确。结论建立的HPLC-CAD法分离能力强,检测出的杂质更多,可作为硫酸依替米星注射液有关物质测定的常规方法。

离子色谱法测定硫酸庆大霉素颗粒中的C组分

目的采用离子色谱法测定硫酸庆大霉素颗粒中C组分的含量。方法采用Thermo AcclaimTMAm G C18色谱柱(150mm×4. 6 mm,3μm),流动相为0. 7%三氟乙酸(含0. 025%五氟丙酸、4 m L 50%氢氧化钠,用50%氢氧化钠调p H2. 6)-乙腈(96. 5∶3. 5),流速1. 0 m L·min-1,柱后溶液为2%氢氧化钠,柱后流速0. 3 m L·min-1,柱温35℃,检测器为脉冲安培电化学检测器,工作电极为金电极(直径3 mm),检测电位为四电位。结果硫酸庆大霉素颗粒C1、C1a、C2、C2a组分的线性范围分别为1. 328~132. 8、1. 606~160. 6、7. 378~737. 8、1. 276~127. 6μg·m L-1,回收率为98. 1%~101. 9%。结论所用方法准确,可用于硫酸庆大霉素颗粒的质量控制。

离子色谱法测定硫酸庆大霉素片的C组分及有关物质

目的:建立离子色谱法测定硫酸庆大霉素片的C组分含量及有关物质。方法:采用ThermoAcclaim^(TM) AmG C_(18)(4.6 mm×150 mm,3μm)色谱柱,流动相为0.7%三氟乙酸(含0.025%五氟丙酸,50%氢氧化钠4 mL,用50%氢氧化钠溶液调节pH至2.6)-乙腈(96.5∶3.5);流速为1.0 mL·min^(-1),柱后溶液为2%的氢氧化钠溶液,柱后流速0.3 mL·min^(-1),柱温35℃;检测器为脉冲安培电化学检测器,工作电极为金电极(直径3 mm),检测电位为四电位。结果:硫酸庆大霉素片C_1、C_(1a)、C_2、C_(2a)分别在1.328～132.8、1.606～160.6、7.378～737.8、1.276～127.6μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,回收率范围为98.2%～101.8%;有关物质测定,西索米星在2.632～52.64μg·mL^(-1)、小诺霉素在2.006～25.07μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,西索米星检测下限为0.01μg,小诺霉素检测下限为0.02μg;各杂质与硫酸庆大霉素各C组分色谱峰间均能完全分离。结论:该方法准确灵敏,可用于硫酸庆大霉素片的质量控制。

硫酸西索米星注射液有关物质分析方法的比较

目的建立HPLC-PAD测定硫酸西索米星注射液有关物质的方法并与法定方法进行比较。方法采用IonPac AMG C_(18)(4.0 mm×150 mm,3μm)色谱柱,以0.1 mol·L^(-1)三氟乙酸(含体积分数0.025%五氟丙酸,不含碳酸盐的质量浓度50%氢氧化钠溶液5 mL,用质量浓度50%氢氧化钠溶液调节pH值至2.3)-乙腈(95∶5)为流动相,流速0.7 mL·min^(-1);柱后碱液为0.76 mol·L^(-1)氢氧化钠,流速0.35 mL·min^(-1);柱温30℃,用脉冲安培检测器检测,检测池温度35℃,工作电极金电极(直径3 mm),参比电极Ag/AgCl电极,检测电位为四电位,测定硫酸西索米星有关物质,并将测定结果与法定方法测定结果进行比较。结果西索米星峰能与庆大霉素C_(1a)峰和奈替米星峰完全分开,其他各杂质峰之间能有效分离,空白无干扰,方法的LOD(S/N=3)为2 ng,LOQ(S/N=10)为6 ng,进样精密度RSD(n=6)为0.9%。法定方法与HPLC-PAD法测定得到的硫酸西索米星注射液总杂(%)、最大单杂(%)和含量(%)进行配对样品的t检验,得到P=0.034、P=0.364和P=0.605。结论与法定方法比较,该法专属性好,灵敏度高,精密度好,测定结果准确可靠,可用于硫酸西索米星注射液有关物质测定。

离子色谱法测定硫酸阿米卡星及其制剂的有关物质

目的:建立离子色谱法测定硫酸阿米卡星及其制剂的有关物质。方法:采用YMC ODS-Aq C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为1000 mL无二氧化碳的去离子水中加20 mL三氟乙酸,300μL五氟丙酸,300μL七氟丁酸,50%(v/v)氢氧化钠溶液8 mL,用50%(v/v)氢氧化钠溶液调节pH为3.3,最后加乙腈10 mL;流速为1.0 mL·min^(-1);柱后溶液为42 mL·L^(-1)的50%(v/v)氢氧化钠溶液;柱后流速为0.3 mL·min^(-1);柱温为35℃;检测器为脉冲安培电化学检测器,工作电极为金电极(直径3 mm),检测电位为糖四电位。结果:阿米卡星质量浓度在0.4985~9.9691μg·mL^(-1)范围内线性关系良好,阿米卡星检测限为2.0 ng;各杂质与阿米卡星峰均能完全分离。8批次硫酸阿米卡星原料总杂含量为1.2%~1.7%,77批次硫酸阿米卡星注射液总杂含量为1.1%~2.3%;10批次注射用硫酸阿米卡星总杂含量为1.2%~2.2%。结论:该方法准确、灵敏,可用于阿米阿星及其制剂的质量控制。

HPLC-PAD法测定硫酸依替米星氯化钠注射液中有关物质

目的：建立硫酸依替米星氯化钠注射液有关物质的反相高效液相色谱-脉冲安培电化学（HPLC-PAD）检测方法。方法：采用Welch Ultimate LP-C18（4.6 mm×300 mm，5 μm）色谱柱，柱温30 ℃，以0.2 mol·L-1三氟乙酸（用50%氢氧化钠溶液调pH至2.0）-乙腈（92：8）为流动相，流速1.0 mL·min-1，柱后碱溶液为0.5 mol·L-1氢氧化钠溶液，流速0.5 mL·min-1，检测器为脉冲安培电化学检测器，工作电极为金电极（3 mm直径）。结果：依替米星在0.3~30 μg·mL-1（r=0.9985）内线性关系良好；单个最大杂质的重复性试验的RSD（n=6）为0.8%，总杂质的重复性试验的RSD（n=6）为1.3%；方法的检测限（S/N=3）为2.5 ng，定量限（S/N=10）为7.5 ng；供试品溶液在12 h内稳定性良好。结论：该方法经方法学验证，可以用于硫酸依替米星氯化钠注射液有关物质的测定。