血根碱通过激活分泌型糖蛋白/β-链蛋白信号通路促进脊柱骨折大鼠骨折愈合的实验研究

目的:探讨血根碱(SAG)对脊柱骨折大鼠骨折愈合的影响及其作用机制。方法:选用SD大鼠72只,随机分为6组(12只/组):假手术组、模型组、血根碱低剂量组(10 mg/kg)、血根碱中剂量组(20 mg/kg)、血根碱高剂量组(40 mg/kg)、抑制剂组(Wnt/β-catenin通路抑制剂,Wnt-C59,30 mg/kg)。构建脊柱骨折大鼠模型,造模成功后,灌胃相应药物,1次/d,连续4周。BBB评分法进行神经功能评定;采用微计算机断层扫描技术(Micro CT)观察大鼠骨骼微结构;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠脊髓病理损伤;TUNEL染色观察大鼠骨髓神经细胞凋亡情况;酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清骨钙素(OC)和Ⅰ型胶原交联C-末端肽(CTX-Ⅰ)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)的含量变化;Western Blot法检测受损脊髓中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、碱性磷酸酶(ALP)及Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BBB评分,骨密度,BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Ct.Th、OC、BMP-2含量,ALP、Wnt-3a、β-catenin蛋白表达水平降低,脊髓病理损伤严重,神经细胞凋亡指数、CTX-Ⅰ含量、Bax、GSK-3β蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,血根碱低、中、高剂量组大鼠BBB评分,骨密度,BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Ct.Th、OC、BMP-2含量,ALP、Wnt-3a、β-catenin蛋白表达水平升高,脊髓病理损伤减轻,神经细胞凋亡指数,CTX-Ⅰ含量,Bax、GSK-3β蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与血根碱高剂量组比较,抑制剂组大鼠BBB评分,骨密度,BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Ct.Th、OC、BMP-2含量,ALP、Wnt-3a、β-catenin蛋白表达水平降低,脊髓病理损伤严重,神经细胞凋亡指数,CTX-Ⅰ含量,Bax、GSK-3β蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血根碱可促进成骨细胞的分化、抑制破骨细胞活性,起到促进脊柱骨折大鼠骨折愈合及改善神经损伤的作用,其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

脊柱骨折合并脊髓损伤患者血清转化生长因子-β1的变化及其临床意义

目的观察脊柱骨折合并脊髓损伤患者血清中转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的变化，探讨其表达水平变化的临床意义。 方法收集119例脊柱骨折患者的临床资料，其中58例患者存在椎管内压迫、脊髓损伤的表现，将此58例患者作为观察组，无脊髓损伤的61例患者作为对照组，并同期选择入院查体的67例健康查体者作为健康组，先后在观察组、对照组患者伤后第1、2、3、7、14、28、42、56天以及健康组查体者入院查体时分别抽取晨起空腹静脉5 ml，离心后采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定不同时间受试对象血清中TGF-β1的表达水平；通过搜集临床资料，对测定以及记录的数据进行组间数据对比。 结果两组患者在伤后第1天TGF-β1的表达水平接近（P＝0.221），均明显高于健康组。伤后第2、3、7天两组患者血清TGF-β1均呈进行性升高，其中观察患者第7天TGF-β1浓度为（64.5±12.8） μg/L，对照组患者为（43.7±13.1） μg/L，差异有统计学意义（P＝0.001）。观察组患者第14、28天TGF-β1血清浓度分别为（56.2±13.5）、（33.0±9.6） μg/L，均显著高于对照组（P＝0.002、0.014），第42、56天两组患者TGF-β1表达水平接近，与健康组差异均无统计学意义（P＝0.253）；观察组患者骨痂形成时间（8.9±1.5） d、骨折愈合时间（40.7±6.3） d，均明显短于对照组（P＝0.001、0.000）。 结论脊柱骨折患者血清TGF-β1表达水平明显升高，合并脊髓损伤者TGF-β1表达水平高于单纯骨折者，且能够长时间保持高表达水平，合并脊髓损伤者骨痂形成时间以及骨折愈合时间短于单纯骨折患者。脊髓损伤促进了TGF-β1的血清表达，TGF-β1在一定程度上促进了脊柱骨折的修复愈合。