电刺激促进大鼠正常和损伤脊髓内源性神经干细胞的增殖和分化

本文简要地回顾了半个世纪以来人们对于哺乳类动物中枢神经系统内源性神经干细胞（eNSCs）的认识。eNSCs和神经前体细胞的增殖与分化贯穿生命始终，而不是像传统学说所述的出生后神经细胞不再分裂。在脊髓，这些细胞将分化成熟的少突胶质及其它胶质细胞。作者基于近年来植入功能性电刺激器（FES）治疗脊髓损伤的研究工作，回顾了在正常或损伤的实验动物中，将FES植入大脑皮质或周围神经干可以增加脊髓内eNSCs的分化与增生，进而促进脊髓再髓鞘化及组织修复等研究进展。同时探讨了将eNSCs和FES的研究工作与针灸，尤其是电针治疗相结合的可能性。

跑台训练激活内源性神经干细胞促进小鼠脊髓损伤的修复

背景:跑台训练是促进脊髓损伤后运动功能恢复的有效方法之一,可以促进神经发生,但是不同强度跑台训练对脊髓内源性干细胞的激活作用尚不明确。目的:分析不同强度跑台训练对脊髓损伤后小鼠脊髓内源性神经干细胞的激活作用。方法:取雌性C57BL/6J小鼠50只,采用随机数字表法分为对照组、脊髓损伤组及低、中、高强度运动组,每组10只。脊髓损伤组及低、中、高强度运动组利用钳夹法构建T10节段脊髓损伤模型,脊髓损伤后第7天,低、中、高强度运动组分别进行对应强度的跑台训练,3次/d,10 min/次,每周训练6次,连续训练28 d。跑台训练后3,7,14,21,28 d,采用BMS评分评估小鼠后肢运动功能;跑台训练后28 d,获取损伤区域脊髓组织,检测细胞激活标志物表皮生长因子受体、静止细胞标志物胶质纤维酸性蛋白、增殖标志物5-乙炔基-2-脱氧尿苷(EdU)表达,苏木精-伊红染色观察脊髓组织形态。结果与结论:①脊髓损伤各组小鼠BMS评分始终低于对照组(P<0.05);随着跑台训练时间的延长,脊髓损伤小鼠BMS评分逐渐升高,中强度运动组小鼠跑台训练后14,21 d的BMS评分高于脊髓损伤组及低、高强度运动组(P<0.05),中、高强度运动组小鼠跑台训练后28 d的BMS评分高于脊髓损伤组、低强度运动组(P<0.05)。②与对照组比较,脊髓损伤组表皮生长因子受体与EdU阳性细胞比例升高(P<0.05);与脊髓损伤组比较,低、中、高强度运动组表皮生长因子受体与EdU阳性细胞比例均升高(P<0.05),并且中强度运动组最高。与对照组比较,脊髓损伤组胶质纤维酸性蛋白阳性细胞比例升高(P<0.05);与脊髓损伤组比较,低、中、高强度运动组胶质纤维酸性蛋白阳性细胞比例降低(P<0.05),并且中强度运动组最低。③苏木精-伊红染色显示脊髓损伤组小鼠损伤区域形成大片空洞,不同强度跑台训练后脊髓损伤小鼠损伤区域空洞减小,并且中强度运动组减小最明显。④结果表明,低、中、高强度的跑台训练可通过激活内源性神经干细胞促进脊髓损伤小鼠运动功能的恢复,其中中强度运动训练的效果最明显。

烙灸激活Wnt信号通路干预脊髓损伤大鼠血清促进内源性神经干细胞增殖分化研究

目的探究烙灸激活Wnt信号通路干预脊髓损伤大鼠血清中的内源性神经干细胞增殖分化。方法采用脊髓损伤大鼠Allen′s模型。分假手术组、模型组、Wnt抑制剂组、烙灸组、烙灸+Wnt抑制剂组,干预7 d后,取各组大鼠血清。取造模成功后3 d大鼠脊髓组织,分离培养内源性神经干细胞。各组血清干预细胞,在7 d后观察各组细胞增殖和分化状态。采用Westernt Blot、qRT-PCR检测各组分离血清干预后内源性神经干细胞增殖分化标记物蛋白表达及基因表达情况。结果免疫荧光染色显示烙灸组内源性神经干细胞增殖及向神经元分化最显著;模型组、Wnt抑制剂组增殖分化最少。Westernt Blot、qRT-PCR检测结果均显示烙灸组最显著,Wnt抑制剂组与模型组差异不显著。结论烙灸激活脊髓损伤大鼠Wnt信号通路,促进其内源性神经干细胞增殖分化为神经元细胞及少突胶质细胞,再抑制分化为星状胶质细胞,以实现神经细胞恢复新生的目的。

针刺联合神经干细胞修复脊髓损伤的科学依据

背景:脊髓损伤是由创伤性或非创伤性事件引起的一种神经系统疾病,常导致损伤节段以下严重功能障碍。近年来,神经干细胞移植被认为在调控脊髓损伤后的炎症反应、抑制胶质瘢痕的过度增生以及促进神经再生方面具有显著的治疗潜力。目的:综述并讨论针刺及神经干细胞移植疗法在抑制脊髓损伤诱导的继发性损伤中的潜在作用机制,深入探讨其治疗脊髓损伤的科学依据。方法:以“脊髓损伤,针刺,神经干细胞,SDF-1α/CXCR4轴”为中文检索词,以“Spinal cord injury,acupuncture,neural stem cells,SDF-1α/CXCR4 axis”为英文检索词,分别检索PubMed、Elsevier、万方及中国知网数据库,最终纳入96篇文献,汇总分析了针刺联合神经干细胞治疗脊髓损伤的相关研究成果,总结了这一联合疗法在治疗脊髓损伤后继发性损伤中的相关机制。结果与结论:①基质细胞衍生因子1α(stromal-derived factor 1α,SDF-1α)/CXC趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)轴在神经干细胞移植治疗脊髓损伤中扮演着至关重要的角色,该信号传导机制不仅影响神经干细胞的迁移、增殖和分化,更是决定干细胞归巢至损伤部位效率的关键因素。因此,针对该轴线的调控,对于提升脊髓损伤的治疗效果具有重要意义。②针刺作为一种传统中医疗法,在脊髓损伤的继发性损伤调控中展现出独特的优势,它能够通过调节炎症反应、抑制细胞凋亡、改善微循环、减少神经胶质瘢痕形成以及对抗氧化应激等多种途径,有效减轻脊髓损伤后的继发性损伤。③针刺还能够影响SDF-1α/CXCR4轴的表达与功能,从而增强神经干细胞的归巢和存活能力,促进神经再生和功能恢复。④结合针刺与干细胞移植的疗法,是一种创新且较好的脊髓损伤治疗策略,适用于修复神经环路,它结合了传统中医的智慧与现代生物技术的优势,为脊髓损伤患者提供了新的治疗选择。然而,目前这种联合疗法仍处于研究和探索阶段,其长期疗效和安全性尚需进一步验证。⑤综合而言,针刺及神经干细胞移植治疗脊髓损伤具有巨大的临床应用潜力,但仍需深入研究和优化治疗方案。未来,期待通过更多的临床试验和机制研究,进一步揭示这一疗法的疗效机制和最佳适应证,为脊髓损伤患者带来更好的康复希望和更高效的治疗效果。

小鼠胚胎脊髓神经干细胞提取与传代培养:3种常用消化酶优劣的比较与分析

背景:在神经干细胞的研究及应用过程中,细胞的培养与传代是关键环节,直接影响到细胞的质量和实验结果。寻找一种最适宜的消化酶类,对维持胚胎小鼠脊髓神经干细胞的生物学特性并增强其传代效率,具有重要意义。目的:探讨胚胎小鼠脊髓神经干细胞传代最适合的消化酶。方法:显微解剖分离提取孕14 d C57BL/6胎鼠脊髓组织,用含有表皮生长因子、碱性成纤维生长因子及B27的DMEM/F12无血清培养基培养,待成球后进行Nestin与Sox2免疫荧光鉴定。神经干细胞传代培养过程中分别采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶以及TrypLE^(TM)Express酶消化结合吹打法制成单细胞悬液,观察细胞分散效果及成球情况,取第3代细胞进行碘化丙啶染色观察细胞死亡情况,通过计数细胞总数观察细胞增殖情况,通过免疫荧光染色、Western blot和RT-PCR检测Olig2、Tuj1、GFAP、NeuN蛋白和mRNA表达鉴定细胞分化情况。结果与结论:脊髓组织细胞培养72 h后可形成悬浮生长的神经球,5-7 d后即可传代。与胰蛋白酶、木瓜蛋白酶相比,TrypLE^(TM)Express酶结合吹打法进行传代的细胞分散率高,活性较好,分化为NeuN与Tuj1的阳性神经元细胞较多。此研究优化了神经干细胞的培养和传代过程,为进一步开展脊髓疾病的干细胞移植治疗研究奠定了基础。

高压氧对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的诱导作用

目的探讨高压氧对脊髓损伤后内源性干细胞的诱导修复。方法脊髓半横断后高压氧治疗,进行行为学评分、电镜及免疫组化检查。结果内源性神经干细胞治疗后较对照组增多。结论高压氧使实验动物内源性神经干细胞增殖、分化加强,脊髓损伤后的功能得到改善。

姜黄素诱导内源性神经干细胞促进大鼠脊髓损伤后功能修复

目的 探讨姜黄素对脊髓损伤后内源性神经干细胞分化的影响及其对损伤后功能修复的作用。 方法 雄性SD大鼠72只按随机数字表法分为3组：假手术组（n=12）、单纯损伤组（n=30）、姜黄素处理组（n=30）。假手术组仅行椎板切除术，单纯损伤组、姜黄素处理组以70 g力的动脉瘤夹钳夹T9-T10节段脊髓1 min造模。姜黄素处理组于脊髓损伤后30 min按200 mg/kg给予腹腔注射姜黄素，单纯损伤组给予等量生理盐水。分别于损伤后1 d，1、2、4、8周行BBB运动功能评分及斜板实验评价大鼠后肢功能，后处死大鼠并取材，行免疫荧光染色分别观察Nestin、Tuj1、GFAP/CSPG的表达，Western blot检测Wnt3a蛋白及β-catenin表达情况。 结果 BBB运动功能评分及斜板实验结果显示损伤后自1周开始，各时间点姜黄素处理组大鼠后肢功能恢复情况均优于单纯损伤组（P〈0.05）。免疫荧光染色显示脊髓损伤后1周可见损伤区附近有Nestin阳性细胞，2周时达高峰，4周时明显减少，单纯损伤组、姜黄素处理组组间差异无统计学意义；姜黄素处理组Tuj1阳性神经元数量较单纯损伤组明显增多；4周时脊髓损伤中心囊腔周边形成胶质瘢痕，姜黄素处理组GFAP及CSPG表达明显弱于单纯损伤组。Western blot检测Wnt3a及β-catenin表达显示假手术组几乎无表达，姜黄素处理组表达量较单纯损伤组明显增强（P〈0.05）。 结论 姜黄素可通过激活Wnt/β-catenin信号通路诱导脊髓损伤后被激活的内源性神经干细胞更多地分化为神经元，减轻胶质瘢痕，从而改善大鼠后肢功能的恢复。

大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖过程中Wnt-1的表达

目的:探讨大鼠脊髓损伤后信号蛋白Wnt-1的表达及其与脊髓内源性神经干细胞(ENSCs)早期增殖的关系。方法:30只Wister成年大鼠,随机分为正常对照组(A组,n=5)和损伤组(B组,n=25)。A组不损伤脊髓,B组在大鼠T10采用经典Allen′s打击法(25g·cm)造成脊髓损伤,于造模后1d、3d、1周、2周、4周进行取材,对距离损伤中心5mm的脊髓行免疫组化染色,检测ENSCs的增殖及Wnt-1蛋白表达的动态变化,与A组比较,并统计分析二者之间的相关性。结果:30只大鼠均进入结果分析。A组脊髓在中央管周围、外周软膜可见极少数BrdU/Nestin阳性细胞,白质中几乎没有。B组中BrdU/Nestin阳性细胞于损伤后24h表达于室管膜以及软膜,灰质和白质亦有少量表达,3d时明显增多,1周达到高峰(P<0.05),2周开始逐渐下降,4周时仍可见少量BrdU/Nestin阳性细胞。B组各时间点与A组比较差异有显著性意义(P<0.05)。B组大鼠各时间点均有Wnt-1蛋白的表达,损伤后第1天开始表达,3d达到高峰,一直至脊髓损伤后2周Wnt-1都维持在较高的表达水平。Wnt-1蛋白的表达与Nestin的表达具有相关性(r=0.893,P<0.05)。结论:大鼠脊髓损伤后信号蛋白Wnt-1表达增加,其可能与大鼠ENSCs的早期增殖有关。

甲基强的松龙影响脊髓损伤后内源性神经干细胞的迁移

背景:脊髓损伤后,内源性神经干细胞发生增殖及迁移,修复受损伤组织。甲基强的松龙作为临床用药,其对于内源性神经干细胞的作用是未知的。目的:探讨甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖和迁移的影响。方法:75只SD大鼠采用Allen法建立T10平面完全性截瘫模型,随机均分成3组:甲基强的松龙组、生理盐水组和模型组。甲基强的松龙组将1 g/L甲基强的松龙溶液10 min内按30 mg/kg的剂量腹腔注射,随后23 h按5.4 mg/(kg·h)的剂量注射,生理盐水组以相同的剂量注射生理盐水,模型组不注射任何溶剂。脊髓损伤后7,14,21,28 d行体感诱发电位检测神经功能恢复情况,BBB运动等级评分测定下肢运动功能。取损伤节段脊髓,进行免疫组化Brd U及Nestin染色。结果与结论:(1)各组均有大量的Brd U和Nestin着色细胞,均在14 d达到高峰;(2)甲基强的松龙组能够抑制BrdU和Nestin单一着色及双着色细胞,抑制内源性神经干细胞的增殖和迁移;(3)BBB评分显示甲基强的松龙不能够显著改善四肢运动功能;(4)甲基强的松龙对于运动诱发电位潜伏期没有显著作用,但是可以促进损伤脊髓神经传导的恢复;(5)结果表明,甲基强的松龙能抑制脊髓损伤后内源性神经干细胞的增殖和迁移,对于脊髓损伤的修复具有一定阻碍作用。

电刺激联合神经营养素3可促进脊髓损伤大鼠内源性神经干细胞的增殖和分化

背景:由于外源性神经干细胞的获取有限,且容易产生免疫排斥以及伦理问题等严重制约其向临床转化,因此如何激活内源性神经干细胞并促进其生长增殖、分化,成为近期科研工作者究的热点。目的:探讨电刺激联合神经营养素3对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖及向神经元分化的作用。方法:将96只SD大鼠随机分为假手术组、脊髓损伤组、电刺激组、电刺激+神经营养素3组,每组24只。假手术组仅暴露脊髓,其他3组大鼠应用改良Allen法建立脊髓损伤模型,造模后给予相应措施进行干预。造模后7,14,21,28 d时,以BBB评分评价大鼠后肢运动功能,电生理学检查运动诱发电位潜伏期;造模后28 d取材,进行苏木精-伊红染色观察脊髓病理变化,免疫组化染色观察内源性神经干细胞的增殖和分化情况。实验方案经兰州大学第二医院医学伦理委员会批准。结果与结论:①与假手术组相比,脊髓损伤组大鼠的BBB评分明显降低(P<0.01),脊髓组织可见大量炎症细胞浸润,并存在多个空洞;与脊髓损伤组相比,电刺激组、电刺激+神经营养素3组大鼠后肢功能开始逐渐恢复,电刺激+神经营养素3组BBB评分明显高于电刺激组(P<0.05),上述病理损伤变化明显改善;②脊髓损伤组7,14d及电刺激组大鼠7 d时双后肢运动诱发电位潜伏期均未测出,电刺激组、电刺激+神经营养素3组21,28 d时运动诱发电位潜伏期较模型组缩短(P<0.05),电刺激+神经营养素3组潜伏期缩短更显著(P<0.05);③BrdU和Nestin阳性细胞数、微管相关蛋白2的表达:电刺激+神经营养素3组>电刺激组>脊髓损伤组;胶质纤维酸性蛋白的表达:脊髓损伤组>电刺激组>电刺激+神经营养素3组。结果表明脊髓损伤大鼠经电刺激及神经营养素3干预后,促进内源性神经干细胞增殖和向神经元分化,病理损伤明显减轻,后肢运动功能显著改善。

夹脊电针及预处理对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的影响

目的:观察夹脊电针疗法对脊髓损伤大鼠内源性神经干细胞(NSCs)增殖水平的影响,进一步探讨夹脊电针治疗脊髓损伤的作用机制。方法:96只Wistar成年雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、电针刺组和预针刺组。各组随机分成3 d、7 d、14 d共3个治疗时间点。假手术组仅暴露胸10节段脊髓,不予损伤和治疗,其余各组用改良Allen's重物坠落法制备脊髓损伤模型,于胸10节段打击致伤。模型组不予任何治疗,电针刺组在造模后给予夹脊电针治疗,至各时间点取材时止。于各时间点对脊髓组织行免疫组织化学染色和荧光实时定量PCR,检测Nestin、GFAP的表达。结果:在3 d、7 d、14 d时电针刺组和预针刺组的Nestin、GFAP阳性表达细胞数明显高于模型组,且有统计学意义(P<0.05),在3 d、7 d、14 d时预针刺组的Nestin、GFAP阳性表达细胞数高于电针刺组,且有统计学意义(P<0.05)。基因表达情况也表现出如上的结果。结论:夹脊电针疗法能够对内源性神经干细胞的增殖发挥促进作用。

针刺对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的影响

目的探讨针刺对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞(ENSCs)的诱导分化。方法 25只成年SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组和针刺治疗组。假手术组不损伤脊髓,模型组和针刺治疗组用改良Allen’s重物坠击法制备脊髓损伤模型。模型组不予任何处理;针刺治疗组予以针刺治疗,每日1次,7d为1疗程,共2个疗程。于2周后取材,对距离损伤中心5mm的脊髓行免疫组化染色,检测Nestin、Brdu、NSE、GFAP的表达。结果 Nestin和Brdu的表达针刺治疗组较模型组多,假手术组最少;NSE的表达针刺治疗组较模型组多,但少于假手术组;GFAP的表达模型组高于针刺治疗组,假手术组最低。结论针刺对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞有诱导分化作用。

大鼠脊髓损伤后bFGF、EGF海绵对内源性神经干细胞的诱导及修复作用

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)海绵植入损伤脊髓对脊髓损伤后内源性干细胞的诱导修复作用。方法采用脊髓半横断制作脊髓损伤模型,将46只大鼠分为对照组(n=6,不损伤脊髓)、模型组(n=20)和实验组(n=20,造模后应用bFGF、EGF海绵治疗),对3组动物进行行为学评分、电生理、电镜及免疫组化检测。结果实验组动物经bF-GF、EGF海绵治疗后,运动功能高于模型组,内源性神经干细胞数量多于模型组(P<0.05)。结论bFGF、EGF海绵干预可促进脊髓损伤动物内源性神经干细胞增殖、分化,改善受损的脊髓功能。

脊髓损伤大鼠内源性神经干细胞/前体细胞的增殖与分化

目的：目前认为大脑和脊髓中有内源性神经干细胞／前体细胞存在，但脑和脊髓损伤后这些内源性神经干细胞／前体细胞的活化、增殖、分化机制仍不清楚。应用5-溴2-脱氧尿嘧啶核苷（5-brom02-deoxyuridine，BrdU）体内标记的方法，观察了大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞／前体细胞的增殖、分化变化过程。方法：实验于2007—04／09在珠江医院中心实验室进行。①实验材料：36只同一窝别雌性SD大鼠由南方医科大学动物实验中心提供，体质量200～220g，按照随机数字表法将大鼠分为对照组、预标记组和损伤后标记组，实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法：采用Allen法建立脊髓损伤模型，损伤后连续10d腹腔注射Brdu来标记损伤后活化增殖的细胞：对照组采用Brdu连续10d腹腔注射，以标记脊髓内保持分化活力的细胞；预标记组在Brdu连续10d腹腔注射标记后，于第12天进行脊髓损伤。③实验评估：采用免疫组织化学法检测Brdu标记的内源性神经干细胞／前体细胞增殖情况。结果：①对照组可见整个脊髓切片均有大量的Brdu阳性细胞存在，这些细胞主要分布于脊髓外侧区域。②与对照组比较，预标记组Brdu阳性细胞在损伤后1d明显减少，7d后增多，21d后逐渐恢复并超过对照组水平。③损伤后标记组在损伤后1d即见大量Brdu阳性细胞增殖，阳性细胞数亦较预标后损伤1d时明显增多，损伤后7dBrdu阳性细胞数达到高峰，并超出对照组水平，这些细胞分布于损伤周围的灰质及室管膜区，但在损伤后21d，Brdu阳性细胞数未见继续增加。与对照组相比，损伤后标记组有较多的巢蛋白阳性细胞在室管膜区表达，1d即有增加，在7d达到高峰，21d减少。结论：脊髓损伤后出现明显的细胞增殖、分化反应，主要存在损伤后1周以内，1d即可见明显增生，尤以7d时明显，21d保持平稳，这些细胞主要分布在损伤脊髓中央管周围的室管膜区和损伤区域周围。

碱性成纤维细胞生长因子促进脊髓损伤小鼠内源性神经干细胞的增殖

背景:目前对于脊髓损伤的治疗主要以激素冲击及手术解除压迫为主,但是对已损伤的神经元无特效疗法。神经生长因子及内源性神经干细胞的应用,可以使神经元再生、轴突再髓鞘化,为脊髓损伤的治疗提供了新思路。目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子对脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖的影响及其与荧光金标记神经元数量增加的相关性。方法:昆明小鼠48只随机分为正常组、脊髓损伤组、治疗组、假手术组。脊髓损伤组、治疗组建立急性脊髓损伤模型,正常组仅实施手术而不损伤脊髓,在脊髓损伤后恢复意识2 h起开始,治疗组每日腹腔内注射溶有碱性成纤维细胞生长因子(25μg/kg)的含1%白蛋白的MTPBS。在第7天对前3组小鼠再次实施手术,于L1节段置入浸润荧光金的无菌明胶海绵,假手术组不进行处理。运用Rotarod和Platform Hang实验对小鼠的运动能力进行测试,使用荧光金对小鼠皮质脊髓束和红核脊髓束中的神经元进行标记计数,通过免疫组化检测nestin阳性内源性神经干细胞的数量,同时分析荧光金标记的神经元数量与内源性神经干细胞数量间的相关性。结果与结论:(1)碱性成纤维细胞生长因子可显著改善受伤小鼠的运动功能,经碱性成纤维细胞生长因子处理后内源性神经干细胞数量明显升高,且与荧光金标记的神经元数量的增加存在相关性;(2)结果表明,碱性成纤维细胞生长因子在脊髓损伤后内源性神经干细胞的增殖过程中起着重要作用,而内源性神经干细胞通过增加再生神经元的数量使运动功能得到恢复。

丙戊酸对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的影响

目的:探讨丙戊酸(valproicacid,VPA)对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞的影响。方法:45只Wister成年大鼠,随机分为正常对照组(A组,n=5)、单纯损伤组(B组,n=20)、损伤后VPA治疗组(C组,n=20)。B组和C组采用Allen′s打击模型(25gcm),在T10段造成急性脊髓损伤,C组损伤后半小时给予VPA治疗,每日300mg/kg,经腹腔分两次注射,直至取材;B组以相同方法给予等量生理盐水。于损伤后1d、3d、1周、4周、8周进行取材,对距离损伤中心5mm处脊髓进行巢蛋白Nestin免疫组化检测,应用图像分析软件进行Nestin阳性区域面积测算。结果:A组脊髓室管膜细胞中极少数细胞胞浆内有Nestin表达,白质中几乎无表达。B组损伤后24hNestin表达于室管膜以及软膜,1周达到高峰(P<0.05),并相向延伸至脊髓白质和灰质;损伤后4周Nestin表达明显下降,8周时很少或几乎无表达。C组Nestin表达在伤后24h与B组无显著性差异,1周时在中央管周围Nestin阳性细胞明显较B组多(P<0.05),持续至4周时仍高表达,8周时仍有表达。结论:VPA在大鼠脊髓损伤后能够激活内源性神经干细胞。

川芎嗪对大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖分化过程中GFAP表达的影响

目的:观察大鼠急性脊髓损伤后GFAP在受损脊髓的不同时间点的表达变化,分析GFAP在脊髓内源性神经干细胞的增殖和分化过程中的作用机制,明确川芎嗪治疗脊髓损伤的分子机制。方法:将SD大鼠随机分组后利用改良Allen's法建立大鼠急性脊髓损伤模型。于造模后第8h、1d、3d、7d、14d、28d每组分别处死6只大鼠取材,免疫组化检测Brdu+、Nestin+细胞的表达及GFAP表达变化情况,并对结果进行统计分析和相关性分析。结果:脊髓损伤后,Brdu+细胞被激活,在脊髓中的表达明显增多,在脊髓白质、灰质及中央管室管膜区均有表达。Brdu+、Nestin+、GFAP+细胞表达均在第7天达到峰值,随后逐渐减少,且在损伤后第7天、14天、28天,川芎嗪组与C组比较均有显著差异(P<0.01)。经对GFAP、Nestin+和Brdu+细胞在脊髓中的表达数进行相关性分析,GFAP表达与Nestin+细胞表达呈正相关趋势。结论:(1)川芎嗪能够促进脊髓损伤后GFAP的表达;(2)川芎嗪能够对脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖分化有促进作用;(3)脊髓损伤早期GFAP的表达与脊髓内源性干细胞的增殖分化呈正相关趋势。

内源性神经干细胞与脊髓损伤的研究进展

利用内源性神经干细胞治疗脊髓损伤是目前脊髓损伤研究的新热点。正常成年脊髓靠近中央管的室管膜与室管膜下区和白质实质存在内源性神经干细胞,脊髓损伤后内源性神经干细胞被活化并增殖和迁移到损伤区。大部分内源性神经干细胞分化成星型胶质细胞和有助于再髓鞘化的少突胶质细胞,而不是神经元。对内源性神经干细胞的定向分化调控是治疗脊髓损伤的关键问题也是目前尚未解决的难题。

内源性神经干细胞修复脊髓损伤的研究与进展

利用内源性神经干细胞治疗脊髓损伤是目前脊髓损伤治疗研究的新热点。利用各种外在刺激因素（包括外源性信号分子、针灸、中药、高压氧等）原位诱导内源性神经干细胞增殖分化和各种来源（包括中枢神经系统、骨髓、皮肤、脂肪等）的神经干细胞自体移植各有其优点和局限性。对内源性神经干细胞的定向分化调控是治疗的关键问题也是目前尚未解决的难题。利用内源性干细胞治疗脊髓损伤是一个新的思路和值得研究探讨的领域。

烙灸介导Wnt信号通路对脊髓损伤大鼠内源性神经干细胞增殖分化影响

目的:探究烙灸介导Wnt信号通路对脊髓损伤大鼠内源性神经干细胞增殖分化影响。方法:采用Allen s法制备脊髓损伤大鼠模型。分为假手术组、模型组、Wnt抑制剂组、烙灸组、烙灸联合Wnt抑制剂组,取损伤大鼠脊髓组织。采用运动神经功能评分(CBBB评分)、免疫组化、免疫荧光法检测脊髓组织内源性神经干细胞、神经元细胞及星形胶质细胞的标记物。结果:BBB评分、免疫组化、免疫荧光法检测结果均显示烙灸组最显著,Wnt抑制剂组与模型组差异无统计学意义。结论:烙灸激活脊髓损伤大鼠Wnt信号通路,促进其内源性神经干细胞增殖分化为神经元细胞,抑制分化为星形胶质细胞,使其神经细胞修复再生。