髓鞘相关抑制因子及其受体在脊髓损伤修复中的研究进展

脊髓损伤是一种严重的中枢神经系统创伤性疾病,常见于坠落伤、交通事故、重物砸伤等,可造成机体损伤平面以下的运动、感觉和自主神经功能障碍。髓鞘相关抑制因子(MAI)在损伤的脊髓微环境中具有促进生长锥塌陷、抑制轴突再生的作用,是造成脊髓损伤难以修复的主要原因。髓鞘相关抑制因子类蛋白,如神经轴突生长抑制因子(Nogo)、少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(OMgp)和髓鞘相关糖蛋白(MAG),及其受体蛋白如Nogo-A/Nogo-66受体1(NgR1)、配对免疫球蛋白样受体B(PirB)、鞘氨醇-1-磷酸受体(S1PR2),均是脊髓微环境中的重要调节因子,可通过影响神经元轴突生长的信号通路抑制脊髓损伤的修复过程。虽然目前脊髓损伤修复的机制还不清楚,但调节髓鞘相关抑制因子类蛋白及下游信号通路是脊髓损伤修复的重要治疗途径之一。我们通过本文对近年来MAI类蛋白及其受体在脊髓损伤修复中的作用进行综述,为脊髓损伤修复提供可探究的新靶点,并为脊髓损伤后的临床治疗提供更多思路。

转化生长因子-β1 siRNA神经干细胞后期移植对大鼠脊髓损伤修复的影响

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)siRNA鼠神经干细胞(NSCs)后期移植对大鼠脊髓损伤修复的影响。方法:TGF-β1 siRNA质粒病毒转染至NSCs,转染时分对照组、转染对照组、转染组共3组,Western blot检测NSCs被转染后TGF-β1蛋白的表达。选取成年雌性SD大鼠78只,建立大鼠急性脊髓损伤模型,随机分为对照组,NSCs移植组及TGF-β1-siRNA组。通过BBB评分、斜板试验、改良的Tarlov评分进行运动功能评定。造摸后1周通过RT-PCR、Western blot检测脊髓损伤区周围突触素及TGF-β1基因转录和蛋白的表达。造模后4周,HE染色及荧光显微镜观测CMDil标记的NSCs存活及分布情况,HRP逆行示踪评估神经纤维再生情况,透射电镜观察各组脊髓损伤区超微结构改变。结果:Western blot检测显示TGF-β1低表达可持续14 d。造模后1周起,大鼠下肢运动功能评价TGF-β1-siRNA组优于NSCs移植组,NSCs移植组优于对照组。HE染色NSCs移植组损伤区脊髓空洞较小,TGF-β1-siRNA组脊髓空洞几乎消失,对照组可见脊髓组织缺失及脊髓空洞形成。TGF-β1-siRNA组TGF-β1 mRNA表达为5.33±0.24,较对照组(10.47±0.54)和NSCs移植组(8.06±0.36)显著降低(P <0.05),突触素的表达为11.36±0.28,明显高于NSCs移植组(8.27±0.33)及对照组(5.04±0.30);移植后4周,对照组HRP阳性神经纤维数(48.66±8.94个/高倍视野)和CM-Dil阳性细胞(0±0.00个/高倍视野)最少,TGF-β1-siRNA组最多,分别为(162.46±16.65个/高倍视野)、(38.68±4.89个/高倍视野),NSCs移植组次之,分别为(85.86±11.24个/高倍视野)、(22.38±3.45个/高倍视野)。在透射电镜观察下,TGF-β1-siRNA组大鼠脊髓组织损伤区可见大量有髓神经纤维及无髓神经纤维,轴突数量较多,再生轴突髓鞘完整;NSCs移植组可见较多有髓神经纤维及无髓神经纤维;对照组损伤区可见胶质瘢痕和少量有髓神经纤维,坏死的有髓神经纤维。结论:TGF-β1siRNA神经干细胞能有效降低脊髓损伤区TGF-β1表达,促进突触素表达,可促进脊髓损伤大鼠神经突触的再生,改善大鼠肢体运动功能。

组织工程技术在脊髓损伤修复研究中的应用进展

脊髓损伤（SCI）后的再生修复一直是当前医学的难题。近年来随着基础研究的发展，许多新方法、新策略已经开始用于脊髓损伤修复，其中组织工程学的发展开辟了一条新的途径．利用组织工程学的方法治疗脊髓损伤已逐渐成为当前新的研究热点。组织工程技术的核心是支架材料和种子细胞，其基本策略是体外预先构建一个有生物活性的种植体植入体内，替代、修复损伤脊髓部分或全部功能。笔者就组织工程技术在脊髓损伤修复研究中的应用进展综述如下。

诱导多能干细胞移植在脊髓损伤修复中的应用及研究进展

脊髓损伤（spinalcordinjury，SCI）至今仍是再生医学急需攻克的难题。尽管各种治疗手段较之前取得了一定进展，但疗效仍不能令人满意，最终导致不同程度的神经功能丧失。近几十年来，随着再生医学的发展．尤其是干细胞技术的发展，为SCI的治疗提出了新的方向。

脊髓损伤修复研究的现状与展望

2006年统计数据显示，全世界脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）的患病率为（233～755）／百万，年发病率为（10．4～83）／百万。各国学者多年来尝试多种方法试图攻克这一难题．尽管许多研究在相关基础领域取得了一定的进展，但这些进展并没有获得显著的功能恢复。SCI的治疗仍然是世界性医学难题。这主要是由于脊髓损伤的修复不同于其他组织的修复．不仅要求对神经组织位置和形态上的修复，而且要求功能上的替代和修复。同时因为对神经元发育过程了解有限，导致目前很多研究结果同预期大相径庭，甚至是南辕北辙。因此，有学者提出应该调整脊髓损伤修复研究的思路，也提出了一些新的对策。笔者对此作一综述．

脊髓损伤修复研究的进展

脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）是现代社会生活中的常见创伤。随着工农业、建筑业及交通运输的发展．脊髓损伤的发病率有逐渐升高的趋势。据2006年统计数据显示，全世界SCI的患病率为233—755/百万．年发病率为10．4—83／百万口。脊髓损伤后，除创伤造成的直接损伤外，脊髓局部还将发生一系列继发性病理变化．如神经细胞坏死、凋亡、缺血再灌注等，而且造成的损伤超过原发性损伤，最终会导致脊髓的继发性损伤。

脊髓损伤修复与直接转分化的研究进展

由各种原因（如外伤、缺血及医源性损伤等）所致的脊髓损伤（spinalcordinjury，SCI）在临床上较为多见，常造成损伤平面以下感觉、运动及大小便功能障碍。现行的修复方法及药物治疗效果不佳，进展缓慢，常遗留不同程度的神经功能永久性缺失，致残率高，给个人、家庭和社会造成沉重的负担。

关于脊髓损伤修复研究策略

我在2003年两次讨论了脊髓损伤的修复，修复的目标不是损伤节段的神经细胞，而是传导中断的长束及其远端瘫痪肢体的功能有所恢复。至今5年过去了，在脊髓损伤修复研究方面发表了大量文献，特别是有关嗅鞘细胞移植和干细胞移植方面，积累了不少经验，对脊髓损伤修复的认识亦有提高，但从实验结果看，修复损伤脊髓取得运动功能恢复的进展并不大。从20世纪后50年至21世纪修复损伤脊髓的实验研究及临床观察看，修复损伤脊髓的关键是提供轴突生长的通道，

星形胶质细胞在脊髓损伤修复中的作用

脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）的发病率为（233．755）／百万，年发病率为（10．4—83）／百万,而我国也是SCI高发国家，SCI患者给家庭和社会带来了沉重的负担。SCI后的病理生理机制复杂．星形胶质细胞活化和分泌的神经抑制因子以及胶质瘢痕的形成均阻碍了脊髓神经功能的修复与重建。笔者就SCI后星形胶质细胞在胶质瘢痕形成及脊髓神经功能修复中的作用进行综述。

基于Rho促进脊髓损伤修复的基础与临床研究

脊髓损伤（SCI）后轴突再生困难的主要原因之一是由于髓磷脂抑制分子的存在。尽管不同抑制分子上游信号通路不尽相同，但最终均通过共同的信号分子Rho小GTP酶介导轴突再生的抑制作用。因此Rho的活化是不同抑制分子阻碍轴突再生的共同信号通路。目前动物实验中相关脊髓损伤修复的一些有效治疗方案已取得一定进展并开始向临床试验转换。本文将进一步探讨以Rho为靶点治疗SCI的策略及其在基础与临床研究中的应用。

斑马鱼作为模式生物在脊髓损伤修复研究中的应用

脊髓损伤常常导致严重的和永久性残疾,不仅降低患者的生活质量,还给社会和家庭带来沉重的负担。脊髓损伤的修复和治疗一直是世界研究的热点和难点,如何有效地促进脊髓的修复一直是神经科学领域研究的难题。不同的物种之间再生能力差异很大。近年来,斑马鱼作为一种新兴模式生物,显示出了很大的优越性。与人和高等脊椎动物相比,斑马鱼具有非凡的组织再生能力,脊髓损伤后显示出了强大的神经修复能力,是研究脊髓损伤的理想动物模型。

脊髓损伤修复相关10号基因编码蛋白与促甲状腺激素释放激素受体2的相互作用

背景:前期研究中,通过酵母双杂交系统筛选出可能与脊髓损伤修复相关10号基因(No10,SCIRR10)编码蛋白相互作用的蛋白质,其中含有促甲状腺激素释放激素受体2(thyrotropin releasing hormone receptor2,TRH R2),而SCIRR10与TRH R2是否存在相互作用尚未阐明。目的:验证SCIRR10蛋白是否作用TRH R2受体,进一步确认TRH R2为SCIRR10蛋白受体,为下一步研究提供可靠实验证据。方法:应用RT-PCR方法扩增SCIRR10和TRH R2基因,构建带有绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白标签的真核重组表达质粒GFP-SCIRR10和RFP-TRH R2,分别转染真核细胞COS7,培养16h后,将表达SCIRR10-GFP的细胞培养液加入到表达受体TRH R2-RFP细胞中继续培养。4h后,用40g/L多聚甲醛固定细胞,于激光共聚焦显微镜下观察蛋白GFP-SCIRR10和蛋白RFP-TRH R2两者相互结合情况。结果与结论:在荧光条件下仅能观察到SCIRR10-GFP与TRH R2-RFP相互结合,而其他对照没有观察到类似现象。通过实验以及前期研究结果证实TRHR R2就是SCIRR10作用受体。

Nogo蛋白及其抗体在脊髓损伤修复中作用的研究进展

脊髓损伤（spinal cord injury，sci）多指由于外界直接或间接机械创伤因素导致的脊髓损伤，脊髓损伤包括创伤引起的原发性损伤，以及继发性缺血、炎症及神经退变等继发性损伤，脊髓损伤会导致损伤平面以下感觉、运动功能减退或丧失．给患者、家庭和社会带来沉重的负担。

骨髓基质细胞移植兼用脑源性神经营养因子促进大鼠脊髓损伤修复的实验探究

目的：探讨骨髓基质细胞移植兼用脑源性神经营养因子促进大鼠脊髓损伤修复效果。方法：选取30只Wistar大鼠，按照移植方法分为研究组与对照组，研究组移植采取骨髓基质细胞移植兼用脑源性神经营养因子（BDNF），对照组单纯移植的骨髓间充质肝细胞（BMSCs）悬液，分析比较两组效果。结果：术后2～8周，两组神经功能评分有统计学差异（P＜0.05）。结论：BMSCs移植能够提高大鼠半横断脊髓结构及功能水平恢复BMSCs与BDNF，联合应用对脊髓损伤修复具有明显协同效果。

PTEN参与神经干细胞调控及脊髓损伤修复的研究进展

1997年,第10号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物基因（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN）由国外3个独立的研究小组先后克隆命名,这是目前发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因,其编码的蛋白在细胞内具有脂质磷酸酶和蛋白磷酸酶的双重活性。PTEN具有广泛的生物学功能,通过细胞内多个信号通路来调控细胞的生长、分化、迁移、凋亡等过程。

3D打印仿生支架在脊髓损伤修复中的研究进展

利用3D打印技术制造的新型仿生脊髓支架具有良好的生物相容性和力学性能,可以有效改善脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后产生的微环境紊乱和胶质瘢痕问题,通过联合特定的神经细胞还可以使SCI的修复更加具有针对性和特异性。近年来,许多新型脊髓支架及其相应的治疗方法被研发出来,包括以胶原蛋白为基础混合其他材料进行改良的新型支架、新型化合材料脊髓支架和支架载特定因子修饰的神经细胞的新型治疗思路等,通过动物实验验证了治疗方法的可行性,为临床SCI的修复治疗提供了新的方向。本文就3D打印仿生支架在脊髓损伤修复中的实验研究进展进行综述。

细胞外基质应用于脊髓损伤修复的研究进展

哺乳动物中枢神经系统再生能力极为有限,脊髓损伤后往往导致感觉及运动功能的永久缺失。受损脊髓的修复与再生仍是当今医学界的难题,而组织工程技术的发展为其提供了新的解决方案。再生医学研究策略中,以生物支架为中心,辅以细胞及生物活性分子来替代修复结构功能受损组织的方法尤受关注。生物支架不仅能简单地桥接脊髓损伤处两侧残端,

脊髓损伤修复相关10号蛋白在COS7细胞中的表达、纯化与鉴定

目的:在COS7细胞中表达脊髓损伤修复相关10号蛋白(SCIRR10),并对表达产物进行纯化和鉴定。方法:在实验室前期研究基础上,用PCR方法扩增SCIRR10基因,将其克隆入pcDNA3.1/myc-HisA穿梭质粒中,转染COS7细胞进行表达;对表达产物用金属螯合层析方法纯化,并进行SDS-PAGE和Western印迹检测。结果及结论:构建了含有SCIRR10基因的穿梭质粒pcDNA3.1/myc-His-SCIRR10,并使其在COS7细胞中得到表达,纯化后的重组蛋白SCIRR10-His-myc的纯度在80%以上,可用于下一步的实验研究。