艾灸对脊髓横断术后大鼠胃黏膜组织相关因子及热休克蛋白70表达的影响

目的观察艾灸对大鼠胃黏膜组织白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、表皮生长因子(EGF)及热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,探讨艾灸对胃黏膜的保护效应与脊髓的关系。方法实验大鼠采用无水乙醇+阿司匹林灌胃制作胃黏膜损伤模型。将48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸模型组和艾灸+脊髓横断组,每组12只。艾灸+脊髓横断组大鼠行脊髓横断手术,并予以艾灸干预。GUTH法计算胃黏膜组织损伤指数(UI),ELISA检测血清IL-1β、TNF-α和EGF含量;Western blot检测胃黏膜组织HSP70蛋白表达。结果与模型组比较,艾灸模型组大鼠胃黏膜组织UI下降、EGF含量升高,血清IL-1β、TNF-α含量降低(P<0.05,P<0.01);与艾灸模型组比较,艾灸+脊髓横断组大鼠胃黏膜组织UI升高、EGF含量降低,血清IL-1β、TNF-α含量升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,艾灸模型组和艾灸+脊髓横断组大鼠胃黏膜组织HSP70蛋白表达均明显增加(P<0.01)。结论脊髓是艾灸对胃黏膜损伤修复与保护因子表达的重要调节途径。

促神经再生因子复合剂N6对大鼠脊髓横断损伤保护作用的量效关系

目的:观察促神经再生因子复合剂N6对大鼠脊髓横断损伤后丙二醛(MDA)及caspase-3表达的影响,探讨其减轻继发性损伤及凋亡,保护受损脊髓作用的量效关系。方法:Wistar大鼠84只,随机分为4组。横断脊髓T10段15min后,对照组在脊髓缺损处给予生理盐水83μl/kg、实验组分别给予N6复合剂41.5,83,166μl/kg。损伤后1,4,24h各取材6只,采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定脊髓断端及血清中脂质过氧化(LPO)产物丙二醛(MDA)的含量。损伤后72h每组3只灌注取材,行免疫组化观察断端caspase-3的表达情况,HE染色观察断端病理学改变。结果:各实验组伤后1,4,24h脊髓断端及血清MDA含量明显低于对照组(P<0.01),伤后72h脊髓灰质前角caspase-3阳性细胞数与对照组比较明显减少(P<0.05),且N6复合剂能减轻脊髓损伤后炎性细胞浸润及组织水肿的程度,其疗效随剂量增加而增加。结论:N6复合剂可以减轻脊髓全横断损伤后脂质过氧化反应所造成的损伤,减少凋亡发生,从而减轻继发性损伤保护受损脊髓,且疗效随剂量增加而增加。

大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后GAP-43 mRNA的表达

目的探讨完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将大鼠分为正常对照组,手术组A组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植);B组(完全脊髓横断+完整胚胎脊髓移植+BDNF)。手术显微镜直视下切除大鼠脊髓3～4mm,镜下观察确保完全离断,取同种孕13～14dwistar大鼠完整胚胎脊髓同时移植。B组通过微型泵定时定量泵入BDNF溶液(2mg/ml)。应用原位杂交方法于术后1～6w计数各组脊髓损伤区神经生长相关蛋白(GAP-43)mRNA神经元阳性细胞数。结果术后3w手术组开始恢复后肢运动功能,术后6w出现协调踏步动作。B组3、4、5w时阳性细胞数明显高于A组(P<0.01)。结论多个完整胚胎脊髓组织移植解决了脊髓完全离断情况下所需移植物总量较大的问题,联合应用BDNF,对脊髓损伤修复效果更为理想。

肌基膜管移植及神经生长因子对脊髓横断性损伤的修复作用

目的 :对神经生长因子 (NGF)及其结合肌基膜管 (MBL)修复脊髓横断性损伤进行组织学评价。方法 :以雌性家犬为实验对象 ,手术将其脊髓横断 ,随机分为 3组 :( 1) 7只行MBL移植结合注射NGF(A组 ) ;( 2 ) 6只单纯注射NGF组 (B组 ) ;( 3) 4只为对照组。 6个月后用免疫组化对神经轴突和胶质细胞网格框架结构进行特异染色 ,并用图像分析方法对脊髓横断处的远、近端横截面神经纤维进行定量研究。结果 :各组间远端神经纤维数量均有显著性差异 ;MBL移植物中有神经纤维通过 ,对照组断端为坏死空腔。电镜证实横断远端存在新生神经纤维。结论 :MBL移植结合NGF修复脊髓横断性损伤 ,神经轴突能越过移植区到达远端 ;

大鼠脊髓横断早期比目鱼肌重量与肌球蛋白重链亚型mRNA表达的变化

目的观察大鼠脊髓横断后早期比目鱼肌重量及肌球蛋白重链（MHC）各亚型mRNA表达的变化规律.方法 40只雌性Wistar大鼠随机分为对照组（10只）与脊髓横断7 d组（ST7）、15 d组（ST15）、30 d组（ST30）,各10只,脊髓横断水平T8～T10.分别于横断后7、15、30 d取后肢比目鱼肌称重,采用半定量RT-PCR方法观察MHC各亚型mRNA表达的变化.结果脊髓横断各组比目鱼肌重量均较对照组下降（P＜0.05）.ST15、ST30组比目鱼肌绝对与相对重量均较ST7组下降（P＜0.05）.对照组比目鱼肌只表达MHC-Ⅰ与MHC-Ⅱa,脊髓横断各组在横断7 d后出现MHC-Ⅱx与MHC-Ⅱb的表达,横断后各时间点MHC-ⅠmRNA的表达持续下调;MHC-Ⅱa与MHC-Ⅱx mRNA的表达持续上调;MHC-Ⅱb mRNA的表达维持在低水平.结论脊髓横断主要在早期影响肌肉的重量;脊髓横断后MHC的表达发生由慢型向快型的转化,MHC随神经肌肉活动的减少表现出可塑性.

人发角蛋白修复大鼠脊髓横断损伤的实验研究(英文)

目的:研究人发角蛋白(HHK)在大鼠脊髓横断损伤(SCCI)修复中的作用。方法:选用18只SD大鼠,建立正常对照组、SCCI组,SCCI后植入HHK组。于术后1W,3W,6W对大鼠的运动,感觉进行评估;并在横断部位及近,远断3个断面分别取材,用HE,铀铅双染,在光镜及电子显微镜下观察其组织学结构。结果:大鼠脊髓横断损伤后植入HHK,运动,感觉逐渐好转,术后6W基本恢复正常;而未植入HHK大鼠无明显变化。光镜观察:植入HHK组白质有明显的神经纤维沿着HHK再生,部分区域有坏死,无明显的空洞形成;灰质有部分异常神经元,大部分形态正常。未植入HHK组断面有神经呈编织状再生,未见纤维超过离断面,有大面积坏死和空洞形成;灰质神经元大量坏死,形态异常。结论:HHK对横断脊髓的功能及形态恢复有促进作用,本实验为HHK应用于临床奠定基础。

咯利普兰对大鼠脊髓横断损伤后神经元凋亡的影响

目的探索咯利普兰对大鼠脊髓横断损伤后神经元凋亡的影响。方法取成年SD大鼠60只分为假手术组(Sham组)、损伤组(SCI组)及咯利普兰治疗组(R组)各20只。在R组及SCI组建立大鼠脊髓横断损伤模型,Sham组大鼠仅打开椎板;R组术后立刻皮下注射咯利普兰,SCI组及Sham组皮下注射等体积二甲基亚砜。于术后6 h、12 h、24 h、72 h检测各组脊髓半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)及B淋巴细胞瘤蛋白2(Bcl-2)的表达水平,并计算各组脊髓的脱氧核苷酸末端转移酶介导的d UTP缺口末端标记(TUNEL)染色阳性细胞数量。结果术后各时间点,R组的Bcl-2表达水平高于SCI组及Sham组(P<0.05),R组的caspase-3表达水平低于SCI组(P<0.05);术后12 h、24 h、72 h,R组TUNEL阳性细胞数量少于SCI组(P<0.05)。结论咯利普兰可明显减少大鼠脊髓横断损伤后神经元的凋亡。

脊髓横断面积与脊髓型颈椎病预后的关系

目的 :总结前路手术治疗脊髓型颈椎病中脊髓横断面与预后的关系。方法 :采用颈椎前路减压自体髂骨植骨融合 ,加用前路带锁钢板固定治疗脊髓型颈椎病 5 1例 ,分为术后JOA改善率优良组 (≥ 5 0 % )与非优良组( <5 0 % ) ,比较其术前脊髓最大压迫处横截面积、脊髓直径、术前JOA评分 ,分析与预后的相关性。结果 :改善率优良组的术前脊髓最大压迫处横截面积与改善率非优良组术前脊髓最大压迫处横截面积相比较差异有统计学意义(P <0 0 5 )。结论

脊髓横断后艾灸足三里对胃黏膜损伤大鼠Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的:观察艾灸足三里通过调节Nrf2/HO-1信号通路对应激性胃黏膜损伤大鼠的治疗作用,并探讨其胃黏膜保护作用与脊髓的关系。方法:SPF级SD大鼠50只,按体质量随机分为5组:空白组、模型组、药物组、艾灸组及手术+艾灸组。采用无水乙醇结合阿司匹林混悬液灌胃建立大鼠胃黏膜损伤模型,艾灸组艾灸大鼠双侧“足三里”穴;药物组给予奥美拉唑肠溶片溶液(0.2 mg/kg)灌胃,连续治疗8 d;手术+艾灸组予以脊髓横断手术,术后进行胃黏膜损伤造模及艾灸治疗。治疗结束后,应用Guth法计算大鼠胃黏膜损伤指数(UI),HE染色观察大鼠胃黏膜形态学变化,ELISA实验检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的变化。Western-blot和RT-PCR检测胃黏膜组织中一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)、核转录因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)的蛋白及mRNA表达。结果:与模型组相比,艾灸组大鼠UI值显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01);胃黏膜组织损伤明显改善,明显降低了血清中MDA、NO水平,升高了SOD、GSH-Px水平,差异具有统计学意义(P<0.01);显著下调了胃黏膜组织中iNOS和COX-2的蛋白及mRNA表达水平,上调了Nrf2和HO-1的表达水平,差异具有统计学意义(P<0.01)。手术+艾灸组大鼠UI值、血清中MDA、NO水平及胃黏膜组织中iNOS和COX-2的表达较艾灸组升高,血清SOD、GSH-Px的水平及黏膜组织Nrf2和HO-1的表达水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:艾灸足三里可通过Nrf2/HO-1信号通路有效改善大鼠应激性胃黏膜损伤,脊髓参与了其修复作用及信号传导的过程。

大鼠脊髓横断伤后大脑运动皮质的再生反应的实验研究

目的研究成年SD大鼠大脑运动皮质在脊髓横断伤后的再生反应。方法在胸9水平完全横断脊髓,术后1、3、5、7和14 d,取大鼠大脑运动皮质和脊髓分别进行GAP-43mRNA组织原位杂交和NF200免疫组化。结果大鼠在脊髓横断伤后出现大脑运动皮质GAP-43mRNA表达,主要分布在大脑运动皮质的Ⅴ、Ⅵ层;脊髓横断伤组在术后14 d内,脊髓断端白质内NF200的表达逐渐由稀疏至消失。结论实验揭示了大鼠脊髓横断后,皮质脊髓束神经元在两周内不会出现数量减少;并发现大脑运动皮质在皮质脊髓束横断后能出现短时间的再生反应。

夹脊电针疗法对脊髓横断损伤大鼠电生理的影响

1实验材料与方法 1.1动物及分组96只Wistar成年雌性大鼠（黑龙江中医药大学动物实验中心提供）,体重200～220g,11～12周龄,随机分为假手术组、模型组、电针刺组和预针刺组,每组24只,各组按取材时间不同分为3、7、14天3个时间点,

丙泊酚对脊髓横断大鼠镇静作用的影响

目的观察丙泊酚对脊髓横断大鼠镇静作用的影响,并探讨其可能的机制。方法30只雌性SD大鼠,随机分为三组:脊髓横断组(n=10)、假手术组(n=10)和正常对照组(n=10)。静脉泵注丙泊酚,比较三组之间大鼠眼睑反射消失时丙泊酚的用量及所需的时间。结果脊髓横断组大鼠眼睑反射消失的丙泊酚用量(6.34±0.85)mg/kg明显少于假手术组(11.24±1.09)mg/kg和正常对照组(10.76±1.14)mg/kg(P<0.0001);脊髓横断组大鼠眼睑反射消失所需时间(200±41)s也明显少于假手术组(494±46)s和正常对照组(465±51)s(P<0.01)。结论脊髓横断可显著降低大鼠丙泊酚的镇静用量,可明显缩短大鼠眼睑反射消失时间,脊髓横断的镇静作用其可能的机制是去传入理论。

大鼠完全脊髓横断动物模型的建立及完整胚胎脊髓移植后功能恢复的研究

目的建立有效、可靠的完全脊髓横断动物模型,探讨多个完整胚胎脊髓移植联合脑源性神经营养因子(BDNF)对脊髓完全横断损伤的修复作用。方法将Wistar雌性大鼠分为正常对照组,手术组A组(单纯横断)、B组(横断+BDMF)、C组(横断+移植)、D组(横断+移植+BDNF)。手术显微镜直视下切除大鼠脊髓3-4 mm,镜下观察确保完全离断,取3-4个完整胚胎脊髓同时移植。B组及D组应用微型泵定时定量泵入BDNF溶液(2 mg/ml)。术后1-6周进行功能锻炼及行为学分析。结果术后A组、B组后肢运动功能未恢复;术后3 W,C组及D组开始恢复后肢运动功能,术后6 W出现协调踏步动作。术后1,2 W,C组与D组CBS行为学评分无显著性差异(P>0.05),术后3W、4W,CBS评分差异有显著性(P<0.01)。结论本实验成功的建立了大鼠完全脊髓横断模型。多个完整胚胎脊髓组织移植解决了脊髓完全离断情况下所需移植物总量较大的问题,联合应用BDNF,对脊髓损伤修复效果更为理想。

三七总皂甙对大鼠脊髓横断损伤后NGF和BDNF表达的影响

目的探讨三七总皂甙对大鼠脊髓全横断后NGF和BDNF表达的影响,阐明PNS治疗SCI的分子机制。方法40只成年健康SD大鼠,随机均分为假手术对照组(SO组),单纯脊髓横断组(tSCI组),生理盐水组(NS组),三七总皂甙组(PNS组)。每组于术后1天、7天各处死5只取材,观测形态结构和神经元数量,并采用免疫组织化学ABC法检测各组神经元细胞神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果在假手术组NGF和BDNF的表达较少,脊髓腹角神经元数量、NGF和BDNF的表达无时间变化趋势;tSCI后,脊髓腹角神经元数量明显减少,NGF和BDNF表达增加,损伤后时间越长,神经元数量减少越明显,NGF和BDNF阳性的细胞数增加越多;PNS组脊髓腹角神经元数量较tSCI组、NS组多(P<0.05),但较SO组少(P<0.05),NGF和BDNF的表达较SO组t、SCI组和NS组增强(P<0.05)。结论PNS可使tSCI后神经元数量增加,NGF、BDNF表达增加,表达时间提前,PNS对SCI有保护和治疗作用,其作用机制可能NGF、BDNF表达增强有关。

胸椎钢筋穿通伤致脊髓横断性损伤1例报告

患者男性，35岁，建筑工人，因高空坠落的钢筋插入胸背部致双下肢麻木、无力半小时入院。查体：胸背部见钢筋斜向前下穿入体内，外露长度约1米．钢筋直径1．5cm。钢筋人口处局部皮肤红肿、压痛，有血液渗出。右侧腹壁隆起，可扪及钢筋头端，腹肌明显紧张。双侧上肢肌力、感觉正常；腹股沟平面以下深、浅感觉消失．双下肢肌力0级，腱反射消失，病理反射未引出。脊柱侧位X线检查显示：钢筋从后背部T12水平斜向前下穿入体内（图1）。患者入院后先剪断外露钢筋，急诊剖腹探查，见钢筋经T12椎体前方穿出而直达胰十二指肠，直视下取出钢筋，行胰十二指肠、下腔静脉修补术．彻底清除腹腔内异物，大量生理盐水冲洗伤口。

地塞米松局部应用对犬完全性脊髓横断伤再生的影响

目的 观察地塞米松局部应用对犬完全性脊髓横断伤再生的影响。方法 将 9条杂种犬分为两组 ,胸10平面造成 4～ 5mm的脊髓缺损 ,实验组 6条犬 ,将饱和状态下地塞米松组织液凝块植入脊髓缺损处。对照组 3条犬 ,仅植入组织液凝块。术后对两组犬的行为学进行评分 ,并用摄像机记录。术后 5个月心脏灌流固定 ,石腊包埋 ,切片。选用神经中丝抗体 (anti-neurofiblament ,NF)对桥接区组织内神经轴突进行标记 ,计算两组NF的阳性表达率。 6号犬和 9号犬桥接区组织同时行电镜观察。结果 实验组行为学评分明显高于对照组 ,有显著性差异 ( 0 .0 1<P <0 .0 5 )。实验组桥接区NF阳性表达率 1%～ 5 % (平均 2 .86% ) ,对照组桥接区NF的阳性表达为 0 %。

骨髓单核细胞移植对脊髓横断大鼠神经营养因子-3和突触素表达的影响

目的:探讨骨髓单核细胞(BMMNCs)移植对脊髓横断(SCT)大鼠脊髓组织中神经营养因子-3(NT-3)和突触素(SYN)表达的影响。方法:146只Winstar大鼠(SPF级,雌雄不限)随机分为3组:SCT组49只,建立SCT模型;实验组49只,建立SCT模型,给予BMMNCs移植治疗;假手术组48只,切除对应的椎板不损伤脊髓;各组大鼠分别于术后5、7、14和21d行后肢功能BBB评分,RT-PCR和免疫组织化学技术检测受损脊髓组织中NT-3和SYN的表达。结果:术后5、7、14和21d各时间点各组大鼠后肢BBB评分比较,SCT组和实验组均低于假手术组(P<0.05),且SCT组更低于实验组(P<0.05)。术后5、7、14和21d各时间点NT-3阳性细胞数及NT-3mRNA比较,SCT组和实验组均高于假手术组(P<0.05),且SCT组更低于实验组(P<0.05)。SYN阳性颗粒数及SYN mRNA比较,SCT组和实验组均低于假手术组(P<0.05),且SCT组更低于实验组(P<0.05)。结论:BMMNCs能够上调局部损伤脊髓NT-3和SYN的表达。

家兔脊髓横断自体免疫变化的实验研究

目的 探讨脊髓横断 (SCT)后自体免疫反应的变化及其意义。方法 采用生物素 亲和素 (ABC)染色法、间接酶联免疫吸附法 (ELISA)及微量血清 (CH5O)溶血法分别检测脊髓下胸段 (T10～ 12 )完全横断后血清中抗脊髓抗体、损伤局部免疫复合物、血清中髓鞘碱性蛋白抗体及总补体活性。结果 SCT后第 5天 ,血清中出现抗脊髓抗体 ,第 7天横断局部出现免疫复合物 ,此时血清及脑脊液中开始产生髓鞘碱性蛋白抗体 (MBPAb) ,其Dλ 值伤后明显升高 (P <0 .0 1 )。上述变化持续至伤后 2 0d。血清补体于伤后第 3天开始升高 ,7d达高峰 ,9～ 1 4d显著下降。病理检查发现伤后 3d开始有白细胞及淋巴细胞浸润。结论 SCT后动物运动功能毫无恢复 ,而其自体免疫发生了明显改变 ,这可能是影响中枢神经系统损伤 (CNS)后神经再生和功能恢复的因素之一。

大鼠T_9脊髓横断对后肢肌纤维SDH活性的影响

目的：为截瘫病人受累肌功能恢复提供实验依据。方法：用３０只Ｗｉｓｔａｒ雌性大鼠行Ｔ９节段脊髓横断，于术后３、７、２０、４０和９０天取比目鱼肌（ＳＯＬ）、趾长伸肌（ＥＤＬ）和跖肌（ＰＬ），进行冰冻切片，琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）染色。结果：实验组与对照组比较ＳＯＬ、ＥＤＬ和ＰＬ的各型肌纤维ＳＤＨ含量降低并呈同步改变，镜下可见部分肌纤维有的横纹暗带染色变深、变宽、出现竹节样改变和局部染色缺失，这种改变在ＳＯＬ出现早于ＥＤＬ和ＰＬ。

脊髓横断后TrkA与TrkB在前角的免疫组化研究

目的 探讨脊髓全横断损伤后神经营养因子受体表达的变化。方法 取实验大鼠C6和L5节段脊髓作TrkA和TrkB的免疫组织化学染色。用PIPS-2020高清晰度彩色图像细胞测量系统检测免疫阳性神经元的数目和平均灰度。结果 大鼠脊髓全横断后，两种受体TrkA和TrkB在运动神经元均出现短暂的表达上调，其中TrkA在颈段的表达高峰出现在损伤后14d而腰段为损伤后7d；与此不同，TrkB在颈段和腰段两个部位的表达高峰均出现在损伤后3d。在高峰之后，两种受体的表达均下降，至术后28d已接近或低于正常水平。结论 大鼠脊髓全横断损伤后，神经营养因子特异性受体TrkA和TrkB的表达有一定的时空规律。损伤后TrkB的表达由短暂上调到表达下降，随之出现TrkA的表达高峰，这提示TrkB的表达下降可能促进了TrkA的表达。