脊髓诱发电位自动监测装置及其临床应用

脊髓诱发电位及体感诱发电位对脊髓功能的监测已有报道,它对防止术中神经系统并发症十分有用。日本旭川医科大学自1986年用微机自动脊髓监测系统成功地监测了75例脊柱手术患者,术后无一例出现神经系统并发症。本文对该系统及其监测结果作了介绍,并对诱发电位脊髓监测的临床意义作了评价。

督脉电针上调脊髓损伤早期大鼠Bcl-2 mRNA及蛋白的表达(英文)

背景:针灸对脊髓损伤后期神经功能的恢复具有明显的促进作用已得到客观证实,本课题组以往的实验已证实电针可抑制脊髓损伤早期细胞凋亡,但电针抑制细胞凋亡的机制尚不清楚。目的:通过原位杂交及免疫组织化学方法观察电针对凋亡抑制基因Bcl-2mRNA及蛋白表达的影响,探讨电针干预脊髓损伤早期细胞调亡可能的机制。设计:开放性动物实验。单位:解放军第二军医大学解剖学教研室,上海市针灸经络研究中心。材料:成年雄性SD大鼠,清洁级,鼠龄两三个月。Bcl-2原位杂交检测试剂盒(武汉博士德生物科技有限公司);Bcl-2抗体(1∶200,SantaCruzBiotechnology公司)。方法:实验于2004-07/2005-12在解放军第二军医大学解剖学教研室完成。实验大鼠随机分为模型组、电针治疗组、甲基强的松龙组及假手术组。采用改良的Allen’s垂击法致大鼠T10脊髓损伤,损伤后即刻进行督脉电针治疗,应用原位杂交和免疫组织化学方法结合图象定量分析法进行评估。主要观察指标:①脊髓损伤早期Bcl-2mRNA和蛋白的表达。②电针对Bcl-2mRNA和蛋白表达的影响结果:实验过程中如遇动物死亡,及时补充,最终42只大鼠进入结果分析。①假手术组有中等量的Bcl-2mRNA及蛋白表达。模型组在脊髓损伤后6hBcl-2mRNA表达有增高趋势,Bcl-2蛋白表达未见明显变化;伤后24hBcl-2mRNA表达增高,Bcl-2蛋白表达也相应增高。电针组Bcl-2mRNA及蛋白表达均高于模型组(P<0.05),与甲基强的松龙组相比无显著性差异。②电针及甲基强的松龙治疗6h组,Bcl-2mRNA阳性细胞数增加,灰度值降低,与假手术组和模型组相比差异有显著性和非常显著性意义(P<0.05～0.01)。电针24h治疗组,Bcl-2mRNA阳性细胞数显著增高,灰度值降低,与假手术组及模型组相比差异均具有显著性和非常显著性意义(P<0.05～0.01)。③电针24h治疗组,Bcl-2免疫阳性细胞明显增加,灰度值降低,与假手术组和模型组相比,差异具有显著性和非常显著性意义(P<0.05～0.01)。结论:电针可上调Bcl-2mRNA及蛋白的表达,进而对脊髓损伤早期细胞调亡具有部分抑制作用。

大鼠脊髓慢性压迫伤诱发电位的实验研究

为研究大鼠脊髓慢性压迫性损伤模型的体感诱发电位 (SEP)和运动诱发电位 (MEP)的病理改变及其应用价值。采用颈脊髓前侧持续压迫法造模 ,硬脑膜和硬脊膜直接引导 ,用生物信号采集处理系统进行图象采集和数据处理 ,分别于造模前、造模后即刻、造模后 15天、造模后 30天测量比较潜伏期及波幅的变化。结果硬脑膜和硬脊膜直接测量能引导出较稳定的SEP和MEP ;SEP波幅和潜伏期各组比较 ,均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;MEP造模后即刻波幅降低率较小或不降低 ,造模后 15和 30天降低明显 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;降低程度与压迫程度有关 ,中压模型组差异有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。表明直接硬膜测量法是研究脑脊髓诱发电位的较可靠方法 ;MEP波幅能灵敏地反映大鼠颈脊髓慢性损伤程度 ;

IL-1β在颈椎病大鼠颈脊髓的表达及意义

为探讨IL-1β在颈椎病大鼠颈脊髓的表达及意义。将4月龄SD大鼠96只，破坏颈椎后柱稳定性后分别饲养3、5个月，用斜板试验评价运动功能；HE染色观察颈椎间盘组织的形态学变化；免疫组织化学染色及Western Blot测定颈脊髓IL-1β的表达，与对照组比较，并经统计学处理。结果显示，斜板试验评价运动功能，3个月对照组与模型组斜板角度为75．4±3．8及46．4±6．5，5个月对照组与模型组斜板角度为74．9±4．0及45．1±7．2；C（±5）、C（5-6）椎间盘退变程度Miyarmoto分级评分结果，3个月对照组与模型组分别为1，32±0．39及2．10±0．58，5个月对照组与模型组分别为1．39±0．69及3．98±0．84。经斜板试验及组织学观察，模型组与对照组间均有统计学意义，P〈0．01。颈椎病大鼠颈脊髓IL-1β的阳性细胞数3个月对照组与模型组分别为1．98±2．01及26．56±2．65，5个月对照组与模型组分别为2．31±2．鹌及32．01±2．98；Westem Blot法测定颈脊髓不同组间IL-1β的表达，用图象处理系统ECL对务带进行扫描，测定其区带的感光密度，并进行处理。3、5个月模型组间有统计学意义（P〈0．05）。表明破坏大鼠颈椎后柱稳定可成功建立颈椎病模型。IL-1β作为一种重要的炎性介质，不但在急性脊髓损伤后显著地升高，而且在慢性颈脊髓损伤中有异常表达，井随颈椎退变程度增强而表达增强。

亚低温对大鼠急性脊髓损伤后局部线粒体呼吸功能的影响

目的:探讨亚低温治疗对大鼠脊髓损伤后局部线粒体呼吸功能的影响。方法:54只SD大鼠,随机分组为对照组(假手术组)、脊髓损伤组(SCI组)和亚低温治疗组,每组又分为处理后6、12、24h三个时相。每组6只大鼠,采用Allen's打击法造成脊髓损伤模型,在各时相点提取损伤段脊髓线粒体,测定线粒体呼吸态(R3)、态(R4)、呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O)。结果:SCI组在脊髓损伤后6、12和24h线粒体R3、RCR和P/O显著低于对照组,R4显著高于对照组,差异有统计学意义;亚低温组脊髓损伤后6、12和24h线粒体R3、RCR和P/O高于SCI组,R4低于SCI组,差异有统计学意义;亚低温组R3、R4和RCR在6h和12h时相与对照组之间无明显差异,24h时相R3、RCR和P/O低于正常对照组,有显著差异。结论:脊髓损伤后局部线粒体呼吸功能明显受到影响,线粒体内膜通透性增加,线粒体氧化磷酸化的偶联程度明显受到抑制。早期使用亚低温治疗可明显改善线粒体的呼吸功能,保护伤段脊髓线粒体的稳定性。

脊髓缺血再灌注损伤延迟性瘫痪自由基和超氧化物歧化酶动态变化

目的:动态观察新西兰兔脊髓缺血再灌注损伤延迟性瘫痪时脊髓组织超氧歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化,探讨其临床意义。方法:20只新西兰白兔随机分为两组:假手术对照组(sham组)和缺血再灌注26min组(IR组)。两组参照并改进Zivin方法建立兔脊髓腰骶段缺血再灌注延迟性瘫痪模型,比较两组不同动物不同时间点后肢运动功能及静脉血中丙二醛(MDA)、超氧歧化酶(SOD)活性。结果:对照组中MDA、SOD没有明显变化,动物均完全康复。IR组在再灌注缺血前、再灌注2h、8h、16h、24h中,SOD含量逐渐降低,至再灌注24h最低;再灌注72h、168h后SOD逐渐恢复到缺血再灌注前水平;MDA在再灌注缺血前、再灌注2h、8h、16h、24h中,含量逐渐增高,至再灌注24h达最高;再灌注72h、168h后MDA逐渐恢复至缺血再灌注前水平。SOD与MDA的含量变化明显负相关。IR组的后肢运动功能评分在再灌注2h、8h和16h与sham组无明显差异,至再灌注24h、72h和168h后明显低于对照组,出现延迟性瘫痪,平均发生时间为19.6h。结论:自由基介导的脂质过氧化反应在脊髓缺血再灌注损伤延迟性瘫痪中具有重要作用。

脊髓脊膜膨出胎鼠模型的建立及其机体抗氧化能力检测

目的:建立脊髓脊膜膨出(myelomeningocele,MMC)胎鼠模型并研究畸形机体抗氧化能力的改变。方法:取妊娠小鼠40只,随机分为3个实验组和1个对照组,分别于不同的时间点连续灌服全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)和同剂量大豆油,于孕18日剖宫取胎:①观察胎鼠外观畸形情况、椎板闭合情况、脊髓病理及神经细胞超微结构改变,②测定畸形胎鼠肝组织内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、总抗氧化能力(total antioxi-dant activity,T-AOA)及丙二醛(malonyl dialdehyde,MDA)含量。结果:实验组共获得MMC胎鼠93只,总畸形率达61.2%,各组MMC畸形率分别为T1-37.2%、T2-68.3%、T3-73.9%;各实验组GSH-Px、SOD、T-AOA均低于对照组(P<0.05),MDA含量均高于对照组(P<0.05)。结论:ATRA致畸是制作MMC胎鼠模型的简单有效的方法,MMC胎鼠抗氧化机能存在不同程度的降低。

绿色荧光蛋白腺病毒表达载体在肌源性干细胞移植修复脊髓损伤实验中的应用

目的:观察绿色荧光蛋白腺病毒表达载体在肌源性干细胞移植修复脊髓损伤实验中的应用。方法:40只成年SD大鼠随机分为移植组(n=20)和对照组(n=20),均进行脊髓半切损伤。伤后9d,移植组于伤处移植体外转染GFP基因的大鼠MDSCs,而对照组仅注射等量PBS,于移植后1、2、3、4周用BBB评分方法测大鼠的运动功能,同时进行损伤脊髓取材、快速冰冻切片进行荧光显微镜观察。结果:移植后1周两组动物运动功能恢复无明显差异;移植后2、3、4周与对照组比较,移植组显著提高运动功能;荧光显微镜观察经绿色荧光蛋白基因标记的肌源性干细胞在损伤脊髓组织局部生长良好,并且有沿着脊髓神经束向头尾两侧迁移的趋势。结论:携带绿色荧光蛋白基因的腺病毒表达载体的细胞标记方法是安全可靠、简便有效的生物示踪标记方法,可以用于标记细胞移植实验研究。

急性颈髓损伤病人血压和心率的变化及护理

目的探讨急性颈髓损伤病人血压、心率变化及护理。方法CSCI组48例,对照组30例,监测血压及心率变化。结果CSCI组血压及心率均明显低于对照组(P<0.01)。结论颈髓损伤后交感神经系统抑制,血压降低,心率减慢;对低血压及心动过缓的病人及时发现,合理治疗及护理,可维持心脏功能,减轻和预防颈髓的继发性损害,有利于病人的康复。

抑制CR3并阻断NF-κB通路改善轴突再生环境的实验研究

目的:对抑制CR3并阻断NF-κB通路改善轴突再生环境进行研究,为临床治疗提供参考。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、脊髓损伤模型组、脊髓损伤后椎扳切除术组、脊髓损伤后SN50治疗组、脊髓损伤后SN50M治疗组、脊髓损伤后注射XVA143组和脊髓损伤后硼替佐米治疗组七组各10只,检测并分析各组小鼠体内CR3、NF-κB因子及MEK/ERK通路蛋白表达变化。结果:与对照组相比,脊髓损伤小鼠血清中CR3、CR1、NF-κB、TGF-β和VEGF、IL-1β、IL-2、IL-6、MEK、ERK、Ras和Raf蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而经药物治疗后上述异常表达的蛋白得到明显的恢复(P<0.05)。结论:脊髓损伤小鼠存在明显的CR3和NF-κB通路异常,药物能够通过抑制上述通路改善轴突再生环境。