脊髓肌肉萎缩症分子诊断与携带者筛查研究进展

脊髓肌肉萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)是一种由于脊髓前角运动神经元退化引起的神经肌肉性疾病,是仅次于囊性纤维化的儿童致死性疾病,目前还没有有效的治疗方法。SMA疾病的发病率为1/6000～1/10000,携带者频率在不同的人群中为1/35～1/168,95%的SMA患者为致病基因SMN1纯合缺失所致,另外5%是由于SMN1点突变导致。由于SMA的遗传复杂性和高携带率,精准的SMA遗传咨询和风险评估显得尤为重要。全面的SMA遗传检测,加上合适的遗传咨询和风险评估,能够给SMA患儿和家庭提供完整的评估。本文主要总结脊髓肌肉萎缩症的分子诊断技术及携带者筛查的研究进展。

关于脊髓性肌肉萎缩症患儿营养管理的探讨

脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)是一种以脊髓运动神经元退行性改变为特征的神经肌肉罕见病,由运动神经元存活基因1(SMN1)缺陷引起,常表现为进行性肌萎缩和肌无力,新生儿发病率为1/10000~1/6000,人群携带率约为1/72~1/47[1]。SMA患儿除运动系统受累外,疾病进展还将进一步累及呼吸、消化和骨骼等系统,引起吸入性肺炎、吞咽和喂养困难、胃食管反流、便秘和肌肉量减低等[2]。

利用碱基编辑恢复SMN蛋白产生,在小鼠中治愈脊髓性肌肉萎缩症

据Arbaf M 2023年3月30日(Science,2023 Market 30.Doi:10.1123/science.adg6518.)报道,美国多家研究机构的研究人员利用碱基编辑技术恢复了小鼠体内SMN蛋白的自然产生,有效地治愈了啮齿动物的脊髓性肌肉萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)。

Ⅱ型脊髓肌肉萎缩症患儿基因治疗的护理

目的总结3例脊髓性肌萎缩症患儿鞘内注射诺西那生钠注射液的护理方法。方法2020年3月至2021年3月,采用以个案管理模式为基础的多学科联合照护对3例脊髓性肌萎缩症患儿完成多学科个体化评估、术前和术中护理配合、术后并发症的观察和处理。结果3例患儿均顺利完成鞘内注射,于术后第3天出院;随访未发生严重并发症。结论多学科联合照护对鞘内注射诺西那生钠注射液患儿有着积极的意义。

荧光定量PCR快速筛查脊髓性肌肉萎缩症smn1致病基因携带者

目的采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术检测脊髓性肌肉萎缩症(SMA)运动神经元生存基因1(smn1)基因拷贝数,快速筛查SMA致病基因携带者。方法采用荧光定量PCR技术检测经多重连接探针扩增技术(MLPA)确认的21例SMA携带者、79例健康人群标本,及另200例本地人群标本。结果 21例SMA携带者及79例健康人群标本检测结果与MLPA符合率均达100.0%;200例本地人群标本中,4例smn1基因拷贝数为1(为携带者),占2.0%;173例smn1基因拷贝数为2,占86.5%;23例smn1基因拷贝数为3,占11.5%。结论荧光定量PCR技术是1种快速、简便和准确的SMA致病基因携带者检测技术。

基于母体血浆单体型分析无创产前检测脊髓性肌肉萎缩症的研究

目的:探索无创产前检测(NIPT)脊髓性肌肉萎缩症(SMA)在临床应用的可行性。方法:招募生育过SMA先证者且再次妊娠的24个家系,其家系中夫妻双方及先证者致病突变经多重连接探针扩增技术(MLPA)测定。采集家系外周血及孕11周以后的孕妇血浆,通过目标序列捕获及高通量测序技术,首先对夫妻双方及先证者外周血DNA样品进行目标区域捕获测序,获得与致病位点连锁的亲本单体型信息,再结合血浆测序数据中提供的单核苷酸多态性位点的分析结果,构建隐马尔可夫模型,推断胎儿单体型,从而得到胎儿的基因型。同时利用有创产前诊断MLPA检测验证其准确性。本次研究主要针对SMN1基因第7、8号外显子的检测。结果:24个家系通过NIPT检测检出患胎5例,携带者7例,余12例正常;MLPA检测结果为5例患胎,8例携带者,11例正常。患胎均为SMN1基因第7、8号外显子纯合缺失。NIPT与MLPA检测结果一致率为95.83%(23/24),两种方法诊断结果差异无统计学意义(P=0.317)。结论:基于母体血浆目标区域捕获测序、单体型分析NIPT胎儿SMA风险的方法准确、安全,应用于有先证者遗传信息的SMA NIPT有一定可行性。

脊髓延髓肌肉萎缩症的临床特点

目的探讨脊髓延髓肌肉萎缩症(SBMA)的临床特点。方法对8例基因确诊的SBMA患者的临床资料进行回顾性分析。结果本组患者均为中青年男性。首发症状为双下肢无力3例,四肢无力1例,乳房增大2例,双上肢姿位性震颤2例。主要临床表现为进行性肢体无力、肌肉萎缩,下肢重,病情进展缓慢。患者均出现束颤,出现双上肢姿位性震颤3例,舌肌萎缩和震颤5例,乳房增大4例,性功能减退2例。血清肌酸激酶均增高,血脂异常5例,性激素水平异常7例。肌电图均呈广泛神经源性损害。雄激素受体(AR)基因CAG重复序列数均>40次。结论 SBMA主要表现为缓慢进展的脊髓和延髓下运动神经元性瘫痪,确诊有赖于AR基因CAG重复序列的检测。

多重连接依赖性探针扩增方法在脊髓性肌肉萎缩症基因诊断中的应用

目的探讨多重连接依赖性探针扩增(MLPA)方法在脊髓性肌肉萎缩症(SMA)基因诊断中的应用,指导SMA的遗传咨询。方法收集3例疑似SMA的患儿及其父母的外周血标本,提取基因组DNA,应用MLPA技术进行分析。结果3例患儿均存在运动神经元存活基因端粒侧(SMN1)的纯合缺失,拷贝数为0;患儿父母均存在SMN1基因的杂合缺失,拷贝数为1。结论 MLPA技术可以应用于SMA患儿的基因诊断,不仅快速、简便,还可辨别携带者致病基因杂合缺失情况,可筛查携带者。

脊髓性肌肉萎缩症的基因诊断

目的 检测湖北省大冶市 1例脊髓性肌肉萎缩症 (SMA)先证者的运动神经元生存基因 (SMN)第 7外显子的基因缺失。方法 采用PCR DraI酶切法检测先证者及其 6位亲属及 30名正常对照的SMN基因的 7号外显子的缺失情况。结果 发现该患者缺失了端粒SMN基因 (SMNt)的第 7外显子 ,而正常对照及家系成员均未发现外显子的缺失。结论 PCR

贵阳市5138例孕妇人群脊髓性肌肉萎缩症筛查及高风险胎儿产前诊断的意义

探讨贵阳市孕妇人群脊髓性肌肉萎缩症携带者筛查及产前诊断的意义。方法 研究对象为贵阳市5138例孕妇,对其实施荧光定量PCR。结果 (1)5138例孕妇共有108例携带者,占比2.1%,其中包含67例SMN1基因7号外显子杂合缺失携带者。(2)67例脊髓性肌肉萎缩症7号外显子杂合缺失携带者均对其丈夫进行检测,3例为与孕妇同型携带者。(3)对2例高风险胎儿进行SMA基因产前诊断,其检查结果均为SMN1基因7号外显子纯合缺失。经遗传咨询后选择终止妊娠,另一例孕妇失访。结论 孕妇人群中脊髓性肌肉萎缩症携带者筛查的意义显著,对高风险胎儿进行产前诊断可及时检测出基因正常与否,有利于评估妊娠风险,便于孕妇及时做出正确选择,对于优生优育,有效预防SMA患儿的出生具有重要的临床意义。

重庆一脊髓延髓肌肉萎缩症家系的基因检测研究

目的对重庆一家系中3例临床诊断脊髓延髓肌肉萎缩症(SBMA)的患者行基因检测,证实其为SBMA家系。方法对3例患者进行神经系统查体,常规检测神经电生理、肌电图、血清肌酸激酶(CK)等。抽取患者静脉血5ml,抽提基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增雄激素受体(AR)基因第一外显子CAG重复片段,PCR产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳,异常样本进行直接测序。结果 3例患者肌电图均显示神经源性损害,血清CK均增高,经AR基因检测,2例患者CAG重复次数为56次,1例CAG重复次数为51次。结论 AR基因检测是诊断SMBA最可靠的方法,继续对该家系的致病相关基因进行研究将对该病的治疗和预防有重要意义。

美国FDA批准首种治疗脊髓性肌肉萎缩症药物Spinraza(nusinersen)

美国FDA于2016年12月23日批准一种名为Spinraza（nusinersen）的新药用于治疗儿童及成人脊髓性肌肉萎缩症（又称脊肌萎缩症，spinal muscular atrophy, SMA）,这也是FDA批准的第1种用于治疗该疾病的药物。SMA是一种罕见的但却是致命性的遗传性疾病，患者通常出现下运动神经元缺失．而下运动神经元的功能主要是控制动作。下运动神经元缺失会引起患者身体虚弱和肌肉萎缩。SMA的发病年龄、症状和病程具有广泛的个体差异。Spinraza剂型为注射剂，可直接注射到围绕脊髓的体液中，适用于各类SMA患者。

针药结合治疗脊髓延髓肌肉萎缩症1例

脊髓延髓肌肉萎缩症(SBMA)是一种极为罕见的X-连锁隐性遗传运动神经元病。该文根据1例SBMA患者的主诉、症状等情况,采用针灸结合中药治疗效果显著,为临床提供治疗思路。

不伴有舌肌萎缩的脊髓延髓肌肉萎缩症

成年起病的神经源性近端肌肉萎缩主要见于Kugelberg-Welander综合征(KW)和脊髓延髓肌肉萎缩症(SBMA)。SBMA是一种X-性连锁隐性遗传病,主要表现为近端肌肉萎缩的球麻痹和肌束震颤。当SBMA患者主诉肌肉无力时,舌肌萎缩通常是主要症状之一。现报道1例从遗传学上证实为罕见的不伴有舌肌萎缩的散发性SBMA病例。

1例脊髓性肌萎缩干细胞移植的观察及护理

脊髓性肌肉萎缩症（spinal muscular atrophy,SMA）是一种常染色体隐性遗传的神经肌肉病,以脊髓前角细胞变性为特点[1]。传统治疗以改善神经营养、理疗、中药治疗为主,疗效不肯定,我院于2010年3月收治1例,采用干细胞移植治疗SMA，并针对病人在治疗过程中存在的护理问题，实施有针对性的护理，取得了满意的效果。现报道如下。

单精子测序技术在一个脊髓性肌肉萎缩症家系胚胎植入前遗传学检测中的应用

目的探讨单精子测序技术在脊髓性肌肉萎缩症(SMA)家系胚胎植入前单基因遗传病检测(PGT-M)中的应用价值。方法选取2020年6月于江西省妇幼保健院就诊的一个生育过2例SMA患儿(均已夭折)的家系作为研究对象,利用机械制动法分离11份单精子样本并进行全基因组扩增,采用荧光定量PCR与Sanger测序法对扩增产物进行SMN1基因变异检测。选取女方、女方父母和男方的基因组DNA,以及1份携带和2份未携带SMN1基因变异的单精子扩增产物,在变异位点上下游2 Mb区域内选取100个单核苷酸多态性位点,设计引物进行靶向捕获高通量测序,通过连锁分析确定男女双方与SMN1基因致病变异连锁的染色体单体型。经卵胞浆内单精子显微注射技术受精获取囊胚,活检滋养外胚层细胞,经全基因组扩增后行高通量测序检测胚胎的单体型,判断胚胎的致病性。对野生型胚胎进行染色体非整倍体检测,选择SMN1基因型为正常的整倍体胚胎进行移植。于孕18周行羊水穿刺产前诊断,确认胎儿的基因型。新生儿出生后进行跟踪随访。结果基因检测发现夫妇双方均携带SMN1基因第7、8外显子缺失杂合变异,其中女方携带的变异遗传自其父亲,男方为新发变异。利用单精子测序技术成功构建出男方单体型。PGT检测发现5枚胚胎携带SMN1基因杂合变异,4枚为野生型,其中3枚为整倍体。移植1枚野生型整倍体胚胎,妊娠中期羊水检测证实胎儿未携带SMN1基因第7、8外显子缺失变异。新生儿足月出生,随访9个月未见异常。结论应用单精子测序技术为1对夫妻双方均携带SMN1基因第7、8外显子杂合缺失变异且男方为新发变异的夫妇构建出男方致病变异的连锁单体型,并为该夫妇提供PGT检测,成功避免了SMA患儿的出生。

头环重力牵引治疗脊髓性肌肉萎缩症性脊柱侧凸的临床疗效分析

目的:分析Halo头环重力牵引在脊髓性肌肉萎缩症性脊柱侧凸患者中的临床疗效。方法:回顾性分析2019年8月至2022年3月,因脊髓性肌肉萎缩症性脊柱侧凸住院,行Halo头环重力牵引治疗的患者,对患者牵引前后坐高变化、牵引时长、胸闷改善情况、体重变化情况、是否进行2期矫形手术等相关指标分析总结。结果:共纳入16例脊髓性肌肉萎缩症性脊柱侧凸患者,牵引后坐高增加(6.44±1.79)cm,体重增加(3.38±1.63)kg,牵引时长为(8.56±4.29)个月,6例(37.5%)患者在牵引后行二期矫形手术,16例患者胸闷情况得到改善,视觉模拟量表(VAS)呼吸困难评分减低(2.50±1.21)分。性别、脊髓性肌肉萎缩症分型、年龄及牵引时长等因素对牵引后坐高影响差异无统计学意义(P=0.29,0.85,0.46,0.08)。结论:通过Halo头环重力牵引可减轻脊髓性肌肉萎缩症脊柱侧凸患者脊柱畸形,改善心肺功能,增加侧凸周围软组织柔韧度,减少脊柱畸形对脊髓的压迫,操作安全可靠,可为二期内固定矫形手术做好前期准备。

SMN基因复合杂合变异所致脊髓性肌肉萎缩症1例患儿的家系分析

目的分析1个脊髓性肌肉萎缩症(SMA)家系SMN1基因的变异情况,为遗传咨询和产前诊断提供依据。方法以2020年1月在南昌市第一医院就诊的1个SMA家系作为研究对象。采集其外周血样,提取DNA,用多重连接探针杂交(MLPA)法对患儿及其亲属的SMN基因进行检测,再用二代测序(NGS)对患儿进行变异分析,用Sanger测序法对结果进行验证。同时采集外周血样,提取cDNA,以先证者cDNA为模板甄别点变异在SMN1和SMN2基因中的分布情况。结果先证者的SMN1基因存在Exon7+Exon8杂合缺失及c.81G>A复合杂合变异,其中c.81G>A变异遗传自其母亲及外祖,SMN1 Exon7+Exon8杂合缺失遗传自父亲及祖母。其姨妈携带SMN1 c.81G>A杂合缺失,姑姑、姑父及表妹未检测到外显子缺失。通过cDNA扩增和Sanger测序,明确c.81G>A变异位于SMN1基因。结论MLPA联合Sanger测序、NGS技术能够明确SMA患者携带的SMN基因的复合杂合变异。