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靶向CD19的脐带血衍生CAR-NK细胞有望治疗多种B细胞恶性肿瘤
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《生物医学工程与临床》 CAS 2024年第2期179-179,共1页
据Marin D[Nat Med,2024 Jane 18. doi:10.1038/s41591-023-02785-8.]报道,美国德克萨斯大学MD安德森癌症中心的研究人员报道一项Ⅰ/Ⅱ期临床试验,37例复发性或难治性B细胞恶性肿瘤患者接受靶向CD19的脐带血衍生嵌合抗原受体(CAR)自然杀... 据Marin D[Nat Med,2024 Jane 18. doi:10.1038/s41591-023-02785-8.]报道,美国德克萨斯大学MD安德森癌症中心的研究人员报道一项Ⅰ/Ⅱ期临床试验,37例复发性或难治性B细胞恶性肿瘤患者接受靶向CD19的脐带血衍生嵌合抗原受体(CAR)自然杀伤(NK)细胞疗法,结果显示在治疗100 d后的总反应率为48.6%,1年无进展生存率和总生存率分别为32%和68%。该临床试验报道了极佳的安全性,没有出现严重的细胞因子释放综合征、神经毒性或移植物抗宿主疾病。 展开更多
关键词 Ⅱ期临床试验 B细胞恶性肿瘤 嵌合抗原受体 德克萨斯大学 脐带 总生存率 cd19 CAR
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妊娠及围产因素对子代脐带血CD34^(+)造血干细胞的影响分析
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作者 仝晓鑫 李惠敏 +2 位作者 翟青梅 张璐涵 丁桂凤 《生物医学工程与临床》 CAS 2023年第6期759-763,共5页
目的分析妊娠及围产因素对子代CD34^(+)造血干细胞数量和脐带血有核细胞总数的影响。方法选择乌鲁木齐市妇幼保健院2021年5月至2022年5月收集的120例健康产妇的新生儿脐带血标本,其中男性60例,女性60例;新生儿体质量2500~4000 g。采用XE... 目的分析妊娠及围产因素对子代CD34^(+)造血干细胞数量和脐带血有核细胞总数的影响。方法选择乌鲁木齐市妇幼保健院2021年5月至2022年5月收集的120例健康产妇的新生儿脐带血标本,其中男性60例,女性60例;新生儿体质量2500~4000 g。采用XE-2100全自动血液分析仪对子代脐带血中的有核细胞进行计数。采用流式细胞分析仪分析CD34^(+)造血干细胞。收集新生儿及相应产妇的临床资料,主要包括孕母年龄、孕母血型、孕母身体质量指数(BMI)、孕母过敏史、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、分娩方式、产次、孕周、新生儿性别、新生儿体质量、胎盘质量、是否胎膜早破、是否羊水污染、是否脐带绕颈等信息,分析其对脐带血CD34^(+)造血干细胞影响。结果妊娠期因素主要有孕母年龄、孕母血型、孕母BMI、孕母过敏史、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、分娩方式、产次和孕周。围产期因素主要包括新生儿性别、新生儿体质量、胎盘质量、胎膜早破、羊水污染、脐带绕颈。根据临床信息分组进行组间比较发现,孕母血型、孕母BMI、孕母过敏史、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压、分娩方式、产次、新生儿性别、新生儿体质量、胎盘质量、是否胎膜早破、是否羊水污染、是否脐带绕颈等因素与脐带血有核细胞总数和CD34^(+)造血干细胞数量无相关性(P>0.05),而孕母年龄和孕周均与CD34^(+)造血干细胞数量呈正相关(P<0.05)。结论子代脐带血中CD34^(+)造血干细胞数量与孕母年龄和孕周密切相关,孕母的年龄越大或孕周越大则CD34^(+)造血干细胞数量越多,这为脐血库筛选脐带血入库时提供了更多的理论依据。 展开更多
关键词 妊娠因素 围产因素 子代脐带 cd34^(+)造细胞
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人脐带间充质干细胞对脐血CD34^+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响 被引量:6
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作者 郝牧 漆佩静 +5 位作者 李刚 孟恒星 徐燕 李长虹 王亚非 邱录贵 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期71-75,共5页
目的探讨人脐带间充质干细胞对脐血CD34^+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响。方法将3.5×10~5个脐血CD34^+细胞单独(单移植组)或与5.0×10~6个人脐带间充质干细胞共同(共移植组)输入经^(137)Cs 3.0Gy照射后的NOD/SCID小鼠... 目的探讨人脐带间充质干细胞对脐血CD34^+细胞在NOD/SCID小鼠体内造血重建的影响。方法将3.5×10~5个脐血CD34^+细胞单独(单移植组)或与5.0×10~6个人脐带间充质干细胞共同(共移植组)输入经^(137)Cs 3.0Gy照射后的NOD/SCID小鼠体内,观察移植后6周内小鼠外周血象的变化情况。于移植后第6周处死小鼠,采用流式细胞术检测小鼠骨髓、脾脏及外周血人源细胞(hCD45^+)含量,并分别检测小鼠骨髓中人源淋巴系(CD3/CD19)、粒系(CD33)、单核系(CD14)、血小板(CD61)、红系(CD235a)等各系血细胞比例,比较间充质干细胞共移植对CD34^+细胞植入率的影响。结果移植后3周,两组小鼠外周血象开始有不同程度恢复;移植后6周,共移植组外周血白细胞和血小板计数均已达高峰,明显高于单移植组(P<0.05),两组小鼠的红细胞计数差异无统计学意义(P>0.05)。移植后6周,共移植组骨髓及外周血中人源细胞hCD45^+CD34^+比例分别为(42.66±2.57)%和(4.74±1.02)%,明显高于单移植组的(25.27±1.67)%和(1.19±0.54)%(P=0.006)。移植后6周,共移植组小鼠骨髓内的CD19^+、CD33^+、CD14^+、CD61^+和CD235a^+细胞比例均明显高于单移植组(P<0.05),CD3^+T淋巴细胞比例明显低于单移植组(P=0.003);CD19^+ B淋巴细胞得到优势扩增,明显高于其他各系血细胞比例(P<0.05)。结论脐带间充质干细胞与脐血CD34^+细胞共移植可促进造血干细胞的植入,缩短CD34^+细胞移植后造血恢复时间。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 cd34^+细胞 重建 细胞移植
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脐带血来源的间充质干细胞对CD34+细胞增殖的支持作用及其机制(英文) 被引量:3
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作者 徐志娟 盛立霞 +4 位作者 楼燕茹 牧启田 张怡 张宜生 欧阳桂芳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期802-808,共7页
目的:探讨脐带血来源的间充质干细胞体外支持造血干细胞扩增的能力及所涉及的可能机制。方法:将来源于脐血的造血干细胞与间充质干细胞共培养14 d,然后计数造血干细胞数与集落形成单位。ELISA方法检测间充质干细胞培养上清中含有的细胞... 目的:探讨脐带血来源的间充质干细胞体外支持造血干细胞扩增的能力及所涉及的可能机制。方法:将来源于脐血的造血干细胞与间充质干细胞共培养14 d,然后计数造血干细胞数与集落形成单位。ELISA方法检测间充质干细胞培养上清中含有的细胞因子。结果:与间充质干细胞共培养的造血干细胞增殖率明显高于单独培养的造血干细胞(P<0.05)。此外,在培养体系中添加外源性细胞因子可明显提高造血干细胞增殖率(P<0.05)。间充质干细胞能分泌多种细胞因子,包括GM-CSF、IL-7、IL-8、IL-11、SCF和SDF-1α。结论:脐带血间充质干细胞作为细胞滋养层可用于体外扩增造血干细胞,间充质干细胞分泌的细胞因子可能介导MSC对HSC增殖的支持作用。 展开更多
关键词 脐带 间充质干细胞 cd34+细胞 细胞 体外扩增 细胞因子
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人脐带血CD34^+细胞体外诱导树突状细胞及其激活T细胞抗肿瘤免疫反应的实验研究 被引量:2
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作者 王冠军 解丽华 +3 位作者 王晓 冯凯 李梁 裴雪涛 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期188-190,共3页
To induce the growth and differentiation of dendritic cells (DCs) from human cord blood, CD34 + cells isolated from human cord blood by mini MACS were cultured in a liquid culture system with rhSCF, rhGM CSF, rhTNF α... To induce the growth and differentiation of dendritic cells (DCs) from human cord blood, CD34 + cells isolated from human cord blood by mini MACS were cultured in a liquid culture system with rhSCF, rhGM CSF, rhTNF α and rhFL for 10 days. Then the induced cells were characterized by DC′s morphological and phenotypic properties. In addition, they stimulated the proliferation of allogeneic T cells and possessed an efficient capacity for initiating T cell dependent antitumor immune responses in vitro. It is concluded that mature DCs could be obtained from human cord blood CD34 + cells. 展开更多
关键词 脐带 cd34^+细胞 树突状细胞 T细胞 抗肿瘤免疫反应 实验研究
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脐带间充质干细胞对脐血CD34+细胞体外扩增的影响 被引量:2
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作者 袁晓莉 孟恒星 +3 位作者 郝牧 李长虹 韩俊领 邱录贵 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第14期2645-2650,共6页
背景:体外扩增是目前解决脐带血干细胞移植所面临的单份脐血造血干祖细胞数不足问题的主要手段。已有许多关于不同来源的间充质干细胞联合不同细胞因子支持脐血造血干祖细胞体外扩增的报道,而单独应用间充质干细胞对人脐血CD34+细胞体... 背景:体外扩增是目前解决脐带血干细胞移植所面临的单份脐血造血干祖细胞数不足问题的主要手段。已有许多关于不同来源的间充质干细胞联合不同细胞因子支持脐血造血干祖细胞体外扩增的报道,而单独应用间充质干细胞对人脐血CD34+细胞体外扩增的报道仍很少。目的:观察应用脐带源间充质干细胞作基质层的体外培养体系对脐血CD34+细胞体外扩增的支持作用。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-03/2007-05在中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所、实验血液学国家重点实验室完成。材料:经产妇知情同意,采集健康足月分娩胎儿脐带9份。方法:应用贴壁培养的方法从正常足月出生儿脐带中分离培养间充质干细胞,通过细胞形态学、免疫表型、分化实验进行鉴定。利用免疫磁珠分离法从正常足月出生儿脐带血中分离CD34+细胞。应用3种不同培养体系进行脐血CD34+细胞的体外扩增:单独应用脐带源间充质干细胞作基质层、细胞因子培养体系和间充质干细胞联合细胞因子培养体系。主要观察指标:应用细胞计数法、集落培养计数法和流式细胞学检测法对扩增后细胞数量、集落形成能力和免疫表型进行分析比较。RT-PCR检测间充质干细胞中细胞因子的表达情况。结果:培养第14天后,间充质干细胞组的CD34+细胞比例明显高于细胞因子联合间充质干细胞组;CD34+细胞总数为培养前的(4.19±1.37)倍,明显高于细胞因子组。培养第7天和第14天,间充质干细胞组的CD34+CD38-细胞亚群比例均高于另两组。RT-PCR结果显示,脐带源间充质干细胞体外可表达干细胞因子和血小板生成素早期干细胞效应因子。结论:单独应用脐带源间充质干细胞可有效地对脐血CD34+细胞进行体外扩增,更有利于保持较早期干、祖细胞的扩增。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脐带 cd34+细胞 体外扩增
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体外扩增对脐带血CD34^+细胞归巢相关分子影响的研究 被引量:2
7
作者 汪健 孙自敏 +1 位作者 李庆 王翠翠 《临床输血与检验》 CAS 2013年第3期219-224,共6页
目的体外探讨脐带血CD34+细胞经细胞因子刺激后的增殖、分化以及表面归巢相关分子的表达。方法磁珠分选出脐血CD34+细胞,无血清培养基培养14d。实验分组:A组:培养基对照组;B组:SCF+TPO+Flt3;C组:SCF+TPO+Flt3+IL-3;应用流式细胞仪检测... 目的体外探讨脐带血CD34+细胞经细胞因子刺激后的增殖、分化以及表面归巢相关分子的表达。方法磁珠分选出脐血CD34+细胞,无血清培养基培养14d。实验分组:A组:培养基对照组;B组:SCF+TPO+Flt3;C组:SCF+TPO+Flt3+IL-3;应用流式细胞仪检测扩增前后CD34+细胞CD33、CD41、CD71、CD62L、CD162、CLA、CD44、CD11a、CD18、CD184、CD26表达;用半固体培养基培养集落形成单位(CFU)。结果 B、C两组有核细胞、CD34+细胞和CFU都得到有效扩增,C组的有核细胞、CFU扩增倍数明显高于B组(P<0.01),但CD34+细胞扩增倍数低于B组(P<0.01);扩增后的CD34+细胞表达CD33、CD41、CD71的比例增加,其中C组的增加尤为显著;扩增后CD62L、CD162、CD44的表达减低,其中C组CD62L、CD44减低更明显;而CLA、CD11a、CD18、CD184、CD26表达均上调,C组的CLA、CD11a、CD18、CD184上调更为明显。结论脐血CD34+细胞经过细胞因子的扩增,虽然有核细胞及祖细胞的量增加了,但细胞发生分化,分化因子的作用更为明显。扩增的CD34+细胞表面部分与归巢相关的分子表达上调,有促进细胞归巢的作用。 展开更多
关键词 cd34+细胞 细胞因子 扩增 归巢
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人脐带血CD34^+细胞体外诱导分化为嗜酸粒细胞的研究 被引量:2
8
作者 张辉 张大良 郭成浩 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期878-880,共3页
目的:探讨人脐血CD34+细胞在体外培养条件下向嗜酸粒细胞分化的规律。方法:从人脐血中分离纯化CD34+细胞,分成阴性对照组I、L-5组和变应性鼻炎血清组。各组分别于第1 d、2 d和第7 d、14 d、28 d行CD34+流式细胞仪分析、HE染色和电镜观... 目的:探讨人脐血CD34+细胞在体外培养条件下向嗜酸粒细胞分化的规律。方法:从人脐血中分离纯化CD34+细胞,分成阴性对照组I、L-5组和变应性鼻炎血清组。各组分别于第1 d、2 d和第7 d、14 d、28 d行CD34+流式细胞仪分析、HE染色和电镜观察。结果:IL-5组和血清组CD34+细胞比例在第2 d时就明显减少,至28 d时已剩余较低比例,其中加血清组明显低于IL-5组。在体外培养条件下加入IL-5和病人血清后,在第2 d即可见典型的嗜酸粒细胞结构,至28 d时已大部为嗜酸粒细胞,其中加病人血清组明显高于IL-5组。结论:人脐血CD34+细胞在体外培养条件下经过IL-5和病人血清刺激可早期分化为嗜酸粒细胞。可作为有效的相关研究模型。 展开更多
关键词 cd34^+细胞 嗜酸细胞
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人脐带血CD34^+细胞的提取及慢病毒载体转染的初步研究 被引量:1
9
作者 李玉艳 梁志清 +2 位作者 李彩霞 潘静 史常旭 《重庆医学》 CAS CSCD 2008年第14期1570-1571,共2页
目的探讨人脐带血CD34+细胞提取以及慢病毒转染的方法。方法脐带血20袋,采用直接梯度离心法,或6%羟乙基淀粉沉淀加梯度离心法收集单个核细胞,检测CD34+阳性率,经MACS磁珠分离获得CD34+细胞,分为完全培养基组、增强感染剂(ENis)组,过夜培... 目的探讨人脐带血CD34+细胞提取以及慢病毒转染的方法。方法脐带血20袋,采用直接梯度离心法,或6%羟乙基淀粉沉淀加梯度离心法收集单个核细胞,检测CD34+阳性率,经MACS磁珠分离获得CD34+细胞,分为完全培养基组、增强感染剂(ENis)组,过夜培养,每组按MOI 1∶1、1∶10、1∶50加入带GFP标记的慢病毒载体进行转染,每小组再分组分别加入0、1、5ng/mL polybrene,转染后36~48h,3、5、7d分别在荧光显微镜下观察转染情况。结果直接梯度法获得的单个核细胞中红细胞含量高,CD34+阳性率为0.8%vs 1.2%,MACS分离获得CD34+细胞阳性率达84.6%以上。转染后观察增强感染剂组感染率低于完全培养基组,以MOI 1∶50组荧光最强,但细胞死亡较多,加入5ng/mL polybrene组细胞大片快速裂解死亡,荧光持续时间短,以MOI 1∶10结合1ng/mL polybrene组阳性率高且荧光表达持续时间长。结论MOI 1∶10结合1ng/mL polybrene可能是慢病毒转染较理想的方法。 展开更多
关键词 cd34^+ 细胞 慢病毒载体 基因转染
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人脐带血中CD133^+细胞的分布情况以及与CD34的共表达 被引量:1
10
作者 刘红 张慧 南虎松 《吉林医学》 CAS 2016年第2期379-381,共3页
目的:了解CD133^+细胞在脐带血中的分布情况以及与CD34共表达的情况,为今后脐带血移植提供基础理论依据。方法:采用6%羟乙基淀粉沉降法和密度梯度离心法联合应用分离脐带血单个核细胞。采用流式细胞技术检测单个核细胞中的CD34^+/CD133^... 目的:了解CD133^+细胞在脐带血中的分布情况以及与CD34共表达的情况,为今后脐带血移植提供基础理论依据。方法:采用6%羟乙基淀粉沉降法和密度梯度离心法联合应用分离脐带血单个核细胞。采用流式细胞技术检测单个核细胞中的CD34^+/CD133^+百分率。结果:单个核细胞中CD133^+百分比为0.17%±0.08%,在CD34^+细胞中同时表达CD133的百分比为78.49%±7.53%。结论:CD133在人脐带血中主要表达与CD34^+细胞亚群上,且CD133^+细胞在单个核细胞中所占的比例较CD34^+细胞低。 展开更多
关键词 cd133^+细胞 脐带 细胞
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细胞因子扩增脐带血CD_(34)^+细胞中LTC-IC的变化 被引量:2
11
作者 仇志根 范华骅 《白血病》 2000年第1期33-34,共2页
目的 :探讨脐带血造血干细胞的体外扩增及移植最佳时机。方法 :免疫磁珠法分离纯化脐带血 CD+ 3 4细胞 ,在细胞因子 FL T3配体、血小板生成素作用下 ,进行体外扩增 ,流式细胞仪检测培养体系中 CD+ 3 4 细胞数量的变化 ,甲基纤维素法检测... 目的 :探讨脐带血造血干细胞的体外扩增及移植最佳时机。方法 :免疫磁珠法分离纯化脐带血 CD+ 3 4细胞 ,在细胞因子 FL T3配体、血小板生成素作用下 ,进行体外扩增 ,流式细胞仪检测培养体系中 CD+ 3 4 细胞数量的变化 ,甲基纤维素法检测 CFU - GM、长期培养起始细胞 ( L TC- IC)。结果 :经过 2周的培养 ,有核细胞扩增 ( 2 1± 5 )倍 ,CD+ 3 4 细胞扩增 ( 9± 3 )倍 ,CFU- GM扩增 ( 164± 5 1)倍 ,L TC- IC扩增 ( 6.5± 3 .1)倍 ,随着体外培养时间的延长 ,有核细胞、CD+ 3 4 细胞和 CFU- GM得到进一步扩增 ,但培养体系中已缺少 L TC- IC。结论 :FL T3配体联合血小板生成素能扩增具有造血干细胞特征的 L TC- IC细胞 ,培养时间以 展开更多
关键词 细胞因子 体外扩增 脐带 LTC-IC cd34^+细胞
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脐带间充质干细胞对脐血CD_(34)^+祖细胞免疫反应的影响
12
作者 严晓晔 李彤 +3 位作者 张臣 侯跃龙 朱争艳 王鹏 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期34-37,41,共5页
目的探讨脐带来源的间充质干细胞(UC-MSCs)是否能有效抑制脐血CD34+祖细胞的免疫反应,影响反应过程中免疫调节细胞因子的分泌。方法从脐带中分离、培养MSCs,观察其生长形态,流式细胞术检测表面标志;将不同数量的UC-MSCs加入脐血CD34+祖... 目的探讨脐带来源的间充质干细胞(UC-MSCs)是否能有效抑制脐血CD34+祖细胞的免疫反应,影响反应过程中免疫调节细胞因子的分泌。方法从脐带中分离、培养MSCs,观察其生长形态,流式细胞术检测表面标志;将不同数量的UC-MSCs加入脐血CD34+祖细胞、外周血单个核细胞(PBMC)共培养体系中作为实验组,不加UC-MSCs的CD34+祖细胞、PBMC共培养体系为阴性对照;另设用Transwell将UC-MSCs和脐血CD34+祖细胞、外周血单个核细胞共培养体系分隔培养,分别收集各组上清液,ELISA检测IFN-γ和IL-10水平。结果UC-MSCs高表达CD105、CD90、CD29、CD49;不表达CD40、CD80、CD86、HLA-DR;加UC-MSCs组与阴性对照组相比,IFN-γ的分泌量减少(19.30±0.78)vs(27.00±1.11),(P<0.05);IL-10的分泌量增多(50.28±1.29)vs(31.68±3.08),(P<0.05),而且具有数量依赖性;Transwell分隔培养组与阴性对照组相比,IFN-γ的分泌量减少(18.33±0.47)vs(27.00±1.11),(P<0.05);IL-10的分泌量增多(48.47±1.18)vs(31.68±3.08),(P<0.05);与接触培养组相比,IFN-γ的分泌量增多(18.33±0.47)vs(7.14±0.13),(P<0.05),IL-10的分泌量减少(85.19±2.36)vs(48.47±1.18),(P<0.05)。结论UC-MSCs能抑制脐血CD34+祖细胞的免疫反应中IFN-γ的分泌,同时促进IL-10分泌,并且这种作用部分依赖于细胞间的相互接触。UC-MSCs和CD34+祖细胞共移植可作为干细胞移植治疗缺血性心肌病的有效方式。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脐带 cd34^+细胞 免疫调节
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逆转录病毒介导多药抗性基因转导脐带血CD_(34)^+细胞
13
作者 郑义 史斌 +1 位作者 崔建英 王申五 《首都医科大学学报》 CAS 2003年第3期340-342,共3页
关键词 逆转录病毒 基因转导 cd34+细胞 脐带 骨髓干细胞
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血小板第4因子对脐带血CD34^+细胞增殖及归巢相关功能影响的研究
14
作者 李桥川 邱录贵 《广西医学》 CAS 2008年第7期951-953,共3页
目的探讨血小板第4因子(PF4)对脐带血(UCB)CD34+细胞增殖及归巢相关功能影响。方法采用免疫荧光标记流式细胞仪测定、结晶紫染色测定、Transwell实验等方法。结果(1)PF4在体外能通过抑制UCB CD34+细胞凋亡增强细胞生存能力,在本研究建立... 目的探讨血小板第4因子(PF4)对脐带血(UCB)CD34+细胞增殖及归巢相关功能影响。方法采用免疫荧光标记流式细胞仪测定、结晶紫染色测定、Transwell实验等方法。结果(1)PF4在体外能通过抑制UCB CD34+细胞凋亡增强细胞生存能力,在本研究建立的FST无血清扩增培养体系中加入PF4可在一定程度上增加CD34+细胞扩增倍数。(2)PF4能够明显上调CD34+细胞CD49d、CD49 e、CD54表达,提高CD34+细胞的黏附能力。(3)PF4能够明显提高CD34+细胞CXCR-4的表达和SDF-1诱导迁移率。结论PF4能够应用于UCB CD34+细胞体外扩增,保持扩增的CD34+细胞的黏附和迁移能力。 展开更多
关键词 小板第4因子 脐带 cd34^+细胞 体外扩增 归巢功能
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缺氧脐带间充质干细胞对脐血CD34^+祖细胞免疫反应的影响
15
作者 严晓晔 李彤 +1 位作者 侯跃龙 张臣 《天津医科大学学报》 2010年第1期18-21,共4页
目的:探讨脐带来源的缺氧间充质干细胞(MSCs)是否能有效抑制脐血CD34+祖细胞免疫排斥反应,影响反应过程中免疫调节细胞因子的分泌。方法:从脐带中分离、培养MSCs,观察其生长形态,流式细胞术检测其表面标志;将缺氧处理后的脐带MSCs加到脐... 目的:探讨脐带来源的缺氧间充质干细胞(MSCs)是否能有效抑制脐血CD34+祖细胞免疫排斥反应,影响反应过程中免疫调节细胞因子的分泌。方法:从脐带中分离、培养MSCs,观察其生长形态,流式细胞术检测其表面标志;将缺氧处理后的脐带MSCs加到脐血CD34+祖细胞、外周血单个核细胞(PBMC)共培养体系中,96h后收集上清液,ELISA检测IFN-γ和IL-10水平。结果:脐带MSCs不表达CD40、CD80、CD86、HLA-DR、CD34;缺氧的脐带MSCs能抑制共培养体系中淋巴细胞IFN-γ的分泌(与对照组比,P<0.05),同时促进IL-10分泌(与对照组比,P<0.05),但与非缺氧脐带MSCs组相比,IFN-γ的分泌量增多,IL-10的分泌量减少。结论:缺氧脐带MSCs能抑制脐血CD34+祖细胞的免疫排斥反应,抑制IFN-γ的分泌,同时促进IL-10分泌,但与非缺氧脐带MSCs相比,免疫调节功能下调。 展开更多
关键词 间充质干细胞 cd34+祖细胞 细胞因子 缺氧
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非整合型质粒重编程脐带血CD34^+细胞形成诱导性多潜能干细胞的研究 被引量:1
16
作者 张权娥 刘淑平 +5 位作者 刘延风 张鸿雁 袁卫平 陈桂彬 李彦欣 许静 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期728-734,共7页
本研究探索和优化非整合质粒的方法,将人脐带血来源的CD34+(CB CD34+)细胞进行重编程,建立无病毒的iPS技术体系。利用细胞核转染仪将质粒pEB-C5和pEB-Tg转入短暂培养后的CB CD34+细胞中,使其进行重编程形成iPSC,14 d后观察到2×106C... 本研究探索和优化非整合质粒的方法,将人脐带血来源的CD34+(CB CD34+)细胞进行重编程,建立无病毒的iPS技术体系。利用细胞核转染仪将质粒pEB-C5和pEB-Tg转入短暂培养后的CB CD34+细胞中,使其进行重编程形成iPSC,14 d后观察到2×106CB CD34+细胞中约有200个类似ES细胞特征的克隆出现,并对产生的iPSC进行体内外多能性鉴定及细胞核型检测。结果表明,重编程后的CB CD34+细胞的多能性基因表达与ESC类似,细胞核型正常,外源基因无插入,且具有体内分化成三胚层的全能性。结论:利用非整合型质粒的方法重编程CB CD34+细胞形成iPSC,该方法无外源基因插入、重复性好、操作简单、且效率较高,为建立相对安全的iPSC提供了一个行之有效的途径,为深入探索iPSC应用于临床药物的筛选、组织工程和再生医学研究等提供了很好的研究材料。 展开更多
关键词 多潜能干细胞 脐带cd34+细胞 非整合型质粒
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直接转染HOXB4基因和转染HOXB4基因的脐带间充质干细胞体外扩增人脐血CD34+细胞的研究 被引量:2
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作者 贺艳霞 赵春亭 +6 位作者 王丽 刘竹珍 吴少玲 冯献启 苏湛 隋爱华 刘晓丹 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1578-1584,共7页
本研究探讨直接转染HOXB4基因和转染HOXB4基因的人脐带间充质干细胞体外扩增人脐血CD34+细胞中有核细胞数、CD34+细胞比例与扩增倍数、细胞周期及集落形成能力的异同。将人脐带间充质干细胞(HUCMSC)分为2组,1组利用慢病毒载体将HOXB4基... 本研究探讨直接转染HOXB4基因和转染HOXB4基因的人脐带间充质干细胞体外扩增人脐血CD34+细胞中有核细胞数、CD34+细胞比例与扩增倍数、细胞周期及集落形成能力的异同。将人脐带间充质干细胞(HUCMSC)分为2组,1组利用慢病毒载体将HOXB4基因转染至HUCMSC并建立滋养层(HOXB4-HUCMSC),另1组建立未转染的滋养层(HUCMSC)。应用免疫磁珠分选系统(MACS)分选出人脐血CD34+细胞,在含细胞因子的培养液中培养48 h后分5组,其中对照组2组:A组CD34+细胞(CD34+cells)为空白对照组,B组空病毒转染CD34+细胞(GFP-CD34+cells)为阴性对照组;实验组共3组:直接转染HOXB4基因组(HOXB4-CD34+cells)为C组;HUCMSC滋养层组(HUCMSC+CD34+cells)为D组;HOXB4-HUCMSC滋养层组(HOXB4-HUCMSC+CD34+cells)为E组。于培养第6、10、14 d计数有核细胞数(NC),第10 d比较不同处理条件对CD34+细胞比例、细胞周期与集落形成能力的影响。结果表明,利用慢病毒载体可将HOXB4基因转染至HUCMSC并检测到表达,成功建立了HUCMSC与HOXB4-HUCMSC滋养层。经过14 d体外培养,5组有核细胞均得到显著扩增,比较表明,其效果依次为HOXB4-HUCMSC滋养层组>直接转染HOXB4基因组>HUCMSC滋养层组>2对照组(P<0.05)。在体外扩增第10 d,5组有核细胞CD34+比例均大幅下降,经计算实验组CD34+细胞扩增倍数较第0 d显著增高,经比较显示,CD34+细胞比例与扩增倍数高低依次为直接转HOXB4基因组>HOXB4-HUCMSC滋养层组>HUCMSC滋养层组>两对照组(P<0.05);流式细胞仪分析细胞周期表明,实验组的S+G2/M期比例较对照组高,其中HOXB4-HUCMSC滋养层组比例最高,为41.57%,高于直接转染HOXB4基因的37.87%与HUCMSC的滋养层组的28.65%(P<0.05)。HOXB4-HUCMSC滋养层组与直接转HOXB4基因组的集落形成能力无差别,但均高于HUCMSC滋养层组与对照组。结论:HOXB4-HUCMSC滋养层可显著扩增CD34+细胞并可保持其干细胞活性,与直接转染HOXB4基因的CD34+细胞可能产生的潜在致病性基因插入和致突变性风险相比较,HOXB4-HUCMSC滋养层对CD34+细胞的体外扩增相对更安全,有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 cd34+细胞 日删基因 体外扩增
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人脐带血CD34+细胞诱导小鼠缺血肢体血管生成 被引量:1
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作者 陈作观 刁永鹏 +2 位作者 吴志远 闫盛 李拥军 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期491-496,共6页
目的观察体外增殖的人脐带血CD34+细胞对缺血肢体血管生成的影响,探讨CD34+细胞与血管生成的关系。方法采集人脐血细胞并进行CD34+细胞的提取、培养。建立小鼠左后肢缺血模型并随机分为CD34+细胞增殖组(n=5)、CD34+细胞组(n=5)和空白对... 目的观察体外增殖的人脐带血CD34+细胞对缺血肢体血管生成的影响,探讨CD34+细胞与血管生成的关系。方法采集人脐血细胞并进行CD34+细胞的提取、培养。建立小鼠左后肢缺血模型并随机分为CD34+细胞增殖组(n=5)、CD34+细胞组(n=5)和空白对照组(n=5)3组。采用Di I标记CD34+细胞示踪显像和抗人核抗原抗体(HNA)免疫组织化学方法评估人CD34+细胞向缺血区域的迁移能力,肢体温度、CD31免疫组织化学方法和转化生长因子β1(TGF-β1)m RNA表达评估缺血肢体血流改善情况。结果 Di I标记示踪及HNA显色可见扩增的CD34+细胞出现在小鼠缺血下肢的肌肉组织中并分布在血管周围。注射液体后第14天(t=5.421,P=0.001;t=0.616,P=0.000)和第28天(t=10.780,P=0.000;t=12.123,P=0.000),CD34+细胞增殖组和CD34+细胞组的温度改变百分比均明显高于对照组。注射液体后第28天,CD34+细胞增殖组和CD34+细胞组毛细血管密度分别为592.3±24.6(t=26.386,P=0.000)和530.7±25.5(t=21.502,P=0.000),均明显高于对照组的219.7±19.9;CD34+细胞增殖组和CD34+细胞组的TGF-β1mRNA表达量分别为(0.578±0.050)(t=12.376,P=0.000)和(0.504±0.080)copies(t=7.098,P=0.000),均明显高于对照组的(0.224±0.040)copies。结论体外培养的人脐带血CD34+细胞能向缺血区富集并诱导血管生成,促进血流复通,有望成为治疗下肢缺血的有效途径。 展开更多
关键词 管生成 cd34+细胞 脐带细胞 肢体缺 动物实验
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脐带血血清培养脐带血间充质干细胞对脐带血CD34^+细胞的体外扩增作用 被引量:2
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作者 黄望香 旷文勇 李睿娟 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期919-921,共3页
目的探讨脐带血血清(UCBS)培养的脐带血间充质干细胞(UCB-MSC)对脐带血CD34+细胞体外造血的支持作用。方法采用UCBS培养脐带血贴壁细胞,采用ELISA法检测贴壁细胞培养液中SCF、GM-CSF、IL-6和TPO含量;用流式细胞术分析其免疫表型特征;在... 目的探讨脐带血血清(UCBS)培养的脐带血间充质干细胞(UCB-MSC)对脐带血CD34+细胞体外造血的支持作用。方法采用UCBS培养脐带血贴壁细胞,采用ELISA法检测贴壁细胞培养液中SCF、GM-CSF、IL-6和TPO含量;用流式细胞术分析其免疫表型特征;在成骨细胞和脂肪细胞诱导培养条件下诱导细胞分化,采用脐带血贴壁细胞单独或与细胞因子共培养脐带血CD34+细胞。结果采用UCBS培养脐带血贴壁细胞获得的细胞具有MSC的一般特性,在贴壁细胞培养液中检测到SCF、IL-6和TPO,贴壁细胞和脐带血CD34+细胞培养14 d,联合组第10天和第14天的CD34+细胞的扩增倍数明显高于细胞因子组(P<0.05),联合组第10天明显高于单独UCB-MSCs组(P<0.05),联合组第14天与单独UCB-MSCs组类似,CD34+CD13+亚群细胞比例在联合组均明显高于细胞因子组和单独UCB-MSCs组(P<0.05)。联合组和单独UCB-MSCs组CD34+CD33-亚群细胞比例明显高于细胞因子组(P<0.05)。结论单独应用UCB-MSCs或联合细胞因子可有效地体外扩增脐带血CD34+细胞。 展开更多
关键词 脐带 间充质干细胞 cd34+细胞
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两种非整合载体重编程人脐带血CD34^+细胞形成诱导多能干细胞的研究
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作者 张权娥 史文婷 +5 位作者 陶红 何正梅 丁邦和 王春玲 于亮 李玉峰 《中国医药导报》 CAS 2016年第24期21-26,共6页
目的探索两种非整合载体重编程人脐血来源的CD34^+细胞形成诱导性多能干细胞(iPSCs)的方法。方法利用细胞核转染仪分别将两组非整合质粒转入短暂培养后的脐带血CD34^+细胞中,使其进行重编程形成iPSCs,14d后两种方法均可观察到2×10~... 目的探索两种非整合载体重编程人脐血来源的CD34^+细胞形成诱导性多能干细胞(iPSCs)的方法。方法利用细胞核转染仪分别将两组非整合质粒转入短暂培养后的脐带血CD34^+细胞中,使其进行重编程形成iPSCs,14d后两种方法均可观察到2×10~6个脐带血CD34^+细胞中约有900个类似ES细胞特征的克隆出现,并对产生的iPSCs进行体内外多能性鉴定及细胞核型检测。结果两种方法重编程效率基本相同,重编程形成的hiPSCs多能性基因OCT4、SOX2、NANOG的表达量与hES细胞系H1比较接近(P>0.05),而与CD34+细胞差别较大(P<0.05),且具有体内分化成三胚层的全能性。结论两种非整合质粒重编程人脐带血来源的CD34^+细胞形成iPSCs的方法,效率基本相同,均无外源基因插入,为建立相对安全的iPSCs提供了有效途径,为临床科研、药物筛选和再生医学研究等提供了较好的方法。 展开更多
关键词 诱导多潜能干细胞 重编程 脐带cd34+细胞 非整合型质粒
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