大鼠自由落体创伤性脑损伤动物模型的建立

目的将实验与临床相结合,探索建立稳定可靠、简便易行、可重复性的创伤性脑损伤动物模型,为临床研究奠定基础。方法40只雄性Sprague Dawley大鼠,分为假手术组与轻、中、重度组(A、B、C组)各10只。参照Feeney损伤模型,轻、中、重度组分别按打击高度(50、75、100 cm)使重量为4.5 g的钢棒自由下落打击大鼠硬脑膜建立动物模型,观察各组大鼠伤后神经行为学、脑组织形态学、病理学、免疫学改变。结果损伤后改良的神经损伤评分(modified neurological severity score,mNSS)随打击高度增加而升高(P<0.05),均高于假手术组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果提示与假手术组比较,随着打击高度的增加,光镜下可见神经基质紊乱、神经元肿胀、细胞周围间隙和血管间隙红细胞渗出,神经元细胞及胶质肿胀变性,细胞核肿大变形。免疫组织化学染色结果提示,与假手术组比较,轻、中、重度组大脑皮质β-APP、GFAP阳性表达程度增强。3组大鼠损伤后改良的神经损伤评分(mNSS)随打击高度增加而升高,均高于假手术组。差异均有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果提示,与假手术组比较,随着打击高度的增加,光镜下可见神经基质紊乱、神经元肿胀、细胞周围间隙和血管间隙红细胞渗出,神经元细胞及胶质肿胀变性,细胞核肿大变形。免疫组织化学染色结果提示,与假手术组比较,A、B、C组大脑皮质β-APP、GFAP阳性表达程度增强。结论自由落体打击大鼠硬脑膜,可成功建立创伤性颅脑损伤动物模型,其病理学特征明显,重复性和稳定性好。

脑白质损伤动物模型研究进展

脑小血管病(CSVD)主要以卒中、认知和情感障碍及总体功能下降为突出的临床表现,其中脑白质弥漫性损伤是该病的重要影像学特征。其发病机制目前仍不明确,也缺乏有效的治疗方法,而良好的脑白质损伤模型是研究其病理生理机制的基础。本文结合国内外脑白质损伤模型的研究现状,从动物类型的选择和造模方式两方面对脑白质损伤模型的研究进展进行综述,旨在为脑白质损伤模型的选择提供参考思路。

脊髓损伤的实验动物模型

能有一篇属于自己的Paper,要经历选题、实验、撰写、修改……九九八十一难。在医学科学研究中制作一个好的动物模型,实验研究算是成功了一半。一个好的疾病模型应具有以下特点:①能够再现所要研究的人类疾病,动物疾病表现应该与人类疾病相似;②动物能重复产生该疾病,最好能在两种动物体内复制该病;理想的动物模型应该是可以标准化的;③动物背景资料完整,实验动物合格,生命周期要满足实验需要;④动物要价廉、来源充足、便于运送;⑤尽可能选用小动物。如果复制出现率不高,则人类疾病动物模型价值不高;若一种方法可复制多种模型,无专一性,也会降低该模型价值。

脊髓损伤的实验动物模型

能有一篇属于自己的Paper,要经历选题、实验、撰写、修改……九九八十一难。在医学科学研究中制作一个好的动物模型,实验研究算是成功了一半。一个好的疾病模型应具有以下特点:①能够再现所要研究的人类疾病,动物疾病表现应该与人类疾病相似;②动物能重复产生该疾病,最好能在两种动物体内复制该病;理想的动物模型应该是可以标准化的;③动物背景资料完整,实验动物合格,生命周期要满足实验需要;④动物要价廉、来源充足、便于运送;⑤尽可能选用小动物。如果复制出现率不高,则人类疾病动物模型价值不高;若一种方法可复制多种模型,无专一性,也会降低该模型价值。

脊髓损伤实验动物模型

能有一篇属于自己的Paper,要经历选题、实验、撰写、修改……九九八十一难。在医学科学研究中制作一个好的动物模型,实验研究算是成功了一半。一个好的疾病模型应具有以下特点:(1)能够再现所要研究的人类疾病,动物疾病表现应该与人类疾病相似;(2)动物能重复产生该疾病,最好能在两种动物体内复制该病;理想的动物模型应该是可以标准化的;(3)动物背景资料完整,实验动物合格,生命周期要满足实验需要;(4)动物要价廉、来源充足、便于运送;(5)尽可能选用小动物。如果复制出现率不高,则人类疾病动物模型价值不高;若一种方法可复制多种模型,无专一性,也会降低该模型价值。

改良Feeney自由落体法建立大鼠创伤性脑损伤模型

背景:目前关于Feeney自由落体创伤性脑损伤模型,探讨减轻开颅过程中持续磨骨损伤因素的文献较少。目的:通过改变开颅骨窗方式改良创伤性脑损伤大鼠模型。方法:将36只SD大鼠随机平均分成假手术组、模型组和改良模型组。改良模型组造模过程中改良了开骨窗的方式,用小钻头磨骨钻低速2 m/s,在打击的损伤区域边缘打6-8个小孔,每圆孔直径为0.3-0.5 mm,感到空腔而不触及脑实质后立即抽出。改良模型组和假手术组采用改良后的方法开骨窗,模型组按常规开骨窗方法,实施的打击参数相同改良模型组;假手术组不实施打击。造模后第1天对大鼠进行mNSS评分;造模后第1,7天扫描T2WI磁共振成像,测量T2值;造模后第7天,苏木精-伊红染色病理切片观察脑组织形态学,并检测血液黏度和炎症因子白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平。结果与结论:①造模后第1天,模型组、改良模型组大鼠mNSS评分均高于假手术组(P<0.0001),改良模型组评分低于模型组(P<0.0001);②造模后第1,7天,模型组、改良模型组T2值均高于假手术组(P<0.05),改良模型组T2值低于模型组(P<0.05);③造模后第7天,模型组和改良模型组的血液黏度值、白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平均高于假手术组(P<0.05),改良模型组白细胞介素6水平低于模型组(P<0.05);④基于Feeney自由落体法的创伤性脑损伤大鼠改良模型较好地控制了创伤性脑损伤大鼠造模中开颅骨的损伤因素。

成年斑马鱼脊髓损伤模型的制备和评估

目的:建立一种成年斑马鱼脊髓损伤(SCI)模型。方法:将成年斑马鱼随机分为正常组、假手术组和SCI组。SCI组进行脊髓完全横断手术,假手术组对斑马鱼的脊髓只暴露而不切断,正常组不做特殊处理。通过测试处理后斑马鱼的自由游泳能力和顺行轴突追踪来评估神经再生的情况。结果:假手术组与正常组斑马鱼5 min游泳路径的平均距离比较,差异无统计学意义(P>0.05),与第1周相比,SCI组斑马鱼第6周的5 min游泳路径的平均距离显著增加(P<0.05)。顺行神经示踪显示SCI组斑马鱼在损伤后2周出现可观察的轴突恢复。结论:成年斑马鱼具有显著的SCI恢复能力,本实验建立的成年斑马鱼SCI模型技术成熟、容易复制,可应用于SCI的相关研究。

脑机接口在脊髓损伤康复中的应用展望

脑机接口(brain-computerinterface,BCI)通过获取大脑神经活动来控制外部设备,实现与外部数据的实时交互,分为侵入式BCI和非侵入式BCI,目前已被广泛应用于脑卒中后康复、脊髓损伤康复等领域[1-2]。Vidal[3]在1973年尝试首次采用脑电图在人与计算机之间进行通信,并使用“脑机接口”一词。

电针治疗对脊髓损伤大鼠模型神经功能的影响及作用机制

目的研究电针治疗对脊髓损伤大鼠模型神经功能的影响及作用机制。方法将50只大鼠随机分为空白对照组10只、其余40只大鼠建立脊髓损伤模型作为脊髓损伤模型组,喂养1 w后每组随机抽样2只,取脊髓组织苏木素-伊红(HE)染色,发现脊髓组织神经元缺失,结构不清晰为建模成功。建模成功后将脊髓损伤模型组剩余的38只大鼠分为模型组(13只)、甲泼尼松龙组(12只)、电针组(13只),以上各组均连续治疗1 w。对比分析各组脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养因子(NT)3、脊髓损伤的行为学评分(BBB)、丝裂原激活/细胞外信号调节激酶(MEK)2、磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(P-ERK)1。结果与空白对照组相比,模型组、甲泼尼松龙组、电针组BDNF、NT-3阳性细胞数、MEK2、P-ERK1明显降低(P<0.05);与模型组相比,甲泼尼松龙组、电针组BDNF、NT-3阳性细胞数、MEK2、P-ERK1明显升高(P<0.05);与甲泼尼松龙组相比,电针组BDNF、NT-3阳性细胞数、MEK2、P-ERK1明显升高(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组、甲泼尼松龙组、电针组BBB评分明显降低(P<0.05);与模型组相比,甲泼尼松龙组、电针组BBB升高(P<0.05);与甲泼尼松龙组相比,电针组BBB评分明显升高(P<0.05)。结论电针治疗能增强受损脊髓的神经功能,可改善脊髓损伤大鼠后肢运动功能。

IgG受体FcγRⅡB调节实验性自身免疫性脑脊髓炎致神经元损伤及Th17/Treg免疫平衡的作用研究

目的:探究IgG受体FcγRⅡB对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠神经元损伤与Th17/Treg失衡的作用。方法:C57BL/6小鼠随机分组为对照组、EAE组、FcγRⅡB组、EAE+FcγRⅡB组,每组15只,皮下注射MOG35-55肽诱导EAE模型,并给予FcγRⅡB慢病毒液处理;造模后每日称量小鼠体质量,进行神经功能评分,持续30 d;30 d后处死小鼠,HE染色观察脑组织病理形态学变化,LFB染色评估脊髓髓鞘结构变化,免疫荧光染色检测脊髓大脑皮质神经元核抗原(NeuN)和Caspase-3表达,TUNEL染色检测神经元细胞凋亡,ELISA检测血清IL-6、IL-17、IL-10及TGF-β水平,流式细胞术分析脾脏Th17、Treg细胞比例分布,Western blot测定脊髓组织维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)与Forkhead家族转录因子3(Foxp3)蛋白表达。结果:与对照组比较,EAE组小鼠体质量下降,神经功能评分升高,脑组织内炎症细胞浸润明显,脊髓中出现脱髓鞘迹象,NeuN荧光表达强度减弱而Caspase-3荧光表达强度增强,TUNEL阳性着色细胞多,细胞凋亡数增加,血清中IL-6和IL-17水平升高,IL-10和TGF-β水平降低,脾脏内Th17细胞比例升高,Treg比例降低,脊髓组织内RORγt蛋白表达上调,Foxp3蛋白表达下调(P<0.05);与EAE组比较,EAE+FcγRⅡB组小鼠体质量增加,神经功能评分降低,脑组织内炎症细胞浸润减轻,脊髓脱髓鞘现象得到改善,NeuN荧光表达强度增强,Caspase-3荧光表达强度减弱,TUNEL阳性着色细胞较少,细胞凋亡数减少,血清中IL-6和IL-17水平降低,而IL-10和TGF-β水平升高,同时脾脏内Th17细胞比例降低,Treg比例升高,脊髓组织内RORγt蛋白表达下调而Foxp3蛋白表达上调(P<0.05)。结论:FcγRⅡB对EAE小鼠具有神经保护作用,可减轻其脑组织炎症细胞浸润及脱髓鞘现象,作用机制可能与调节细胞因子水平及Th17/Treg细胞免疫平衡有关。

多发性硬化症患者及动物模型相关免疫细胞比例的变化

目的探究多发性硬化症(MS)患者及动物模型相关免疫细胞比例变化。方法选取28例MS患者作为MS组,同期25例健康体检者作为对照组(HCs组),收集两组受检者外周血血常规参数,流式细胞术检测其淋巴细胞亚群百分比;采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白片段35-55(MOG 35-55)在C57BL/6小鼠身上构建实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)模型,10只小鼠均分为对照组(control组,皮下注射等量PBS)与EAE组(注射MOG 35-55),于造模后第15天取2组小鼠大脑、脊髓和脾脏,流式细胞术检测大脑、脊髓和脾脏相关免疫细胞百分比。结果MS组患者外周血单核细胞(Mono)和嗜酸性粒细胞(Eos)比例较HCs组显著下调(P<0.05),B细胞比例显著上调(P<0.01),T细胞比例显著下调(P<0.01);EAE组小鼠较control组小鼠大脑和脊髓中淋巴细胞(CD45^(+))、巨噬细胞(CD45^(+)、CD11b^(+))、CD4^(+)T比例显著升高(P<0.01),CD8^(+)T比例显著下调(P<0.01);脾脏中巨噬细胞(CD11b^(+)、F4/80^(+))、中性粒细胞(CD11b^(+)、GR-1^(+))比例显著上调(P<0.001),CD4^(+)T比例显著下调(P<0.01)。结论MS患者及动物模型机体存在免疫细胞比例失调现象。

急性脊髓损伤动物模型的建立

目的 建立一种不同程度的脊髓损伤动物模型。 方法 自行设计一种脊髓损伤动物模型 ,以一恒定的外力和打击时间 ,观察 35只大鼠在不同的打击深度下的运动功能和病理变化。 结果 假手术组大鼠 ,苏醒后能站立行走 ,脊髓结构正常 ;打击深度为 0 .5 mm时 ,动物苏醒后能站立行走 ,脊髓结构正常 ;打击深度为 0 .8mm时 ,动物出现不全瘫 ,数天后能站立行走 ,脊髓结构破坏较轻 ;打击深度为 1.0 mm时 ,动物出现全瘫 ,4周后不能站立行走 ,脊髓结构破坏 ;打击深度为 1.5 mm时 ,动物出现全瘫 ,4周后不能站立行走 ,脊髓结构破坏严重。 结论 以打击深度为参数建立不同程度的脊髓损伤动物模型 ,重复性较好。

脊髓损伤动物模型的运动功能评价

不同的脊髓损伤动物模型复制出不同类型的解剖结构损伤以及相应的行为学改变。损伤后的运动功能评价既可直接衡量脊髓的再生、修复和神经功能的重建,也是开展神经保护药物药效学试验不可或缺的环节。该文就国内外已经建立的评价方法作系统综述,同时列举其在实验治疗学上的应用,指导研究者选用合适的评价方法。

大鼠急性脊髓损伤动物模型的建立及影像学分析

目的建立一种大鼠急性脊髓损伤的动物模型,分析模型影像特征及诊断价值。方法 32只小鼠随机分为对照组(5只)和实验组(27只),对照组只暴露T9～11脊髓,实验组显露T9～11脊髓后采用钳夹法致伤。伤后行运动功能BMS评分,术后对模型均行脊柱X线片、CT、MRI检查。结果实验组后肢运动功能损伤均明显,BMS评分与对照组差异有显著性(P<0.01);X线片可见胸椎T9～11局部骨质缺失;CT可见损伤脊髓周围组织有异常信号,但边界不清;MRI可见实验组损伤的脊髓组织T2异常强化,范围清楚,局部渗出液积聚。结论钳夹损伤建立了可靠的脊髓损伤动物模型,MRI检查对大鼠的急性脊髓损伤具有很高的敏感性和准确性。

一种新的实验性脊髓损伤中枢性疼痛动物模型的建立

目的 :研究脊髓损伤 (spinalcordinjury ,SCI)中枢性疼痛 (centralpain ,CP)的发生机制以寻找治疗的根本方法。方法 :选用成年Wistar雌性大鼠 3 0只 ,分为两组 (X1,X2 组 )。用WADE法造成脊髓L2阶段的 3 0 0gcm (X1)和 2 0 0 gcm (X2 )的损伤 ,损伤前后分别在L1阶段记录刺激胫神经引起的体感诱发电位。于术前和术后 4、8、12、16、2 4h、每天用VonFreyHair等测定大鼠的对机械性轻压、轻触损伤近端躯体的痛反应阈及前足 5 0 %抬足率的阈值的变化 ,并观察大鼠自发痛的行为学变化。结果 :两组均出现了典型的急慢性痛超敏现象 (手术前后痛阈值的比较具有显著或非常显著性差异 ,P <0 .0 5— 0 .0 1)和自发痛现象 ,其中X1组与X2 组比较 ,严重自发痛 (自噬 )的发生比例更高 ,而且重复性好 ,与人类SCI的CP中以自发痛为主要痛苦的情况相一致。结论 :用WADE法造成大鼠3 0 0 gcm的SCI是重复性好且与人类SCI的CP最接近的SCI的CP的动物模型。

创伤性脑损伤动物模型及其实验治疗学应用

创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI),亦称颅脑损伤或头部外伤,专指由外伤引起的脑组织损害。TBI发生机制以及神经损伤后的修复治疗是当前脑研究的热点问题。动物模型的复制对开展TBI的实验治疗学研究起了巨大的推动作用。该文就国内外已经建立的撞击脑损伤、非撞击加速脑损伤和爆炸冲击波致脑外伤三类动物模型的进展作系统综述,同时列举这些模型在实验治疗学上的应用,为神经保护药物的药效学筛选提供科学指导。

脊髓损伤动物模型的建立及其评价

脊髓损伤是一种致残率很高的疾病,建立理想的脊髓损伤动物模型对于实验研究尤为重要。脊髓损伤和再生修复机制是目前神经科学研究中的难题,脊髓损伤动物模型的建立和研究进展为突破这一难题起到了非常重要的作用。本文旨在介绍建立脊髓损伤动物模型的动物选择,以及各种脊髓损伤模型的建立方法、特点,并对常用的脊髓损伤动物模型进行评价。

大鼠侧位液压冲击脑损伤动物模型的建立及病理学改变

为了能够精确地建立轻、中、重液压冲击分级脑损伤动物模型，我们设计了侧位液压冲击脑损伤装置。该装置由不锈钢储液管、压缩空气、减压设备及计算机等组成，可以精确地控制冲击气压的大小、记录冲击时脑组织所承受的压力、显示压力曲线、液压冲击后可以迅速释放系统内的压力，国内、外均未见报道。侧位液压冲击脑损伤随冲击压力的增加而加重，以冲击侧大脑半球为最重，也可波及对侧及脑底部。

犬脊髓损伤痉挛性膀胱动物模型的建立及尿动力学分析

目的:探讨犬脊髓损伤后痉挛性膀胱模型的建立。方法:12只成熟雄性比格犬,在T10水平硬膜外夹闭脊髓,制作脊髓损伤模型。用尿动力学检测分析造模术前及术后每周的最大膀胱容量、膀胱压力、膀胱顺应性和尿道压力,直到模型成功。结果:12只犬死亡2只,其余10只造模成功,造模成功时尿动力学指标如下:与术前相比最大膀胱容量减少,膀胱顺应性下降,膀胱压力上升,其差异均有显著性意义(P<0.05);尿道压力与术前相比无显著性差异(P>0.05)。造模成功时间为2—5周,其中5只为2周,1只为3周,2只为4周,2只为5周。结论:犬痉挛性膀胱模型符合骶上脊髓损伤后的膀胱表现,适用于痉挛性膀胱的研究。

大鼠脊髓慢性压迫性损伤动物模型的建立

目的 建立一种大鼠脊髓慢性压迫性损伤模型。方法 应用平头不锈钢螺钉从大鼠C_4椎体前侧钻入压迫脊髓腹侧,术后保留螺钉30 d,并用联合行为评分(CBS)、神经电生理、光镜、电镜检查进行综合评判。结果 模型动物脊髓慢性压迫随着螺钉轻、中、重程度的不同,其术后行为学、运动诱发电位(MEP)及组织学观察符合脊髓慢性压迫症病理改变的特点。结论 建立了大鼠脊髓慢性压迫性损伤模型,此模型制作简便,可重复性强,脊髓损伤能表现出不同的压迫深度,为进一步研究脊髓慢性压迫损伤病理机制奠定了基础。