miR-124通过抑制TLR4/NF-κB/CCL2对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miR)-124通过抑制Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB/CC类趋化因子配体(CCL)2对脑梗死(CI)大鼠神经元凋亡的影响。方法通过线栓闭塞大脑中动脉法建立CI大鼠模型60只,以随机数表法平均分为5组:模型组、miR-124激活剂(miR-124 agomir)组、TLR4过表达质粒组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组,另取12只大鼠只分离颈动脉,作为假手术组。分组干预后,评测大鼠神经功能缺损情况,比较各组神经功能缺损评分;采用三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测大鼠CI情况,比较各组CI面积;采用TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况,比较各组海马神经元凋亡率;采用试剂盒测量各组血清活性氧(ROS)及炎症因子环氧合酶(COX)-2、白细胞介素(IL)-17水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验检测各组脑组织miR-124表达;采用Western印迹实验检测各组脑组织凋亡及TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组分别比较,miR-124 agomir组脑组织miR-124与Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),而TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与模型组相比,miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组各指标水平无显著变化(P>0.05)。结论miR-124可通过下调TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达,抑制炎症,减轻脑组织梗死及海马神经元凋亡,修复CI大鼠神经功能。

脑组织GDF-15水平与脑梗死大鼠血管新生以及Th1/Th2免疫平衡轴的关系

目的:探讨脑组织GDF-15水平与脑梗死大鼠血管新生以及Th1/Th2免疫平衡轴的关系。方法:45只雄性SD大鼠随机分为脑梗死模型组、假手术组以及正常对照组,15只/组。模型组采用线栓法建立脑梗死模型,假手术组仅暴露颈内动脉后直接缝合皮肤,建模成功后1周评估大鼠改良神经功能缺损(mNSS)评分。采用HE染色检测脑组织病理学变化情况,Western blot法检测大鼠脑组织中组织生长分化因子-15(GDF-15)蛋白水平,RTPCR测定脑组织中GDF-15 mRNA水平。采用ELISA法检测脑组织INF-γ、IL-4表达情况,采用Spearman相关性分析大鼠脑组织中GDF-15蛋白、mRNA表达水平分别与mNSS评分、微血管密度(MVD)、INF-γ/IL-4水平之间的相关性。结果:模型组大鼠mNSS评分明显高于假手术组和正常对照组(P<0.001),模型组脑梗死面积比为(24.45±4.15)%,假手术组和正常对照组未发现脑梗死区域。模型组大鼠脑组织GDF-15蛋白、mRNA、MVD、INF-γ/IL-4水平均明显高于假手术组和正常对照组(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,模型组大鼠脑组织中GDF-15蛋白、mRNA表达水平分别与mNSS评分、MVD、INF-γ/IL-4水平呈正相关关系(P<0.001)。结论:脑梗死大鼠脑组织中GDF-15处于高表达状态,且与神经功能密切关联,其作用机制可能与血管新生以及调控Th1/Th2免疫平衡轴有关。

基于NLRP3炎性相关因子观察鸢尾素对脑梗死大鼠神经元细胞焦亡及梗死面积的影响

目的探究Nod样受体蛋白(NLRP)3炎性相关因子观察鸢尾素对脑梗死大鼠神经元细胞焦亡及梗死面积的影响。方法将40只大鼠随机分为正常组、模型组、鸢尾素组、NLRP3抑制剂组、阿司匹林组,除正常组外均建立脑梗死大鼠模型,建模后,正常组及模型组采用5μl磷酸盐缓冲液(PBS)侧脑室注射,鸢尾素组采用5μl PBS中加入0.35μg鸢尾素重组多肽注射,阿司匹林组采用5μl PBS中加入0.30μg阿司匹林注射,NLRP3抑制剂组采用NLRP3抑制剂10μg/kg侧脑室注射,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western印迹分别检测血清NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-1、白细胞介素(IL)-1β表达,采用苏木素-伊红(HE)染色观察病理组织,TUNEL检测神经元细胞焦亡及脑梗死面积检测。结果与正常组比较,模型组血清中炎性因子IL-6、IL-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,鸢尾素组NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达明显降低(P<0.05);与鸢尾素组比较,阿司匹林组NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达明显升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组脑梗死面积明显升高(P<0.05);与模型组比较,鸢尾素组脑梗死面积明显降低(P<0.05);与鸢尾素组比较,阿司匹林组脑梗死面积明显升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组NLRP3、NLRP1、Caspase-1、IL-1β蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,鸢尾素组NLRP3、NLRP1、Caspase-1、IL-1β表达明显降低(P<0.05);与鸢尾素组比较,阿司匹林组NLRP3、NLRP1、Caspase-1、IL-1β表达明显升高(P<0.05);而鸢尾素组与NLRP3抑制剂组无统计学差异(P>0.05)。正常组脑组织神经元细胞胞质饱满,无明显核破裂现象,组织结构清晰;模型组脑组织皮层区可见大量神经元细胞胞质空泡化、细胞核固缩,且组织紊乱、结构疏松、对侧较浅且核破裂明显;鸢尾素组细胞胞质空泡化及神经元细胞核固缩减少,脑组织接近正常生理结构;阿司匹林组细胞核仍有组织结构疏松及核固缩、核破裂现象。与正常组比较,模型组神经元细胞焦亡率明显升高(P<0.05);与模型组比较,鸢尾素组细胞焦亡率明显降低(P<0.05);与鸢尾素组比较,阿司匹林组细胞焦亡率明显降低(P<0.05)。结论鸢尾素可改善脑梗死大鼠神经元细胞焦亡和缩短脑梗死面积,这与降低NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达相关。

吴茱萸碱调节HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路对脑梗死大鼠神经炎症的影响

目的:探讨吴茱萸碱调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对脑梗死大鼠神经炎症的影响。方法:采用大脑中动脉栓塞法构建脑梗死大鼠模型,随机分为模型组、吴茱萸碱低剂量组、吴茱萸碱高剂量组、吴茱萸碱高剂量+空载质粒组、吴茱萸碱高剂量+HMGB1过表达组,每组15只,另选取15只健康大鼠设为假手术组,以吴茱萸碱和质粒分组处理后,采用改良神经功能缺损评分(mNSS)评估大鼠神经损伤;三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测大鼠脑梗死面积;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色检测大鼠海马神经元凋亡率;透射电镜观察大鼠海马神经元超微结构;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清及脑组织促炎因子环氧化酶-2(COX-2)、白细胞介素-18(IL-18)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平;蛋白免疫印迹法检测大鼠脑组织HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠海马神经元超微结构发生损伤,mNSS评分、脑梗死面积、海马神经元凋亡率、血清与脑组织COX-2、IL-18、iNOS水平、脑组织HMGB1、TLR4蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65明显升高(P<0.05);与模型组比较,吴茱萸碱低剂量组、吴茱萸碱高剂量组、吴茱萸碱高剂量+空载质粒组大鼠海马神经元超微结构损伤均减轻,mNSS评分、脑梗死面积、海马神经元凋亡率、血清与脑组织COX-2、IL-18、iNOS水平、脑组织HMGB1、TLR4蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低(P<0.05);吴茱萸碱高剂量组大鼠海马神经元超微结构损伤较吴茱萸碱低剂量组进一步减轻,mNSS评分、脑梗死面积、海马神经元凋亡率、血清与脑组织COX-2、IL-18、iNOS水平、脑组织HMGB1、TLR4蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65进一步降低(P<0.05)。与吴茱萸碱高剂量组比较,吴茱萸碱高剂量+HMGB1过表达组大鼠海马神经元超微结构损伤加重,mNSS评分、脑梗死面积、海马神经元凋亡率、血清与脑组织COX-2、IL-18、iNOS水平、脑组织HMGB1、TLR4蛋白表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05)。结论:吴茱萸碱可通过阻止HMGB1/TLR4/NF-κB信号激活而降低促炎因子表达,从而抑制神经炎症,减轻脑梗死大鼠神经功能损伤。

舒芬太尼调节SDF-1/CXCR4信号通路对急性脑梗死大鼠的神经保护作用研究

目的 探究舒芬太尼调节基质细胞衍生因子-1/CXC型趋化因子受体4(SDF-1/CXCR4)轴对急性脑梗死(ACI)大鼠的神经保护作用。方法 将SD大鼠分为空白组、ACI组、舒芬太尼低剂量组(10 ng·kg^(-1))、舒芬太尼高剂量组(30 ng·kg^(-1))、丁苯酞组(30 mg·kg^(-1))、AMD3100 (SDF-1/CXCR4通路拮抗剂)组(2.5 mg·kg^(-1))、舒芬太尼高剂量+AMD3100组(30 ng·kg^(-1)舒芬太尼+2.5 mg·kg^(-1)AMD3100),每组15只:除空白组外,其余各组大鼠采用中动脉闭塞(MCAO)法复制ACI大鼠模型:建模成功后次日给予相应药物处理,每天1次,持续7d,空白组、ACI组给予等体积生理盐水:改良神经功能缺损评分测定大鼠神经功能缺损情况;TCC染色测定大鼠脑梗死面积;苏木精-伊红染色观察大鼠海马组织病理变化;TUNEL染色检测大鼠神经元凋亡;Western blot法测定大鼠海马组织SDF-1、CXCR4及凋亡蛋白表达水平。结果 与对照组比较,ACI组大鼠脑组织神经功能缺损评分、脑梗死体积百分数、神经元凋亡率及B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)、相关X蛋白(Bax)表达升高,Bcl-2、SDF-1、CXCR4蛋白表达降低,海马组织细胞间隙增大,细胞核破裂且细胞排列紊乱(P<0.05)。与ACI组比较,舒芬太尼低剂量组、舒芬太尼高剂量组、丁苯酞组大鼠脑组织神经功能缺损评分、脑梗死体积百分数、神经元凋亡率及Bax表达降低,Bcl-2、SDF-1、CXCR4蛋白表达升高,海马组织病理损伤有所改善,AMD3100组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);且AMD3100减弱了高剂量舒芬太尼对ACI大鼠的神经保护作用。结论 舒芬太尼可能通过激活SDF-1/CXCR4通路对ACI大鼠产生神经保护作用。

α7nAChR抑制MyD88依赖性Zonulin释放改善脑梗死大鼠肠道炎症和肠屏障损伤

目的:观察α7型烟碱乙酰胆碱受体(α7nAChR)激动剂PNU282987对脑梗死大鼠肠道炎症和肠屏障损伤的影响。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组、中脑动脉栓塞(MCAO)组和PNU282987组。MCAO组和PNU282987组采用Longa改良线栓法制备MCAO模型,PNU282987组腹腔注射1 mg/kg PNU282987,连续7 d。苏木精—伊红(HE)染色观察肠道黏膜病理改变,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL-6)水平及血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(DLA)、内毒素(ET)水平,免疫组化法检测结肠组织Toll样受体2(TLR2)蛋白表达,western blotting法检测结肠组织紧密连接关键蛋白咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白(Claudin-1)、连蛋白(Zonulin)、带状闭合蛋白(ZO-1)、TLR2、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)和磷酸化NF-κB(p-NF-κB)蛋白表达。结果:与sham组比较,MCAO组大鼠肠上皮脱落、肠绒毛排列紊乱及黏膜下层炎性浸润,血清DAO、DLA、ET水平及结肠组织TNF-α、IL-6含量显著增高,结肠组织Occludin、Claudin-1、ZO-1蛋白表达显著下调,Zonulin、TLR2、MyD88、p-NF-κB蛋白表达显著上调(均P<0.05)。与MCAO组比较,PNU282987组大鼠肠上皮损伤减轻,血清DAO、DLA、ET水平及结肠组织TNF-α、IL-6含量显著降低,结肠组织Occludin、Claudin-1、ZO-1蛋白表达显著上调,Zonulin、TLR2、MyD88、p-NF-κB蛋白表达显著下调(均P<0.05)。结论:PNU282987可以显著改善脑梗死大鼠肠道炎症及肠屏障损伤,其机制可能与抑制TLR2/MyD88/NF-κB信号通路有关。

灵龟八法按时开穴灸对缺血性脑梗死大鼠脑组织MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的探究灵龟八法按时开穴灸对缺血性脑梗死大鼠脑组织损伤的影响及对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子(NF)-κB信号通路的调控作用。方法60只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、灵龟八法按时开穴灸干预组(艾灸3壮组、艾灸6壮组、艾灸9壮组),除假手术组外,其余5组建立缺血性脑梗死大鼠模型。造模成功后,尼莫地平组灌胃12 mg/kg尼莫地平,灵龟八法按时开穴灸干预组于每日未时(13∶00~15∶00)分别进行开穴艾灸每穴3壮、6壮、9壮,其余组不做处理。实验结束后进行神经功能评分,检测血清中白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,观察海马组织病理改变和神经元凋亡情况,检测海马组织中磷酸化(p)-细胞外周调节蛋白激酶(ERK)、ERK、p-c-Jun氨基末端激酶(JNK)、JNK、p-p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、p38MAPK、p-NF-κB、NF-κB蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经元数量减少,排列紊乱,细胞变形,胞核固缩;大鼠神经功能评分、神经元凋亡率、血清中IL-6、IL-1β、TNF-α水平、海马组织中p-ERK/ERK、p-JNK/JNK、p-p38MAPK/p38MAPK和p-NF-κB/NF-κB比值明显升高(P<0.05)。与模型组比较,尼莫地平组与灵龟八法按时开穴灸干预组海马组织损伤逐渐减轻,大鼠神经功能评分、神经元凋亡率明显降低(P<0.05);血清中IL-6、IL-1β、TNF-α水平,海马组织中p-ERK/ERK、p-JNK/JNK、p-p38MAPK/p38MAPK和p-NF-κB/NF-κB比值明显降低(P<0.05)。与尼莫地平组比较,艾灸9壮组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论灵龟八法按时开穴灸可能通过抑制MAPK/NF-κB信号通路的表达,减轻炎症反应,改善神经元损伤,保护缺血性脑梗死大鼠神经功能。

奥拉西坦通过SDF-1α/CXCR4通路促进脑梗死大鼠神经新生与迁移

[目的]探究奥拉西坦通过基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)/C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)通路促进脑梗死大鼠神经新生与迁移的机制。[方法]100只SD大鼠随机分为对照组、脑缺血(CI)组、奥拉西坦(200 mg/kg)组和奥拉西坦(200 mg/kg)+AMD3100(5 mg/kg)组,每组25只。采用电凝法制作局部永久性脑缺血大鼠模型。造模后1、7、14天进行神经功能缺损评分,TTC染色检测脑梗死体积,尼氏染色检测梗死区细胞存活,Western blot检测缺血区SDF-1α、CXCR4蛋白水平。造模后1~7天,连续腹腔注射BrdU(50 mg/kg),14天后,免疫荧光双标染色检测SVZ区BrdU^(+)Nestin^(+)、BrdU^(+)DCX^(+)细胞数量。造模前5天,大鼠SVZ区注射携带GFP的反转录病毒,14天后,免疫荧光双标染色检测梗死区GFP^(+)DCX^(+)、GFP^(+)MAP-2^(+)、GFP^(+)GFAP^(+)细胞数量。将C17.2细胞分为对照组、氧糖剥夺(OGD)组、奥拉西坦组(终浓度为200 mg/L)和奥拉西坦(终浓度为200 mg/L)+AMD3100(终浓度为100μmol/L)组。采用OGD制作细胞缺血模型,12 h后,免疫荧光双标染色检测BrdU^(+)/Nestin^(+)、BrdU^(+)/MAP-2^(+)细胞数量,Transwell实验检测细胞迁移,Western blot检测细胞培养上清液中SDF-1α、CXCR4蛋白水平。[结果]动物实验结果显示,与对照组相比,CI组大鼠mNSS评分升高,脑梗死体积增大,梗死区细胞存活数量减少,SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高,SVZ区GFP^(+)DCX^(+)、GFP^(+)MAP-2^(+)、GFP^(+)GFAP^(+)细胞数量增多(P<0.05);与CI组相比,奥拉西坦组大鼠mNSS评分降低,脑梗死体积减小,梗死区细胞存活数量增多,SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高,SVZ区GFP^(+)DCX^(+)、GFP^(+)MAP-2^(+)、GFP^(+)GFAP^(+)细胞数量增多,梗死区GFP^(+)DCX^(+)、GFP^(+)MAP-2^(+)、GFP^(+)GFAP^(+)细胞数量增多(P<0.05);与奥拉西坦组相比,奥拉西坦+AMD3100组大鼠mNSS评分升高,脑梗死体积增大,梗死区细胞存活数量减少,CXCR4蛋白水平降低,SVZ区GFP^(+)DCX^(+)、GFP^(+)MAP-2^(+)、GFP^(+)GFAP^(+)细胞数量减少(P<0.05)。细胞实验结果显示,与对照组相比,OGD组细胞BrdU^(+)/Nestin^(+)、BrdU^(+)/MAP-2^(+)数量、细胞迁移数增多,细胞培养上清液中SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高(P<0.05);与OGD组相比,奥拉西坦组细胞BrdU^(+)/Nestin^(+)、BrdU^(+)/MAP-2^(+)数量、细胞迁移数增多,细胞培养上清液中SDF-1α、CXCR4蛋白水平升高(P<0.05);与奥拉西坦组相比,奥拉西坦+AMD3100组细胞BrdU^(+)/Nestin^(+)、BrdU^(+)/MAP-2^(+)数量、细胞迁移数减少,细胞培养上清液中CXCR4蛋白水平降低(P<0.05)。[结论]奥拉西坦可能通过激活SDF-1α/CXCR4通路,促进SVZ区神经干细胞迁移至缺血区,以促进脑梗死大鼠神经新生和神经功能恢复。

异钩藤碱对急性脑梗死大鼠认知障碍的影响及机制研究

目的探讨异钩藤碱对急性脑梗死大鼠认知障碍的影响及相应机制。方法将144只SD大鼠按照随机数字表法随机分为假手术组、急性脑梗死组、异钩藤碱低剂量组、异钩藤碱高剂量组、尼莫地平组、异钩藤碱高剂量+干扰素基因刺激蛋白(STING)激动剂(ADU-S100)组,每组24只。除假手术组外,其他各组大鼠均采用线栓闭塞大脑中动脉法构建急性脑梗死大鼠模型,假手术组仅游离右侧颈外动脉、颈总动脉和颈内动脉,不做插入线栓处理。建模成功后立即给药,异钩藤碱低剂量组和异钩藤碱高剂量组大鼠分别灌胃5 mg/kg、20 mg/kg异钩藤碱,且均需腹腔注射等量的等渗盐水;尼莫地平组大鼠需灌胃30 mg/kg尼莫地平,且还需腹腔注射等量的等渗盐水;异钩藤碱高剂量+ADU-S100组大鼠需灌胃20 mg/kg异钩藤碱且腹腔注射20 mg/kg ADU-S100;假手术组、急性脑梗死组大鼠均需灌胃10 ml/kg与腹腔注射10 ml/kg的等渗盐水。给药1次/d,持续2周。末次给药处理24 h后,采用Zela-Longa法对所有大鼠进行神经功能评分,并进行Morris水迷宫实验,记录大鼠的逃避潜伏期及原平台象限停留次数。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;检测各组大鼠脑组织含水量;采用2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTC)染色测定各组大鼠脑梗死体积;采用伊文思蓝检测各组大鼠血-脑屏障通透性;采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测大鼠脑组织中闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(occludin)信使核糖核酸(mRNA)表达;采用免疫印迹检测大鼠脑组织中STING、磷酸化TANK结合激酶1(p-TBK1)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)蛋白表达,并进行组间比较。结果(1)与假手术组相比,急性脑梗死组末次给药处理24 h后神经功能评分[(2.96±0.32)分比0分]、脑组织含水量[(86.9±3.2)%比(71.8±3.1)%]、血清TNF-α[(86.7±3.5)ng/L比(35.6±1.7)ng/L]、IL-6[(167.8±6.1)ng/L比(50.2±2.2)ng/L]、脑梗死体积[(28.6±1.3)mm 3比0 mm 3]、脑组织中伊文思蓝含量[(1.57±0.13)g/L比(0.96±0.08)g/L]及STING[(1.83±0.16)比(0.86±0.08)]、p-TBK1[(0.89±0.07)比(0.41±0.03)]、p-IRF3[(0.67±0.05)比(0.13±0.01)]蛋白表达均升高,脑组织中ZO-1 mRNA[(0.45±0.04)比(1.00±0.00)]、occludin mRNA[(0.23±0.02)比(1.00±0.00)]表达均降低,逃避潜伏期延长[(33.6±1.6)s比(12.3±0.5)s],原平台象限停留次数减少[(5.9±0.2)次比(15.7±0.4)次],组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。(2)与急性脑梗死组比较,异钩藤碱低剂量组、异钩藤碱高剂量组、尼莫地平组大鼠末次给药处理24 h后神经功能评分[(2.37±0.21)、(1.14±0.17)、(1.18±0.13)分比(2.96±0.32)分]、脑组织含水量[(81.8±3.0)%、(74.9±3.0)%、(74.3±2.9)%比(86.9±3.2)%]、血清TNF-α[(71.1±1.4)、(43.4±2.0)、(41.5±1.9)ng/L比(86.7±3.5)ng/L]、IL-6[(129.8±5.4)、(81.2±3.8)、(80.0±3.6)ng/L比(167.8±6.1)ng/L]、脑梗死体积[(21.7±1.0)、(10.5±0.5)、(10.7±0.5)mm 3比(28.6±1.3)mm 3]、脑组织中伊文思蓝含量[(1.39±0.12)、(1.16±0.10)、(1.18±0.19)g/L比(1.57±0.13)g/L]及STING[(1.50±0.14)、(1.02±0.11)、(1.01±0.09)比(1.83±0.16)]、p-TBK1[(0.75±0.05)、(0.54±0.04)、(0.52±0.05)比(0.89±0.07)]、p-IRF3[(0.51±0.05)、(0.25±0.02)、(0.27±0.02)比(0.67±0.05)]蛋白表达均降低,脑组织中ZO-1 mRNA[(0.58±0.05)、(0.87±0.07)、(0.89±0.09)比(0.45±0.04)]、occludin mRNA[(0.36±0.03)、(0.71±0.06)、(0.69±0.05)比(0.23±0.02)]表达均升高,逃避潜伏期缩短[(28.6±1.0)、(16.5±0.7)、(16.4±0.7)s比(33.6±1.6)s],原平台象限停留次数增加[(8.2±0.3)、(12.8±0.5)、(12.9±0.5)次比(5.9±0.2)次],组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。(3)与异钩藤碱高剂量组比较,异钩藤碱高剂量+ADU-S100组末次给药处理24 h后神经功能评分[(2.12±0.14)分比(1.14±0.17)分]、脑组织含水量[(78.7±3.2)%比(74.9±3.0)%]、血清TNF-α[(59.7±2.1)ng/L比(43.4±2.0)ng/L]、IL-6[(118.9±4.6)ng/L比(81.2±3.8)ng/L]、脑梗死体积[(16.6±0.4)mm 3比(10.5±0.5)mm 3]、脑组织中伊文思蓝含量[(1.36±0.10)g/L比(1.16±0.10)g/L]及STING[(1.37±0.12)比(1.02±0.11)]、p-TBK1[(0.67±0.05)比(0.54±0.04)]、p-IRF3[(0.39±0.03)比(0.25±0.02)]蛋白表达均升高,脑组织中ZO-1 mRNA[(0.63±0.05)比(0.87±0.07)]、occludin mRNA[(0.46±0.05)比(0.71±0.06)]表达均降低,逃避潜伏期延长[(23.4±1.0)s比(16.5±0.7)s],原平台象限停留次数减少[(9.6±0.3)次比(12.8±0.5)次],组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论异钩藤碱可抑制急性脑梗死大鼠炎症、减少血-脑屏障损伤、降低脑水肿程度,改善认知障碍,其机制可能与抑制STING/TBK1/IRF3通路有关。

ADAPT治疗急性脑梗死大脑中动脉M1段闭塞血管术后出血发生率及影响因素分析

目的分析探讨血栓直接抽吸首次再通技术(ADAPT)治疗急性脑梗死大脑中动脉M1段闭塞血管术后出血发生率及影响因素。方法以贵州医科大学第二附属医院2022年6月~2023年6月收治的85例急性脑梗死大脑中动脉M1段闭塞患者为研究对象,对患者进行ADAPT治疗,统计患者术后出血情况,计算患者术后出血发生率。根据患者出血情况将患者分为出血组和未出血组,采用单因素分析和多因素Logistic回归分析方法对急性脑梗死大脑中动脉M1段闭塞ADAPT治疗后出血的影响因素进行分析探讨。结果85例患者术后出现出血16例,出血发生率为18.82%,其中颅内出血8例、胃肠道出血5例、泌尿系出血3例。经单因素分析,出血组患者的年龄、取栓次数、支架长度、大脑中动脉顶-底距离(D-TB)均高于对照组(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析,高龄、取栓次数多、支架长度长、D-TB高均为患者术后出血的高危因素。结论ADAPT治疗急性脑梗死大脑中动脉M1段闭塞血管术后有较高的出血发生率,其中高龄、取栓次数多、支架长度长、D-TB高为患者术后出血的高危因素,应根据患者的高危因素制定相应的干预方案,降低患者术后出血的发生率。

清热熄风活血汤调控JNK/p38 MAPK信号通路改善脑梗死大鼠脑组织损伤的干预机制

目的基于氨基末端蛋白激酶(JNK)/丝裂原活化蛋白激酶p38抗体(p38 MAPK)信号通路探究清热熄风活血汤对脑梗死大鼠脑组织损伤的干预作用的机制。方法选取30只SD健康雄性大鼠,其中10只为正常组,其余20只建立脑梗死模型并分为脑梗死组、清热熄风活血汤组,对各组大鼠进行学习记忆能力、神经功能评价,检测各组大鼠脑组织梗死面积、含水量,酶联免疫吸附试验检测Th1/Th2趋化因子、氧化应激、炎症反应指标水平,Western印迹检测JNK/p38 MAPK通路蛋白相对表达量。结果脑梗死组、清热熄风活血汤组各时间点逃避潜伏期显著长于正常组,清热熄风活血汤组各时间点逃避潜伏期显著短于脑梗死组(P<0.05);清热熄风活血汤组大鼠神经功能缺损(mNSS)评分显著低于脑梗死组(P<0.05)。脑梗死组、清热熄风活血汤组脑含水量显著高于正常组,清热熄风活血汤组大鼠梗死面积、含水量均显著低于脑梗死组(P<0.05)。与正常组比较,其他两组γ-干扰素(IFN-γ)水平较低,白细胞介素(IL)-2、IL-4、大鼠总抗氧化能力(TAOC)、活性氧(ROS)、细胞间黏附分子(ICAM)-1、IL-3水平较高,差异有统计学意义(P<0.05);与脑梗死组比较,清热熄风活血汤组IFN-γ水平较高,IL-2、IL-4、TAOC、ROS、ICAM-1、IL-3水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组比较,其他两组p-JNK、p-p38 MAPK表达较高,差异有统计学意义(P<0.05);与脑梗死组比较,清热熄风活血汤组p-JNK、p-p38 MAPK表达较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论使用清热熄风活血汤干预的脑梗死大鼠学习记忆能力、神经功能有效改善,脑梗死面积、含水量下降,脑组织氧化应激损伤、炎症反应较轻,JNK/p38 MAPK信号通路蛋白受到有效调控,进而减轻脑组织损伤,起到脑保护作用。

替罗非班通过SIRT1/VEGF信号通路减轻急性脑梗死大鼠神经元损伤

目的探讨替罗非班能否通过沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路减轻急性脑梗死(ACI)大鼠神经元损伤。方法将75只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、替罗非班(60μg/kg)组、SIRT1抑制剂(5 mg/kg SIRT1特异性抑制剂EX-527)组、替罗非班+SIRT1抑制剂组,每组15只。除假手术组外,其他4组大鼠构建ACI模型。对各组大鼠进行神经功能评分;采用氯化三苯基四氮唑染色检测大鼠脑梗死体积百分数;采用硫代巴比妥酸法检测大鼠血清丙二醛水平,采用比色法检测血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,采用微板法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)水平;采用H-E染色检测大鼠脑组织病理变化;采用TUNEL染色检测大鼠神经元凋亡水平;采用蛋白质印迹法检测大鼠海马组织中SIRT1、VEGF蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑组织海马区病理损伤严重,神经功能评分、脑梗死体积百分数、血清丙二醛水平、神经元凋亡率均较高(P均<0.05),血清GSH-Px、SOD水平及海马组织中SIRT1、VEGF蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。与模型组比较,替罗非班组、替罗非班+SIRT1抑制剂组大鼠脑组织海马区病理损伤减轻,神经功能评分、脑梗死体积百分数、血清丙二醛水平、神经元凋亡率均降低(P均<0.05),血清GSH-Px、SOD水平及海马组织中SIRT1、VEGF蛋白表达水平均升高(P均<0.05);而SIRT1抑制剂组大鼠相应指标变化呈相反趋势(P均<0.05)。结论替罗非班可能通过激活SIRT1/VEGF信号通路抑制氧化应激和神经元凋亡,进而减轻ACI大鼠的神经元损伤。

复方益糖康联合运动训练对糖尿病脑梗死大鼠神经功能修复作用

目的观察复方益糖康联合运动训练对糖尿病脑梗死大鼠神经功能改善,成熟少突胶质细胞标志物(APC)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响,探究复方益糖康联合运动训练对糖尿病脑梗死大鼠神经功能修复作用。方法160只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=15)、模型组(n=45)、中药组(n=35)、运动组(n=35)、联合组(n=30)。先后行糖尿病造模、大鼠大脑中动脉永久性闭塞术。中药组、联合组进行中药灌服,每日1次;运动组、联合组进行电动跑台训练,每日1次,每次30 min;假手术组和模型组不予中药、运动训练;上述各组共治疗3周。分别于术后24 h、7 d、21 d进行大鼠神经功能mNSS评分,免疫荧光法检测APC、MBP、Caspase-3的变化,用TUNEL法检测细胞凋亡,免疫荧光双标检测APC/Caspase-3共表达情况。用Western blot检测脑梗死缺血半暗带区脑组织中APC、MBP、Caspase-3蛋白的表达。结果缺血后24 h、7 d、21 d,神经功能行为学评分、TUNEL染色、Caspase-3免疫荧光和蛋白表达:与模型组比较,中药组、运动组、联合组大鼠明显降低(P<0.05),与单一治疗组比较,联合组显著升高(P<0.01)。少突胶质细胞、髓鞘阳性细胞及蛋白表达:与模型组比较,中药组、运动组、联合组大鼠明显升高(P<0.05),与单一治疗组比较,联合组显著升高(P<0.01)。结论益糖康联合运动训练对糖尿病脑梗死大鼠的神经功能修复,上调APC、MBP蛋白表达,下调Caspase-3蛋白表达,可能与促进成熟少突胶质细胞增多、髓鞘稳定,抑制成熟少突胶质细胞凋亡有关。

地佐辛对多发性脑梗死大鼠星形胶质细胞活性及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨地佐辛对多发性脑梗死(MCI)大鼠星形胶质细胞活性及Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB通路的影响。方法40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、地佐辛低剂量组(5 mg/kg)、地佐辛高剂量组(10 mg/kg)、尼莫地平组(2 mg/kg),每组8只,除假手术组外,其余各组均构建MCI模型,模型构建成功后连续给药干预14 d。测定各组给药第0、7、14天神经功能缺损评分,苏木素-伊红(HE)染色观察各组脑组织病理学变化,透射电镜观察脑组织星形胶质细胞结构,免疫组化测定星形胶质细胞标志物神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测脑组织炎症因子水平,Western印迹检测脑组织TLR4/NF-κB通路相关蛋白表达水平。结果与假手术组相比,模型组神经功能缺损评分、脑组织中GFAP蛋白、炎症因子水平、TLR4/NF-κB通路相关蛋白表达显著升高(P<0.05),脑组织受损、星形胶质细胞结构受损较重;与模型组相比,地佐辛低、高剂量组神经功能缺损评分、脑组织中GFAP蛋白、炎症因子水平、TLR4/NF-κB通路相关蛋白表达显著降低(P<0.05),脑组织受损、星形胶质细胞结构受损得到一定缓解,呈现一定的剂量依赖效应,但效果不及尼莫地平。结论地佐辛对MCI大鼠星形胶质细胞活性及结构具有一定的保护作用,可能与抑制TLR4/NF-κB通路有关。

阿替普酶对急性脑梗死大鼠海马区脑组织闭合蛋白5及铁死亡的影响

目的探讨阿替普酶对急性脑梗死大鼠海马区脑组织闭合蛋白5(Claudin-5)及铁死亡的影响。方法选择雄性SD大鼠36只,按照随机数字表法分为假手术组,脑梗死组,药物组,每组12只。采用大脑中动脉凝血酶栓塞法建立急性脑梗死模型。Longa评分评价大鼠神经功能,TTC染色观察脑梗死体积,比色法检测Fe^(2+)含量,免疫组织化学及Western blot检测Claudin-5及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)及胱氨酸谷氨酸逆转运体轻链蛋白(xCT)表达。结果脑梗死组Longa评分、脑梗死体积、脑组织Fe^(2+)含量、Claudin-5表达较假手术组明显升高,GPX4及xCT表达较假手术组明显降低(P<0.01)。与脑梗死组比较,药物组Longa评分[(1.33±0.50)分vs(2.90±1.66)分,P<0.01]、脑梗死体积[(32.09±11.78)%vs(41.38±7.45)%,P<0.01]、脑组织Fe^(2+)含量[(6.02±1.93)ng/L vs(9.10±1.97)ng/L,P<0.01]、Claudin-5阳性细胞数[(78.93±16.62)个vs(91.31±7.41)个,P<0.01]、Claudin-5蛋白(0.56±0.24 vs 0.81±0.21,P<0.01)表达明显降低,GPX4[(79.80±7.74)个vs(63.60±5.15)个,P<0.01]、xCT[(81.30±19.31)个vs(71.40±21.48)个,P<0.01]阳性细胞数及GPX4蛋白(0.47±0.23 vs 0.34±0.04,P<0.01)、xCT(0.64±0.10 vs 0.46±0.11,P<0.01)蛋白表达明显升高。结论阿替普酶可减轻急性脑梗死大鼠脑组织铁死亡,减少脑梗死体积,改善神经功能,其机制可能与抑制Claudin-5蛋白有关。

电针调节Th17/Treg细胞平衡对脑梗死大鼠神经炎症的影响

目的 探究电针对脑梗死大鼠的保护作用及其潜在的抗神经炎症机制。方法 建立大鼠中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型,随机分为模型组、电针非穴位组、电针治疗(水沟穴)组,另设假手术组,每组24只大鼠。末次电针治疗后,使用神经行为评估和TTC染色来检查脑损伤情况;流式细胞术检测外周血Th17/Treg细胞水平;HE染色和Nissl染色评估电针对神经元损伤的影响;脑含水量和水通道蛋白4(AQP4)检测用于评估脑水肿;免疫组织化学评估小胶质细胞和星形胶质细胞活化;Western blot评估炎症反应和Th17细胞因子(IL-17)、Treg细胞因子(IL-10)水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠神经学评分和脑梗死体积增高,神经元损伤和脑水肿程度增加,小胶质细胞和星形胶质细胞活化增加,炎症反应、Th17细胞比例和IL-17水平上调,Treg细胞比例和IL-10水平下调(P<0.05)。与模型组比较,电针非穴位组大鼠以上指标变化无统计学意义(P>0.05);与电针非穴位组比较,电针治疗组大鼠可明显改善MCAO/R模型大鼠的以上症状(P<0.05)。结论 电针治疗可调节脑梗死大鼠Th17/Treg细胞平衡,抑制小胶质细胞活化和神经炎症。

电针人中穴对脑梗死大鼠内源性神经干细胞分化的影响

[目的]观察电针人中穴(GV26)对脑梗死(CI)后内源性神经干细胞增殖、分化的影响。[方法]Wistar大鼠随机分为电针组、模型组、假手术组、空白组,前3组每组24只,按干预和取材的时间分为1、3、7、14 d 4个亚组,空白组6只,采用神经功能缺损体征评分(NSS)评定各组大鼠神经功能缺损程度;苏木精-伊红(HE)染色法观察CI后内源性神经干细胞的形态改变;免疫组化、免疫荧光双标记法检测CI后内源性神经干细胞的增殖、分化。[结果]神经功能方面,空白组、假手术组NSS评分无变化,神经功能正常,模型组、电针组CI大鼠随着时间的延长,两组大鼠在感觉、反射、肢体功能等方面均有改善,3、7、14 d时电针组NSS评分低于模型组,两组差异有统计学意义(P<0.05);HE染色,空白组和假手术组脑组织形态未见明显异常,模型组和电针组均可见神经细胞的细胞核固缩、伴细胞空泡,随干预天数增加,逐渐有结缔组织、星形胶质细胞与正常细胞生成,电针组整体修复情况优于模型组;免疫组化,与空白组、假手术组比较,模型组大鼠各时相内源性神经干细胞(eNSPCs)特异性标识物齿状回巢蛋白(Nestin)目标蛋白平均光密度值(AOD)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)AOD均明显升高(P<0.01),与模型组比较,电针组各时相Nestin AOD均较高(P<0.05或P<0.01),3、7、14 d时GFAP AOD均升高(P<0.05或P<0.01);免疫荧光双标记,与空白组、假手术组比较,模型组大鼠Nestin及GFAP表达量均明显升高(P<0.01),荧光信号强,与模型组比较,电针组各时相Nestin表达均升高(P<0.05或P<0.01),Nestin/5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)共标记信号强,3、7、14 d时GFAP表达升高(P<0.05或P<0.01),GFAP/BrdU共标记信号强。[结论]电针人中穴可明显改善CI大鼠神经功能损伤情况,促进内源性神经干细胞的增殖、分化为星形胶质细胞,从而有利于CI后神经功能网络的修复和功能的重建。

lncRNA XIST调控miR-92a/Smad7对急性脑梗死大鼠神经功能的影响

目的探讨长链非编码RNA染色体X失活特异转录物(lncRNA XIST)对微小核糖核酸(miR)-92a/信号转导分子(Smad)7轴的调控作用及对急性脑梗死(ACI)大鼠神经功能损伤的影响。方法90只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、ad-XIST组(尾静脉注射含lncRNA XIST过表达腺病毒的载体溶液)、ad-NC组(尾静脉注射不含lncRNA XIST过表达腺病毒的空载体溶液)、si-miR-92a组(尾静脉注射含miR-92a低表达序列的腺病毒载体)、si-NC组(尾静脉注射不含miR-92a低表达序列的空载体腺病毒溶液),每组15只。Longa法测定大鼠神经功能变化;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定脑梗死面积;尼氏及TUNEL法测定海马神经元形态变化及凋亡状况;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法测定海马组织lncRNA XIST、miR-92a mRNA表达;免疫组化法测定Smad7阳性表达水平。取小鼠原代海马神经元细胞,用连二亚硫酸钠诱导建立海马神经元缺血模型,随机分为对照组、模型组、si-XIST组、si-NC组、si-miR-92a组、si-NC-a组、si-XIST+si-miR-92a组,用噻唑蓝(MTT)法测定海马神经元增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-qPCR法检测各组细胞lncRNAXIST、miR-92a表达;Western印迹法检测Smad7、核转录因子(NF)-κB、磷酸化(p)-NF-κB、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果上调lncRNA XIST或沉默miR-92a,均可明显缓解ACI大鼠神经功能缺损、明显降低脑梗死面积、明显缓解海马神经元凋亡及坏死、明显上调海马组织神经元细胞胞质中Smad7阳性表达水平(P<0.05)。用连二亚硫酸钠+低糖培养可促进体外培养的海马神经元细胞凋亡并抑制其增殖(P<0.05),成功复制缺氧缺糖凋亡模型。下调lncRNA XIST可进一步促进海马神经元细胞凋亡,并促进miR-92a和促凋亡相关蛋白表达(P<0.05)。沉默miR-92a可逆转lncRNA XIST下调引起的海马神经元凋亡(P<0.05)。结论lncRNA XIST与miR-92a之间存在靶向负调控作用,上调lncRNA XIST,可靶向抑制miR-92a转录活化,进而上调Smad7表达,抑制NF-κB介导的凋亡途径活化,缓解ACI大鼠神经功能缺损及海马神经元凋亡。

基于自噬探讨左归降糖通脉方对糖尿病合并脑梗死大鼠的神经保护作用机制

目的 从自噬角度探讨左归降糖通脉方(熟地黄、枸杞子、山茱萸、黄芪、黄连等)对糖尿病合并脑梗死大鼠的神经保护作用机制。方法 将96只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、左归降糖通脉方组(24 g·kg^(-1))及二甲双胍+阿司匹林组(150 mg·kg^(-1)+15 mg·kg^(-1)),每组24只。除假手术组大鼠外,其余大鼠采用高糖高脂饲料喂养4周后腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,模型复制成功后开始灌胃给药,每日1次,连续5 d。末次灌胃后采用线栓法制备大脑中动脉栓塞大鼠模型。术后进行神经功能评分;采用TTC染色法测定脑梗死率;检测大鼠血糖值及糖化血清蛋白含量;HE染色观察缺血半脑皮质区组织损伤;ELISA法检测缺血侧大脑皮质组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;Western Blot法检测皮质组织中微管相关蛋白轻链3(LC3)、p62蛋白表达情况;免疫荧光法检测皮质组织中LC3蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠的神经功能损伤评分、脑梗死率、血糖水平、治疗前后的体质量差值及糖化血清蛋白水平显著上升(P<0.01);脑缺血侧皮质组织中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01),LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著上调(P<0.01),p62蛋白表达显著下调(P<0.01),LC3荧光表达面积显著增加(P<0.01)。与模型组比较,左归降糖通脉方组大鼠的神经功能评分及脑梗死率明显下降(P<0.05),血糖水平、治疗前后的体质量差值及糖化血清蛋白水平均显著降低(P<0.01);皮质组织中IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.01),LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达显著下调(P<0.01),p62蛋白表达显著上调(P<0.01),LC3荧光表达面积显著减少(P<0.01)。结论 左归降糖通脉方能降低糖尿病合并脑梗死大鼠的神经功能损伤,缩小脑梗死体积,降低血糖及糖化血清蛋白水平,减轻大鼠缺血侧大脑皮质炎性损伤,其机制与通过抑制大鼠皮质区细胞的过度自噬,减少炎症因子的释放有关。

针刺对脑梗死大鼠缺血脑组织血管新生相关因子表达的影响

目的:动态研究脑梗死后血管新生相关因子的变化规律和针刺干预效应,从促进血管新生角度深入揭示针刺治疗脑梗死的分子机制。方法:以MCAO模型大鼠为研究对象,分为针刺组、模型组和空白组。观察脑梗死后神经功能缺损程度改变,同时采用免疫荧光双标记法观察缺血中心及边缘区的血管新生情况,应用RT-PCR和Western blot法检测脑梗死后缺穴区域血管新生相关因子Ang-1、Ang-2、PDGF-B和bFGF mRNA及蛋白变化规律和电针干预效应。结果:电针组各时相NSS评分均小于同时相模型组。MCAO后9h~7d时电针组血管内皮细胞增殖高于同时相模型组。电针组Ang-1、Ang-2 mRNA及蛋白表达水平明显高于模型组。电针组PDGF-B mRNA在3h~6h、3d~12d时明显高于模型组,蛋白水平在6h、3d~12d时明显高于模型组。针刺组bFGF mRNA在24h~12d、蛋白水平在3d~12d时明显高于模型组。结论:电针水沟穴能明显改善MCAO大鼠神经功能症状;能够促进MCAO模型大鼠梗死区周围血管内皮细胞增殖,并将血管内皮细胞增殖出现时间显著提前,其可能机制为电针水沟穴可上调血管新生相关因子的表达,并使表达时相前移,从而促进血管新生,对改善脑梗死的预后起到了明显的积极作用。