大鼠脑缺血再灌注后水孔蛋白-4的免疫组化表达与脑水肿关系的研究

目的 研究大鼠脑缺血再灌注后脑组织中水孔蛋白 - 4 (AQP- 4 )的表达与脑水肿的关系。方法 采用大鼠大脑中动脉栓塞 (MCAO)模型 ,经免疫组化法测定 AQP- 4表达阳性细胞数 ,干、湿重法测定脑水含量 ,脑水肿以脑水含量评价。结果 脑缺血再灌注后 12 h,脑缺血坏死周边区 AQP- 4表达阳性细胞及脑水含量增加 ,于 4 8～ 12 0 h 达到高峰 ,16 8h后仍处于较高水平 ,两者之间呈正相关 (r=0 .95 8,P<0 .0 1)。结论 脑缺血再灌注后AQP- 4参与脑水肿的发生 ,为脑缺血再灌注损伤的重要因素之一。

促甲状腺激素释放激素类似物YM14673对大鼠脑损伤性脑水肿的作用及机制(英文)

背景:YM14673为促甲状腺激素释放激素(thyrotropin-releasinghormone,TRH)类似物,具有脑保护作用。目前的许多研究都在探讨其脑保护作用是否通过脑损伤后对脑水肿形成的抑制而实现的。目的:观察TRH类似物YM14673对脑损伤后血脑屏障的影响。设计:随机对照的实验研究。地点和对象:实验地点:北京市神经外科研究所;研究对象为Wistar大鼠60只,随机分为假手术组、生理盐水组、给药Ⅰ组(0.1mg/kg)、给药Ⅱ组(1mg/kg),每组15只动物。干预:制作大鼠急性脑损伤模型,创伤前从股静脉注入伊文氏蓝用于测定血脑屏障通透性的改变。假手术组开骨窗,不进行创伤打击。其他组行创伤打击。打击后腹腔注射生理盐水或YM14673溶液,伤后24h处死,测定脑水含量及脑组织和血浆中的伊文氏蓝含量。主要观察指标:①各组大鼠左右半球脑水含量变化。②各组大鼠左右半球及血浆中伊文氏蓝含量变化。结果:大鼠脑损伤后,脑组织脑水含量生理盐水组明显高于假手术组犤左侧半球:生理盐水组为(79.57±0.47)%,假手术组为(78.29±0.63)%,t=3.98,P<0.01犦,遭受直接打击的左侧半球其脑水含量明显高于右半球(t=4.74,P<0.01)。给药物YM14673干预后左右半球的脑水含量均显著下降犤左侧半球:给药Ⅰ组(0.1mg/kg)为(78.95±0.21)%,给药Ⅱ组(1mg/kg)为(78.

苯那普利对脑出血后心律失常及脑水含量的作用

为观察盐酸苯那普利 (benazeprilHCl)对大鼠脑出血后脑水含量的影响及对心律失常的作用 ,测定脑出血模型大鼠的脑水含量 ,并用 2 4h动态心电图记录心律失常发生情况。发现 :苯那普利能减低脑水含量 ,并明显减少脑出血后室性早搏发生次数。提示

甘露醇对脂多糖致小鼠脑水肿治疗的多参数评估

本研究采用脂多糖(LPS)诱导细胞因子建立小鼠脑水肿模型,评估不同作用时间(2、4、12、24 h)甘露醇对小鼠脑水肿的治疗效果。观察实验前后脑水含量差异,测定细胞因子含量(IL-1β、AQP4、TNF-α),再研究脑组织光学内源信号变化规律,最后基于这些参数分析甘露醇对脂多糖致小鼠脑水肿治疗效果。LPS组脑含水量低于NS组(P<0.05),MT组脑水含量较LPS组均显著升高(P<0.05);LPS组三种因子含量较NS组明显增加(P<0.05),MT组较LPS组均明显减少(P<0.05);血氧参数HbO2、Hb与细胞因子AQP4均具有高度相关性(0.8<|r|<1)。研究表明,AQP4与HbO2、Hb分别呈高度负相关、高度正相关,且不同作用时间MT组对小鼠脑水肿治疗均有效果,24 h组最明显。

促红细胞生成素对大鼠脑出血周边组织谷氨酸及脑水含量的影响

目的研究促红细胞生成素(Epo)对大鼠脑出血(ICH)周边组织谷氨酸(Glu)、脑水含量及细胞凋亡的影响。方法 Wistar大鼠112只,随机分为脑出血组、脑出血+Epo组,均分为(出血前、出血后4h、6h、12h、24h、72h、7d)7个时间点。测定大鼠脑出血周边组织Glu含量、大鼠脑含水量及脑出血周边组织中神经细胞凋亡情况。结果大鼠脑出血24h后含水量明显增高,48h～7d左右达到高峰,在Epo干预后,脑水肿形成明显减轻(P<0.05;P<0.01)。脑出血周边组织Glu含量在4h开始升高,分别在12h、72h达到高峰。脑出血周边组织6h出现凋亡细胞,12h上升显著(P<0.01),3d达峰值,Epo干预后,G lu含量及凋亡细胞数与脑出血组对应时间点比较显著下降(P<0.01)。结论大鼠脑出血后出现明显脑水肿,脑出血周边组织Glu含量增高,脑出血周边组织神经细胞存在长时间凋亡,Glu可以促进其凋亡;Epo干预后,大鼠脑水肿减轻,Glu含量降低,Epo减少大鼠脑出血周边组织神经细胞凋亡。

鼠脑出血后部分脑区内皮素-1表达与脑水含量变化

目的 探讨ET 1在脑出血继发性脑损伤中的作用。方法 通过脑内注射胶原酶建立大鼠脑出血模型 ,采用免疫组织化学技术观察脑出血后脑内ET 1表达与脑出血灶周围组织水肿之间的关系。结果 给大鼠尾壳核注射胶元酶 0 5IU ,4h后脑水含量即明显升高 ,2 4h达高峰 ,与此同时ET 1在皮层、海马等脑区的表达明显增多 ,并于2 4h达高峰。

依达拉奉对脑出血大鼠脑组织丙二醛含量、超氧化物歧化酶活力及脑水含量的影响

目的研究依达拉奉对实验性脑出血大鼠氧自由基反应及脑水含量的影响。方法采用立体定向自体血注入法制作实验性脑出血大鼠模型,依达拉奉组在制作模型前后给予依达拉奉腹腔注射;脑出血组大鼠不予干预;脑组织氧自由基丙二醛(MDA)含量测定采用硫代巴比妥酸法,超氧化物歧化酶(SOD)活力测定采用黄嘌呤氧化法,脑水含量测定采用干湿重法。并与假手术大鼠(对照组)比较。结果脑出血组MDA含量较对照组显著增加(P<0.01)、SOD活力显著降低(P<0.01)、脑水含量增加(P<0.05～0.01)。依达拉奉治疗组与脑出血组比较,在脑出血后1d、3d、7dMDA含量均显著降低(P<0.05～0.01),SOD活力显著提高(P<0.05～0.01),脑水含量降低(均P<0.05)。结论依达拉奉能降低实验性脑出血大鼠脑组织MDA含量、提高SOD活力、减轻脑水肿,对实验性脑出血大鼠有脑保护效应。

大鼠脑出血周边组织谷氨酸、脑水含量和细胞凋亡的变化及碱性成纤维生长因子的影响

目的研究碱性成纤维生长因子(bFGF)对脑出血(ICH)大鼠神经功能损伤、脑水肿的影响,碱性成纤维生长因子对大鼠脑出血周边组织谷氨酸(Glu)含量及细胞凋亡的影响。方法 Wistar大鼠112只,随机分为脑出血组、脑出血+bFGF组,两组各分为(出血前、出血后4h、6h、12h、24h、72h、7d)7个时间点。利用化学方法测定大鼠脑出血周边组织Glu含量,利用原位末端标记法测定出血周边组织神经细胞的凋亡情况。并在脑出血后24h、48h、72h、7d测定大鼠神经功能评分和脑含水量。结果脑出血后24h开始大鼠就出现明显的神经功能缺失症状,bFGF治疗后神经功能缺失症状得到明显改善,在1w内的各个时间点两组比较差异有显著性(P<0.01)。脑出血大鼠24h即出现脑水肿,脑水肿形成的高峰时间在ICH后48h～7d左右,ICH大鼠在bFGF治疗后脑水肿形成明显减轻,两组间比较差异有显著性(P<0.05;P<0.01)。大鼠脑出血后4h血肿周边脑区Glu含量开始升高(P<0.01),在血肿形成的高峰期12h达峰值。大鼠脑出血周边组织6h出现凋亡细胞,12h上升显著(P<0.01),3d凋亡细胞达峰值,7d时仍存在较多凋亡细胞。bFGF干预后Glu含量及凋亡细胞数量与脑出血组对应时间点比较显著下降(P<0.01)。结论脑出血大鼠出现明显脑水肿和神经功能损伤,脑出血周边组织Glu含量增高,神经细胞存在长时间凋亡,Glu可以促其凋亡;bFGF干预后,大鼠神经功能改善,脑水肿减轻,Glu含量降低,bFGF减少大鼠脑出血周边组织神经细胞凋亡。

针刺对实验性大鼠脑出血后灶周组织NF-κBp65表达和脑水含量的影响及其相关性分析

目的:探讨针刺对急性脑出血(Intracerebral hemorrage,ICH)后核转录因子-κB(NF-κBp65)动态表达及脑水含量变化的影响,并探讨两者的相关性。方法:实验选用Wistar健康雄性大鼠96只,随机将其中90只分为模型组、针刺组、西药组(茴拉西坦组)。每组又分为6h、1天、2天、3天和7天5个时间点,每个时间点随机分配6只大鼠,另设6只大鼠做空白对照。制备ICH大鼠模型,采用蛋白免疫印迹技术观察针刺在不同时间点对ICH大鼠脑组织中NF-κBp65蛋白表达及脑水含量的影响,并对两者做相关性分析。结果:针刺组大鼠脑内NF-κBp65蛋白表达在不同时间点均有显著下调,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),相关性分析提示,脑水肿与NF-κBp65表达呈正相关。结论:ICH后NF-κBp65阳性表达是加重脑水肿的一个重要因素,针刺可下调ICH后血肿周围脑组织内NF-κBp65蛋白表达,减轻脑水肿程度,防治ICH后继发性脑损伤。

大鼠脑出血周边组织脑水含量、细胞凋亡和Bax表达的变化及粒细胞集落刺激因子的影响

目的研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对脑出血(ICH)大鼠神经功能损伤、脑水肿的影响,粒细胞集落刺激因子对大鼠脑出血周边组织Bax表达及细胞凋亡的影响。方法 Wistar大鼠112只,随机分为脑出血组、脑出血+G-CSF组,两组各分为(出血前、出血后4 h、6 h、12 h、24 h、72 h、7 d)7个时间点。免疫组化法测定大鼠脑出血周边组织Bax的表达,利用原位末端标记法测定出血周边组织中神经细胞的凋亡情况。并在脑出血后24 h、48 h、72 h、7 d测定大鼠神经功能评分和脑含水量。结果脑出血后24 h开始大鼠就出现明显的神经功能缺失症状,G-CSF治疗后神经功能缺失症状得到明显改善,在1 w内的各个时间点两组比较差异有显著性(P<0.01)。脑出血大鼠24 h即出现脑水肿,脑水肿形成的高峰时间在ICH后48 h^7 d左右,ICH大鼠在G-CSF治疗后脑水肿形成明显减轻,两组间比较差异有显著性(P<0.05;P<0.01)。大鼠脑出血周边组织Bax表达4 h开始升高(P<0.01),大约24 h左右Bax表达达峰值。大鼠脑出血周边组织6 h出现凋亡细胞,12 h上升显著(P<0.01),3 d达峰值,7 d时仍存在较多凋亡细胞。G-CSF干预后,Bax表达及凋亡细胞数量与脑出血组对应时间点比较显著下降(P<0.01)。结论脑出血大鼠出现明显脑水肿和神经功能损伤,脑出血周边组织神经细胞存在长时间凋亡。G-CSF可抑制大鼠脑出血后Bax蛋白表达,从而抑制神经细胞凋亡。

丹皮酚、尼莫通对大鼠脑出血后rCBF、脑水份含量及神经行为学干预作用的研究

目的本实验采用立体定向术和新鲜未肝素化血液注入尾状核而建立大鼠脑出血模型，观察用丹皮酚、尼莫通干预后的脑出血组较单纯脑出血组在ｒＣＢＦ、脑水份含量及神经行为学方面的变化。用氢清除法分别测定血肿周围和远隔部位不同时限的ｒＣＢＦ；用干－湿法测定两组大鼠脑出血后４．１２和２４小时Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３，Ｂ４部位的脑水份含量；观察两组大鼠在脑出血后不同时限的神经行为学评分的改变。结果 丹皮酚、尼莫通干预的脑出血组血肿周围，远隔部位的ｒＣＢＦ明显增加，脑水份含量降低，神经行为学明显改善与单纯出血组比较有显著差异性（Ｐ≤０．０５或０．０１）

心脑通络液对MCAO大鼠脑水含量及AQP-4蛋白表达的影响

目的:研究心脑通络液对MCAO大鼠脑水含量及AQP-4蛋白表达的影响,探讨其对减轻缺血性脑损伤后脑水肿抑制机制,为心脑通络液的临床应用开发提供理论依据。方法:将健康SD大鼠随机分成5组。用线栓法制备MCAO大鼠模型,分别在造模成功后24h和7d实验。采用干湿比重法进行脑组织含水量测定;采用免疫组化法检测脑组织AQP-4蛋白表达。结果:心脑通络液能显著降低大鼠脑缺血后脑组织含水量,减轻缺血导致的脑组织水肿;心脑通络液各剂量组对缺血24h和7d脑组织中AQP-4蛋白表达有不同程度降低,尤以心脑通络液高剂量组表现最为明显。结论:心脑通络液能够显著降低脑组织含水量,减轻脑组织水肿;心脑通络液能通过抑制脑组织AQP-4蛋白表达,减轻脑水肿,保护血脑屏障,起到脑保护的作用。

川芎嗪、尼莫通对大鼠脑出血后局部脑血流量、脑水份含量及神经行为学干预作用的研究

目的 采用立体定向术和新鲜未肝素化血液注入尾状核而建立大鼠脑出血模型 ,观察用药物干预后的脑出血组较单纯脑出血组在局部脑血流量 (rCBF)、脑水份含量及神经行为学方面的变化。方法 用氢清除法分别测定血肿周围和远隔部位不同时限的rCBF ;用干—湿重法测定两组大鼠脑出血后不同时间和不同部位的脑水份含量 ;观察两组大鼠在脑出血后不同时限的神经行为学评分的改变。结果 川芎嗪、尼莫通干预后的脑出血组血肿周围及远隔部位的rCBF明显增加 ,脑水份含量降低 ,神经行为学明显改善 ,与单纯出血组比较有显著性差异 (P≤ 0 0 5或 0 0 1)。结论 川芎嗪。

还元注射液对急性脑出血大鼠脑水含量、脑组织Ca^(2+)、血浆内皮素的影响

观察还元注射液对胶原酶生理盐水液诱发的急性脑出血大鼠的脑水含量、血肿周围区域脑组织 Ca2 +、血浆内皮素( ET)的影响。结果表明 ,模型对照组脑水含量、脑组织 Ca2 +、血浆 ET含量均明显高于正常对照组与手术对照组 ( P<0 .0 1 ) ;还元治疗组的上述指标均明显低于模型对照组 ( P<0 .0 5 ,P<0 .0 1 )。

鼠脑出血后部分脑区血管内皮生长因子表达与脑水含量变化

目的：探讨血管内皮生长因子(VEGF)在脑出血继发性脑损伤中的作用。方法：采用脑内定向注射Ⅶ型胶原酶诱发大鼠脑出血模型。SD大鼠60只，随机分为脑出血组和对照组。脑出血组注射Ⅶ型胶原酶0．5μl(0．5U)，分别于12h、ld、3d、7d后处死，每个时相点各12只。对照组12只，注射等量生理盐水。干-湿重法测定脑含水量；免疫组织化学染色显示脑内VEGF和GFAP表达变化：显微镜下计数脑内VEGF、GFAP表达阳性的细胞并进行定量分析。结果：(1)脑出血后12h，出血侧脑含水量明显高于对照组，于ld后达高峰，7d接近正常水平；(2)脑出血后血肿周围区VEGF阳性细胞逐渐增多，第7天达最高峰，各时间点阳性细胞数比较具有显著性差异，但每个阳性细胞平均吸光度(A)无显著性变化。结论：(1)脑出血后血肿周围脑组织存在挤压损伤和局部缺血损害的区域，伴继发性脑水肿；(2)血肿周围脑组织VEGF表达增高可促进该区域内皮细胞增生，新生血管形成。VEGF可能与急性脑水肿无密切相关性；(3)血肿周围组织新生血管形成和反应性星形胶质细胞增生使该区域组织结构发生改变，提示VEGF对出血后受损神经元的功能恢复和组织修复可能起促进作用。

去铁胺干预对大鼠脑出血后水通道蛋白4mRNA表达及脑水含量的影响

目的观察水通道蛋白4(AQP4)及脑水含量在脑出血模型组及去铁胺(DFO)模型干预组的动态变化。以期阐明AQP4及DFO在脑出血后水肿形成中的机制及作用。方法采用自体血脑出血模型,应用RT-PCR方法观察AQP4mRNA的表达,干湿重法测量血肿周围的脑水含量。结果 AQP4 mRNA表达在ICH各组及DFO干预3d、7d组较假手术组明显增高,且以第3天最高。DFO干预各组与同期ICH组相比AQP4mRNA表达显著降低, DF0干预第14天组AQP4 mRNA表达与对照组无差别。脑水含量显示在ICH第1、3、7天组及DFO干预3d组较假手术组明显增高,且以第3天最高;ICH 14d组及DF0干预第7天、第14天组均与正常组无差别;DFO干预第3天及第7天组较ICH组同期脑水含量显著减少。相关分析显示AQP4mRNA表达及脑水含量之间存在正相关关系。结论 AQP4在脑出血后水肿形成及消退中可能起重要作用,去铁胺可能为干预脑出血后水肿形成的有效手段。

加减二仙汤对急性不完全脑缺血大鼠脑水肿的影响

目的:探讨加减二仙汤对急性不完全脑缺血再灌注大鼠脑组织含水量和超氧化物歧化酶活性的变化及缺血再灌不同时间脑组织的形态学改变。方法:实验于2002-12在泰山医学院形态学实验室完成。①选择99只中老年Wistar大鼠,随机分成假手术组11只、再灌对照组44只和再灌实验组44只。其中后两组又分为再灌6,24h,3,7d组,每组11只。②制备急性不完全脑缺血再灌模型,再灌实验组大鼠造模前给予加减二仙汤煎剂(由仙茅,仙灵脾,当归,黄芪,丹参,红花等中药组成,由泰山医学院附属医院中药房提供,每毫升含生药量14mg),假手术组和再灌对照组灌胃等量生理盐水。③各组于观测时间点取脑组织检测含水量和超氧化物歧化酶活性,并进行形态学研究。结果:99只大鼠均进入结果分析。①再灌实验6,24h,3d组脑含水量明显低于再灌对照6,24h,3d组[6h:(79.49±2.29),(81.04±0.09)%,t=2.374,P<0.05;24h:(78.97±2.84),(81.92±0.95)%,t=3.257,P<0.01;3d:(76.77±0.51),(79.88±0.76)%,t=4.837,P<0.01]。②再灌实验6,24h,3d组超氧化物歧化酶活性明显高于再灌对照6,24h,3d组[6h:(122.41±8.85),(113.40±9.00)μg/g,t=4.471,P<0.01;24h:(123.40±10.24),(118.54±4.16)μg/g,t=2.451,P<0.05;3d:(131.36±5.08),(127.74±3.38)μg/g,t=2.963,P<0.05]。③形态学研究结果表明,再灌对照组脑组织损伤严重,主要表现为顶叶皮质毛细血管内液体渗出,管腔狭窄甚闭锁,神经细胞损伤、皱缩甚者脱失;而再灌实验组损伤明显减轻。结论:给予加减二仙汤大鼠脑组织含水量降低,超氧化物歧化酶活性升高,说明加减二仙汤可减轻脑水肿产生,抑制再灌注损伤,保护脑组织。