银杏内酯、银杏黄酮对蛛网膜下腔出血及脑淋巴阻滞后大鼠脑组织促凋亡基因Fas配体表达的影响

目的探讨银杏内酯、银杏黄酮对蛛网膜下腔出血(SAH)及脑淋巴阻滞(CLB)后大鼠脑组织促凋亡基因Fas配体(FasL)表达的影响。方法将96只Wistar大鼠分为正常对照组、SAH组、SAH+CLB组、SAH+CLB+生理盐水组(NS组),以及银杏内酯高、低剂量组和银杏黄酮高、低剂量组。用结扎颈部淋巴管、摘除淋巴结及注入自体动脉血法制作CLB和SAH大鼠模型。制作CLB模型后1 d诱导SAH模型。用免疫荧光法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠脑组织FasL蛋白及mRNA的表达。结果各模型组大鼠脑组织FasL蛋白及mRNA表达明显高于正常对照组(P<0.05～0.01),其中以SAH+CLB组、NS组表达最高。SAH组、银杏内酯和银杏黄酮高剂量组大鼠脑组织FasL蛋白及mRNA的表达水平明显低于SAH+CLB组、NS组(均P<0.01),其中两高剂量组表达又明显低于低剂量组(均P<0.01),两低剂量组大鼠脑组织FasL蛋白阳性细胞数与SAH+CLB组及NS组差异无统计学意义。结论 SAH+CLB能诱导脑组织FasL表达水平显著增高,银杏内酯和银杏黄酮对其有抑制作用,尤以高剂量组效果更明显。

脑淋巴阻滞对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的影响及吡哆醇的干预作用

目的探讨脑淋巴阻滞(CLB)对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)的影响及吡哆醇的干预作用。方法 60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、SAH组、SAH+CLB组(CLB组)、SAH+CLB+吡哆醇组(吡哆醇组)、SAH+CLB+生理盐水组(生理盐水组)。采用自体动脉血枕大池二次注血法建立SAH模型;用结扎颈部淋巴管、摘除淋巴结制作CLB模型;吡哆醇组于制模前30 min及随后每12 h腹腔注射吡哆醇。第二次注血后48 h,在体观察各组大鼠基底动脉(BA)管径,检测BA对乙酰胆碱(Ach)的反应性,HE染色观察BA病理学变化。结果 (1)BA管径:SAH组明显小于正常对照组(P<0.01);CLB组和生理盐水组明显小于SAH组(均P<0.01);吡哆醇组较CLB组明显增大(P<0.01)。(2)BA对Ach反应性:SAH组较正常对照组降低(P<0.01);CLB组和生理盐水组较SAH组更低(均P<0.01);吡哆醇组较CLB组明显改善(P<0.01)。(3)BA病理学变化:正常对照组BA内膜光滑;SAH组血管内皮细胞肿胀,管腔狭窄,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);CLB组、生理盐水组管腔最窄,管壁最厚,大部分内皮细胞脱落(均P<0.01);吡哆醇组血管损害较CLB组明显减轻(均P<0.01)。结论 CLB可加重大鼠SAH后CVS及脑血管损害;吡哆醇可以减轻这些损害。

脑淋巴引流阻滞及其对缺血性脑神经元损伤影响的研究

目的探讨脑淋巴引流途径的生理意义和在缺血性脑神经元损伤中的作用。方法应用摘除颈部浅、深淋巴结并结扎其输入和输出淋巴管的方法建立脑淋巴引流阻滞(CLB)大鼠模型 ,大脑中动脉线栓法制作局部脑梗塞(MCAO)大鼠模型。将动物分为假手术对照(SO)组、CLB组、MCAO组和CLB +MCAO组。应用多种技术手段 ,检测动物不同时间点脑微区血流量(激光多普勒法)、皮层诱发电位 ,测定脑组织一氧化氮合酶(NOS)活性 ,丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性 ,干湿重比较法观察脑组织含水率 ,原子吸收分光光度法测定脑组织电解质含量 ,TUNEL法观察神经元凋亡 ,电子显微镜观察细胞损伤等指标。结果在术后观察7d内 ,与SO组大鼠比较 ,CLB组不同脑皮层部位微区血流量显著下降 ,体感诱发电位潜伏期明显延长(波幅未见明显变化) ,脑组织NOS活性逐渐升高 ,MDA含量增加SOD显著活性下降。脑组织水、Na +含量增加 ,伴有K +丢失和Ca2 +积聚 ,在大脑新皮层和海马区可见TUNEL染色阳性的凋亡神经元。与MCAO组比较 ,CLB +MCAO组大鼠神经功能损伤更为严重 ,同时脑微区血流量降低和MDA含量增加更显著 ,SOD活性明显下降 ,脑组织水、Na+含量增加、K+丢失和Ca2 +积聚更为明显 ,神经元细胞器损伤更加严重。

井穴放血对脑淋巴引流阻滞后缺血大鼠脑水肿的影响

目的:观察井穴放血疗法对脑淋巴引流阻断缺血大鼠脑水肿的影响。方法:将雄性SD大鼠30只随机分为正常组、假手术组、模型组、井穴放血组、缺血+淋巴引流阻滞组和缺血+淋巴引流阻滞+井穴放血组,分别用Longa法和Casley-Smith法制作永久性大脑中动脉栓塞模型和脑淋巴引流阻断模型,测定6 h后各组大鼠脑含水量、脑系数和脑密度。结果:右脑含水量模型组高于井穴放血组,差异有统计学意义(P<0.05),井穴放血组右脑含水量小于缺血+淋巴引流阻滞组与缺血+淋巴引流阻滞+井穴放血组(P<0.05),缺血+淋巴引流阻滞组和缺血+淋巴引流阻滞+井穴放血组比较差异无统计学意义(P>0.05)。左脑系数各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);除正常组和假手术组外,其余各组右脑系数与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05);全脑系数井穴放血组与缺血+淋巴引流阻滞组和缺血+淋巴引流阻滞+井穴放血组比较差异均有统计学意义(P<0.05),而缺血+淋巴引流阻滞组和缺血+淋巴引流阻滞+井穴放血组比较差异无统计学意义(P<0.05)。右侧脑密度模型组、缺血+淋巴引流阻滞组缺血+淋巴引流阻滞+井穴放血组与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:井穴放血疗法对脑缺血急性期脑水肿有一定改善作用,实施脑淋巴引流阻断后井穴放血效应减弱。