辅酶Q10联合参麦注射液对胎粪致新生儿窒息后脑缺氧性损伤患儿血清酶的影响

目的探讨辅酶Q10联合参麦注射液对胎粪致新生儿窒息后脑缺氧性损伤后血清酶的影响。方法选取天津医科大学静海临床学院胎粪致新生儿窒息后脑缺氧性损伤患儿64例,随机分为2组,各32例,对照组予以维持充足的通换气及循环功能及常规药物治疗;研究组在常规治疗基础上予以辅酶Q10联合参麦注射液治疗,共治疗7d为一疗程,测定血清酶、心肌损伤标志物、氧化应激及炎症相关因子等指标,同时对比临床疗效及并发症。结果与治疗前比较,2组治疗后肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartic transaminase,AST)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)及α-羟丁酸脱氢酶(αhydroxybutyric dehydrogenase,α-HBDH)含量降低,心肌营养因子-1(myocardial nutritional factor-1,CT-1)、心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,CTn I)及肌红蛋白(myoglobin,Mb)含量降低,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量降低,谷胱甘肽过氧化酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)含量升高,脂联素(adiponectin,APN)、胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor,IGF-1)含量升高,瘦素(leptin)含量降低(P<0.05);与对照组比较,研究组治疗后CK-MB、AST、LDH、CK及α-HBDH含量较低,CT-1、CTn I及Mb含量较低,SOD、MDA含量较低,GSH-Px含量较高,APN、IGF-1含量较高,Leptin含量较低(P<0.05);在临床疗效上,对照组总有效率65.63%与研究组总有效率87.50%对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论辅酶Q10联合参麦注射液对胎粪致新生儿窒息后脑缺氧性损伤疗效确切,降低血清酶及心肌损伤,安全性高。

早期电针长强穴对缺血缺氧性脑损伤大鼠海马CA1区神经元损伤及细胞自噬的影响

目的从自噬途径探讨早期电针长强穴对缺血缺氧性脑损伤(HIBD)新生大鼠海马CA1区神经元细胞损伤修复及神经功能改善的作用机制。方法将69只7日龄新生SD大鼠,采用随机数字表法分成空白组12只、假手术组12只和造模组45只;造模组随机数字表法分成模型组、电针组和三甲基腺嘌呤(3-MA)+电针组各15只,采用改良Rice Vannucci法制备HIBD模型,3-MA+电针组在造模前尾静脉注射3-MA,制备模型成功后每组采用随机数字表法选取12只进入实验。空白组不予任何处理,假手术组仅分离左侧颈总动脉,不予结扎,缝合消毒,不做缺氧处理。造模后6 h开始干预,连续干预3 d。电针组和3-MA+电针组进行电针长强穴干预,其他组别模拟固定。干预后比较5组大鼠体质量及倾斜板转头时间,Zea Longa法比较5组大鼠的神经功能缺损评分,免疫组织化学法检测5组大鼠海马CA1区神经元中神经元特异性核蛋白(NeuN)表达水平,透射电子显微镜观察5组大鼠海马CA1区神经元结构及自噬小体情况,Western blot法检测5组大鼠海马CA1区微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白表达量。结果与空白组比较,假手术组大鼠干预后转头时间、体质量、神经功能缺损评分、海马CA1区NeuN含量、LC3-Ⅱ蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05);与空白组比较,模型组大鼠干预后转头时间、神经功能缺损评分、海马CA1区NeuN含量、LC3-Ⅱ蛋白表达量均升高(P<0.05),体质量降低(P<0.05);与模型组比较,电针组和3-MA+电针组大鼠干预后转头时间、神经功能缺损评分、海马CA1区NeuN含量、LC3-Ⅱ蛋白表达水平降低(P<0.05),体质量升高(P<0.05)。透射电子显微镜观察发现,干预后空白组和假手术组大鼠海马区神经元细胞结构基本完整,未发现自噬小体形成;模型组大鼠海马区神经元细胞结构被破坏,部分呈空泡样,可见自噬小体及溶酶体形成;电针组海马区神经元细胞结构较模型组改善,可见少量自噬小体及溶酶体;3-MA+电针组海马区神经元细胞结构相对完整,仅见个别自噬小体。结论早期电针长强穴可降低大鼠海马CA1区神经元中的NeuN含量及LC3-Ⅱ蛋白表达,抑制海马CA1区损伤后的神经元自噬,减轻脑损伤,从而改善HIBD大鼠神经功能。

通窍活血汤调节Nrf2通路对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤血管保护及神经功能改善作用研究

[目的]研究通窍活血汤对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤血管保护和神经功能改善作用及对核转录因子2(Nrf2)通路的调节作用。[方法]新生大鼠随机分为正常对照组(12只)及造模组(60只),采用颈总动脉结扎法建立缺血缺氧性脑损伤大鼠模型,并随机分为脑损伤组、通窍活血汤低、中、高剂量组及神经节苷脂组,每组12只,通窍活血汤低、中、高剂量组分别按照4、8、16 g/kg的剂量灌胃给予通窍活血汤,神经节苷脂组按照10 mg/kg的剂量腹腔注射神经节苷脂,每日1次,连续14 d,Morris水迷宫实验测定大鼠90 s内靶象限停留时间及穿越平台次数,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清可溶性内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)、可溶性血栓调节蛋白(sTM)、内皮素(ET)-1含量、血管组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及肿瘤坏死因子(TNF)-α表达水平、脑组织TNF-α、白介素(IL)-1β及IL-6表达水平,苏木精-伊红(HE)染色法测定海马组织病理学改变,实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定海马组织Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)、Janus激酶2(JAK2)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)m RNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定海马组织Nrf2、HO-1、JAK2、STAT3蛋白表达水平。[结果]与正常对照组比较,脑损伤组大鼠靶象限停留时间及穿越平台次数显著减少(P<0.05)。血管组织SOD表达水平,海马组织Nrf2、HO-1 m RNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。血清sEPCR、sTM、ET-1含量、血管组织MDA及TNF-α表达水平、脑组织TNF-α、IL-1β及IL-6水平、海马组织JAK2、STAT3 mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.05)。与脑损伤组比较,通窍活血汤低、中、高剂量组及神经节苷脂组大鼠脑损伤组大鼠靶象限停留时间及穿越平台次数显著增加(P<0.05)。血管组织SOD表达水平、海马组织Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。血清s EPCR、sTM、ET-1含量、血管组织MDA及TNF-α表达水平、脑组织TNF-α、IL-1β及IL-6表达水平、海马组织JAK2、STAT3 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05),且通窍活血汤不同剂量组间存在显著差异(P<0.05)。[结论]通窍活血汤能够显著抑制缺血缺氧性脑损伤大鼠神经损伤及脑组织炎症反应,抑制血管氧化应激损伤,发挥脑组织及血管的保护作用,其机制可能与调节Nrf2通路有关。

天麻素对大鼠分娩镇痛及新生鼠缺血、缺氧性脑损伤的影响及相关机制

目的探讨天麻素(gastrodin,GAS)对大鼠分娩镇痛及新生鼠缺血、缺氧性脑损伤的影响及可能的作用机制。方法将60只妊娠大鼠随机分为空白组、GAS低剂量组、GAS中剂量组、GAS高剂量组和阳性对照组,各12只。产程开始后GAS低剂量组、GAS中剂量组和GAS高剂量组分别腹腔注射50、100、150 mg·kg^(−1) GAS注射液(用生理盐水配制),阳性对照组尾静脉注射盐酸瑞芬太尼5μg·kg^(−1),空白组给予等量生理盐水。用热水甩尾法测定大鼠分娩痛阈值;用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的水平;用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,RTqPCR)和蛋白印迹法(Western blotting)检测大鼠脊髓组织中核因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化核因子-κB p65(p-NF-κB p65)、NOD样受体蛋白3(NOD like receptor protein 3,NLRP3)mRNA和蛋白表达的情况;用Morris水迷宫实验评定各组新生鼠的学习记忆能力;测定各组新生鼠脑组织的含水量;用HE染色观察各组新生鼠海马组织CA1区的病理变化。结果与空白组比较,GAS高、中、低剂量组和阳性对照组大鼠痛阈值、新生鼠跨台次数升高,TNF-α、IL-1β、IL-6、p-NF-κB p65蛋白表达、NF-κB p65 mRNA表达、NLRP3 mRNA和蛋白表达水平、新生鼠逃避潜伏期和脑组织含水量均明显降低(P<0.05)。与GAS低剂量组比较,GAS中剂量组、GAS高剂量组和阳性对照组的TNF-α、IL-1β、IL-6、p-NF-κB p65蛋白表达、NF-κB p65 mRNA表达、NLRP3 mRNA和蛋白表达水平、新生鼠逃避潜伏期和脑组织含水量均明显降低(P<0.05)。与GAS中剂量组比较,GAS高剂量组和阳性对照组TNF-α、IL-1β、IL-6、p-NF-κB p65蛋白表达、NF-κB p65 mRNA表达、NLRP3 mRNA和蛋白表达水平、新生鼠逃避潜伏期和脑组织含水量也明显降低(P<0.05),而GAS高剂量组与阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论GAS能够降低分娩大鼠产程中对疼痛的敏感度,减少促炎因子表达,改善神经炎症,缓解新生鼠脑损伤,可能是通过抑制NFκB/NLRP3信号通路发挥作用的。

基于Nrf2/Gpx4通路研究右美托咪定对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠铁死亡及神经功能的影响

目的基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)信号通路,研究右美托咪定(DEX)对缺血缺氧性脑损伤(HIBD)新生大鼠铁死亡及神经功能的影响。方法构建HIBD新生大鼠模型,随机分为模型组、DEX(100μg/kg)组、DEX(100μg/kg)+抑制剂(Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇2 mg/kg)组,每组12只,另取12只新生大鼠作为对照组。对照组和模型组腹腔注射相同体积的0.9%氯化钠溶液。大鼠神经功能缺损程度评分(NDS)评价大鼠神经功能;氨基酸自动分析仪检测海马组织中谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)水平;尼氏(Nissl)染色检测海马区神经元形态;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测海马组织中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量;试剂盒检测海马组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、铁含量;蛋白免疫印迹检测海马组织中Nrf2、HO-1、Gpx4、胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白(xCT)表达情况。结果与对照组比较,模型组海马区神经元形态异常,腹侧神经元轴突长短不一且排布不整齐,部分神经元呈背侧脱离趋势,NDS评分、海马组织中Glu、IL-6、TNF-α、NSE、MDA、铁含量升高(P<0.05),GABA、GSH含量及Nrf2、HO-1、Gpx4、xCT蛋白水平降低(P<0.05);与模型组比较,DEX组海马区神经元形态相对饱满,腹侧神经元轴突较整齐,NDS评分、海马组织中Glu、IL-6、TNF-α、NSE、MDA、铁含量降低(P<0.05),GABA、GSH含量及Nrf2、HO-1、Gpx4、xCT蛋白水平升高(P<0.05);Nrf2抑制剂可减轻DEX对HIBD新生大鼠神经损伤的改善作用(P<0.05)。结论DEX能够激活Nrf2/Gpx4通路,抑制铁死亡,改善HIBD新生大鼠神经损伤。

枸杞多糖缓解新生大鼠缺血缺氧性脑损伤的作用机制研究

目的:探讨枸杞多糖(LBP)缓解新生大鼠缺血缺氧性脑损伤(HIBD)的作用机制。方法:选取100只SD新生大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、模型组(HIBD组)及LBP低剂量组(HIBD+L-LBP组)、中剂量组(HIBD+M-LBP组)、高剂量组(HIBD+H-LBP组),每组20只。Sham组大鼠只进行创伤处理;HIBD组采用Rice-Vannucci方法建立大鼠HIBD模型;LBP处理组建立大鼠HIBD模型后,再用10、20、40 mg/kg的LBP进行药物处理。为观察高剂量LBP对LPS激活Toll样受体4(TLR4)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路后相关蛋白表达、氧化应激和炎性因子的影响,建立大鼠HIBD模型后,用脂多糖(LPS)激活TLR4/STAT3通路(HIBD+LPS组),再用40 mg/kg的LBP进行处理(HIBD+LPS+H-LBP组)。通过苏木精-伊红(HE)染色和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测大鼠损伤脑组织凋亡情况;检测各组大鼠脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-1β、IL-18、IL-6水平;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测Bcl-2、Bax蛋白以及TLR4/STAT3通路相关蛋白表达。结果:与Sham组比较,HIBD组脑组织细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与HIBD组比较,LBP各剂量组脑组织细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。与Sham组比较,HIBD组脑组织SOD水平降低,MDA、LDH、IL-1β、IL-18、IL-6水平明显升高(P<0.05);与HIBD组比较,LBP各剂量组SOD水平升高,MDA、LDH、IL-1β、IL-18、IL-6水平明显降低(P<0.05)。与Sham组比较,HIBD组脑组织TLR4/STAT3通路相关蛋白表达明显升高(P<0.05);与HIBD组比较,LBP各剂量组TLR4/STAT3通路相关蛋白表达明显降低(P<0.05)。与HIBD组比较,HIBD+LPS组脑组织TLR4/STAT3通路相关蛋白表达明显升高(P<0.05);与HIBD+LPS组比较,HIBD+LPS+H-LBP组TLR4/STAT3通路相关蛋白表达明显降低(P<0.05)。与HIBD组比较,HIBD+LPS组脑组织氧化应激程度和炎性因子水平明显升高(P<0.05);与HIBD+LPS组比较,HIBD+LPS+H-LBP组氧化应激程度和炎性因子水平明显降低(P<0.05)。结论:LBP通过抑制TLR4/STAT3通路减轻新生大鼠HIBD。

急性颅高压缺血缺氧性脑损伤致脑死亡CTA二例并文献复习

急性颅高压缺血缺氧性脑损伤属急性神经重症,需准确地对脑损伤程度进行判定和及时救治,易进展为脑死亡,CTA是临床中评估脑血管形态和脑血流变化的重要依据。本文报告2例应用CTA成像技术显示颅内供血情况改变的急性颅高压缺血缺氧性脑损伤且满足临床脑死亡评估标准的患者临床资料,并分别在中国知网和PubMed上以“急性颅高压”“急性脑损伤”“缺血缺氧性脑损伤”“脑死亡”“CTA”和“Acute intracranial hypertension”“Acute brain injury”“Hypoxicischemic brain injury”“Brain death”“CTA”为关键词进行文献检索和讨论,以期为该类患者病情的临床诊断和治疗提供参考。

杜鹃花总黄酮通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用

目的探索杜鹃花总黄酮(TFR)通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3信号通路保护脑缺血再灌注(I/R)损伤的机制。方法采用大脑中动脉闭塞术(MCAO)建立大鼠I/R模型,将造模成功大鼠随机分为假手术(Sham)、脑缺血再灌注(MCAO)和脑缺血再灌注术后TFR 200 mg/kg干预(TFR 200 mg/kg)组,制备MCAO大鼠模型,在脑缺血再灌注损伤手术后,TFR 200 mg/kg组连续14 d给予TFR(200 mg/kg)药物溶液。术后14 d,依据大鼠神经功能评分,脑血流图观察脑血流情况,处死大鼠,苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织细胞形态学变化,试剂盒检测大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH或LD)和神经特异性烯醇化酶(NSE)两种酶活性;ELISA试剂盒检测白细胞介素-1(IL-1)和IL-6水平,Western blot和免疫组化同时检测大鼠脑组织中裂解型胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、caspase-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白的表达水平。结果脑缺血再灌注处理后,MCAO导致了大鼠神经功能异常,神经功能评分指数显著升高,脑组织病理形态学和脑血流量变化明显,脑组织中cleaved caspase-3、caspase-8、TNF-α蛋白的表达水平显著增加,血清中LDH、NSE、IL-1、IL-6水平明显升高;TFR 200 mg/kg组大鼠神经功能评分明显降低,脑组织病理损伤显著改善,脑组织中cleaved caspase-3、caspase-8、TNF-α蛋白的表达以及血清中LDH、NSE、IL-1、IL-6水平降低。结论TFR可能通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3信号通路减轻脑缺血缺氧性损伤。

EPO对窒息诱导新生大鼠脑损伤和CoCl_(2)诱导人脑胶质瘤细胞系U251缺氧的改善作用

目的观察促红细胞生成素(EPO)对窒息诱导新生大鼠脑损伤和CoCl_(2)诱导人脑胶质瘤细胞系U251缺氧的改善作用。方法①7日龄SPF级新生Wistar大鼠随机分为对照组、窒息组、EPO组,每组22只。窒息组和EPO组新生大鼠采用常压窒息法构建脑损伤模型。EPO组脑损伤模型大鼠腹腔注射5000 IU/(kg•d)的EPO,连续注射14 d;窒息组脑损伤模型大鼠注射等体积的生理盐水,连续注射14 d;对照组不注射生理盐水和EPO。每组取10只大鼠,采用Morris水迷宫实验观察各组新生大鼠空间记忆能力,包括逃避潜伏期、上台前游泳路程、90 s内穿越原平台次数、平台内运动距离、平台滞留时间、穿越有效区域次数、有效区域内运动距离和有效区域内滞留时间。采用旷场实验观察各组新生大鼠自主运动能力,包括运动总路程、中央区域路程和平均速度。每组取6只大鼠,连续干预第3天和第7天时断头处死,取大鼠大脑称重并计算脑组织含水量,采用速率法检测血清脑损伤标志物乳酸脱氢酶(LDH)。②人脑胶质瘤细胞系U251分为空白对照组、CoCl_(2)组、EPO组,CoCl_(2)组加入CoCl_(2)制备缺氧模型,EPO组加入CoCl_(2)和EPO,空白对照组加入等量培养液,继续培养24 h。采用CCK-8法测算各组细胞存活率,采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率,采用比色法测算各组细胞上清液LDH。结果①与对照组比较,窒息组新生大鼠的逃避潜伏期、上台前游泳路程、干预第3天和第7天脑组织含水量及血清LDH水平显著升高(P均<0.05);与窒息组相比,EPO组新生大鼠的逃避潜伏期、上台前游泳路程、干预第3天和第7天脑组织含水量及血清LDH水平显著降低(P均<0.05)。与对照组比较,窒息组新生大鼠90 s内穿越原平台次数、平台内运动距离、平台滞留时间、穿越有效区域次数、有效区域内运动距离、有效区域内滞留时间、运动总路程、中央区域路程、平均速度均显著降低(P均<0.05);与窒息组相比,EPO组新生大鼠90 s内穿越原平台次数、平台内运动距离、平台滞留时间、穿越有效区域次数、有效区域内运动距离、有效区域内滞留时间、运动总路程、中央区域路程、平均速度均显著升高(P均<0.05)。②EPO组细胞存活率高于CoCl_(2)组(P<0.05),细胞凋亡率、细胞上清液LDH水平均低于CoCl_(2)组(P均<0.05)。结论EPO能够改善窒息后脑损伤大鼠的空间记忆能力、自主运动能力和脑水肿程度,改善脑损伤。EPO能够升高CoCl_(2)诱导的缺氧U251细胞存活率,降低细胞凋亡率和细胞上清液LDH水平。

右美托咪定对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠脑组织中TNF-α、IL-1β、NGF、BDNF表达的影响

目的观察右美托咪定对缺血缺氧性脑损伤(HIBD)新生大鼠皮层和海马组织中损伤因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及抗损伤因子神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,初步探讨右美托咪定的神经保护机制。方法将45只7日龄SD大鼠,随机分为3组:假手术组,缺血缺氧组和右美托咪定组。缺血缺氧组和右美托咪定组新生大鼠建立HIBD动物模型,假手术组仅分离左侧颈总动脉,不结扎也不做缺氧处理。右美托咪定组于建立模型后立即按100μg/kg腹腔注射右美托咪定,假手术组和缺血缺氧组注射等量生理盐水。24 h后全部处死,采用ELISA法检测脑组织中TNF-α、IL-1β、NGF、BDNF水平。结果缺血缺氧组新生大鼠皮层和海马组织中TNF-α、IL-1β、NGF、BDNF水平高于假手术组;右美托咪定组的TNF-α、IL-1β水平低于缺血缺氧组,而NGF、BDN水平则高于缺血缺氧组,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论右美托咪定可保护新生大鼠缺血缺氧后引起的皮层和海马损伤,其作用机制可能与抑制损伤因子TNF-α、IL-1β表达和促进抗损伤因子NGF、BDNF表达相关。

新生儿呼吸暂停与缺氧性脑损伤关系的研究

目的 探讨新生儿反复呼吸暂停与缺氧性脑损伤的关系。方法 对 78例反复呼吸暂停新生儿进行头颅CT扫描 ,其中足月儿 2 8例 ,早产儿 5 0例。观察缺氧性脑损伤的发生情况。结果 蛛网膜下腔出血 (SAH)2 5例 ,脑室内出血 (IVH) 10例 ,缺氧缺血性脑病 (HIE) 6例 ,HIE +SAH 8例 ,总阳性率为 6 2 .8%。早产儿组阳性率为 74% ,以颅内出血为主 ,足月儿组阳性率为 42 .8% ,以HIE及SAH为主。早产儿组与足月儿组比较差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。结论 新生儿反复呼吸暂停 ,是新生儿出生后缺氧性脑损伤的早期表现之一。对此类新生儿尤其是早产儿进行头颅CT扫描 ,有助于脑损伤的早期诊断与治疗。

佛司可林通过TLR4/STAT3通路对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤氧自由基水平和炎症反应的调节作用

目的研究佛司可林(Forskolin,FS)通过TLR4/STAT3通路对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤氧(HIBD)自由基水平和炎症反应的调节作用。方法将75只7日龄SD大鼠15只/组随机分为假手术组、模型组、佛司可林低、中、高剂量治疗组,其中模型组和模型加药组采用Rice-Vannucci方法建立HIBD模型,假手术组只做创伤不作处理。术后第1天模型加药组大鼠分别接受不同剂量剂量的佛司可林腹腔注射;模型组与假手术组腹腔注射等体积量的生理盐水,1次/d注射7 d。ELISA检测各组大鼠血清中炎症因子水平;HE染色和凋亡TUNEL染色进行脑组织病理学分析;商业试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;免疫组化分析细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达;Western blot分析脑组织中STAT3、TLR4、NF-κB p65、TNF-α、cleaved-caspase-3/9的表达。通过尾静脉注射0.4 mg/kg脂多糖(LPS)激活TLR4通路后,再注射佛司可林分析对HIBD大鼠炎症因子、氧化应激指标及TLR4/STAT3通路蛋白的表达影响。结果与模型组相比,佛司可林治疗后,大鼠的脑组织损伤显著改善,凋亡细胞比例明显降低(P<0.05);同时脑组织液中MDA和LDH的水平明显降低,SOD含量显著上升,ICAM-1的表达和炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β的释放明显受到抑制(P<0.05)。Western blot结果显示,随着佛司可林剂量增加,p-STAT3、TLR4、p-p65和TNF-α表达量显著降低(P<0.05)。此外佛司可林能够抑制LSP激活TLR4通路后p-STAT3、TLR4、pp65和TNF-α的表达,降低脑组织中IL-6的释放,提升SOD的水平含量(P<0.05)。结论佛司可林能够通过TLR4/STAT3通路改善新生大鼠缺血缺氧性脑损伤,降低氧自由基水平和抑制炎症反应。

头针结合艾灸对缺血缺氧性脑损伤幼鼠学习记忆能力及脑内BDNF的影响

目的观察头针结合艾灸对脑瘫幼鼠学习记忆能力的作用以及对脑源性神经生长因子(BDNF)的影响。方法 7日龄清洁级新生SD幼鼠7窝共40只,随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、头针组(C组)、艾灸组(D组)和头针结合艾灸组(E组),造模成功后,采用头针、艾灸治疗2周后,对幼鼠的运动功能进行评价,行为学观察各组幼鼠Y迷宫实验结果;术后18 d通过免疫组化法检测大脑皮质BDNF阳性表达结果。结果假手术组Y迷宫实验耗时和BDNF阳性表达结果均低于模型组;各治疗组之间比较,Y迷宫实验结果头针结合艾灸组(67.71±7.60)优于头针组(74.73±8.06)(P=0.39<0.05)和艾灸组(81.18±10.1)(P=0.00<0.01);BDNF阳性表达结果头针结合艾灸组(20.46±2.03)与头针组(18.95±1.62)相比,P=0.43<0.05。结论治疗组均能改善幼鼠的学习记忆能力和提高BDNF阳性表达结果,以头针结合艾灸组效果最好;头针结合艾灸治疗可以提高BDNF水平的表达并发挥其生物活性,从而促进神经功能缺损的恢复,改善学习记忆能力。

异氟醚后处理对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤的保护作用

目的探讨不同浓度异氟醚后处理对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤的影响。方法 7 d龄新生SD大鼠125只随机分为5组(n=25):假手术组(Ⅰ组)、脑缺血缺氧组(Ⅱ组)、1%异氟醚后处理组(Ⅲ组)、1.5%异氟醚后处理组(Ⅳ组)和2%异氟醚后处理组(Ⅴ组)。除Ⅰ组外,其余各组均行左颈总动脉结扎和8%低氧2 h处理,制成新生大鼠缺血缺氧性脑损伤模型。Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组脑损伤后即刻分别吸入1%、1.5%和2%异氟醚30 min。于脑损伤后7 d测各组新生鼠的左右大脑半球质量,并行脑组织损伤病理检测。结果与Ⅰ组相比,其余4组的左/右大脑半球质量比及丘脑腹后内侧核和后扣带回皮层左/右侧神经元密度的比值降低(P<0.05);与Ⅱ组相比,Ⅳ和Ⅴ组左/右大脑半球质量比及丘脑腹后内侧核和后扣带回皮层左/右侧神经元密度比降低的程度减轻(P<0.05)。结论 1.5%和2%异氟醚后处理能够减轻新生大鼠缺血缺氧性脑损伤程度。

珍宝丸预处理对新生大鼠缺氧性脑损伤Fas和Fas L影响的实验研究

目的:探讨珍宝丸预处理对新生大鼠缺氧性脑损伤Fas和Fas L蛋白表达的影响。方法:取新生7 d Wistar大鼠200只,雌雄不限,随机分成5组(n=40):正常对照组、模型缺氧1 h组(Ⅰm-12 h、Ⅰm-24 h、Ⅰm-48 h、Ⅰm-72 h)、模型缺氧4h组(Ⅳm-12 h、Ⅳm-24 h、Ⅳm-48 h、Ⅳm-72 h)、珍宝丸缺氧1 h治疗组(ⅠT-14 h、ⅠT-24 h、ⅠT-48 h、ⅠT-72 h)、珍宝丸缺氧4 h治疗组(ⅣT-14 h、ⅣT-24 h、ⅣT-48 h、ⅣT-72 h)。将新生Wistar大鼠置于8%O2+92%N2(V/V)的缺氧箱内建立新生鼠缺氧模型。在造模前每日一次连续7 d灌胃给予生理盐水和珍宝丸,缺氧期间也同样剂量给药,分别于缺氧后12、24、48、72 h处死动物取血及脑组织待测。采用ELISA法检测大鼠血清及脑组织悬液中Fas和Fas L的蛋白含量;采用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑组织中Fas和Fas L蛋白的阳性表达。结果:与正常对照组比较,其他四组Fas和Fas L蛋白含量、蛋白的阳性表达均在缺氧后12 h时间点明显增高,且在24 h时间点达高峰,有统计学意义(P<0.01),模型组在各时间点上明显高于治疗组;模型组在48、72 h时间点Fas和Fas L表达低于12 h时间点,但仍明显高于正常对照组(P<0.01);珍宝丸治疗组在48、72 h时间点Fas和Fas L表达低于12 h时间点,但仍高于正常对照组(P<0.05)。结论:珍宝丸可通过下调缺氧性脑损伤大鼠Fas和Fas L的蛋白含量、蛋白的阳性表达强度,从而对缺氧性脑损伤具有一定的保护作用。

氦氖激光对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤后海马齿状回细胞增殖的影响

目的:氦氖激光照射致新生大鼠缺血缺氧性脑损伤(hypoxia-ischemiabraindamage,HIBD),观察其对海马齿状回细胞增殖的影响,为临床治疗HIBD提供新思路。方法:7d健康Wistar大鼠56只随机分为假手术组,缺血缺氧组,缺血缺氧激光非穴位照射组,缺血缺氧激光穴位照射组。常规苏木精-伊红、Nissl染色以及采用抗Brdu抗体进行免疫组织化学染色。结果:激光穴位照射组与其他组相比海马神经元变性坏死减轻,胞体内Nissl体丢失较少,海马齿状回Brdu标记阳性细胞的表达量明显增加24.06±3.55,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:激光穴位照射对海马神经元有保护作用,促进了海马齿状回细胞的增殖。

成年大鼠缺氧性脑损伤后亚临床痫性发作及海马苔藓纤维出芽

目的探讨缺氧性脑损伤后亚临床痫性发作的病理生理机制。方法采用成年雄性SD大鼠,充以8%氧氮混合气体缺氧后,监测大鼠脑电活动,检测海马组织苔藓纤维出芽(mossy fiber sprouting,MFS)的变化。结果大鼠缺氧损伤后痫样放电的发生率为19.67%,亚临床痫性发作组缺氧后7d海马CA3区下锥体细胞层棕黑色颗粒逐渐增多:14d呈束状、斑片状颗粒沉积;28d呈现明显颗粒沉积条带,亚临床痫性发作组海马CA3区苔藓纤维出芽评分明显高于非亚临床痫性发作组和对照组,而3组齿状回(dentate gyrus;DG)内分子层苔藓纤维出芽评分无差异(P>0.05)。结论成年大鼠缺氧性脑损害后可出现痫样放电并在海马CA3区形成苔藓纤维出芽,而海马CA3区苔藓纤维出芽可能与缺氧性脑损伤后痫性发作有关。

银杏叶提取物对新生鼠缺血缺氧性脑损伤NSE S-100 mRNA表达的影响

目的 研究银杏叶提取物 (GbE)对新生鼠缺血缺氧性脑损伤 (HIBD)后脑组织神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、S 10 0蛋白 (S 10 0 )mRNA表达的影响 ,以探讨GbE抗脑缺血缺氧的药理作用机制。方法 90只 7dSD大鼠随机分成 3组 ,建立HIBD模型后 ,用RT PCR技术观察脑组织NSE、S 10 0mRNA的动态变化及GbE对其表达的影响。结果 脑组织NSEmRNA的表达在HIBD后 2 4h达高峰 ,脑组织S 10 0mRNA的表达在HIBD后 48h达高峰 ,高于假手术对照组 (P <0 0 1)。以后逐渐下降 ,至 96h仍未降至正常。腹腔注射GbE 2 4、48、72h能增加脑组织NSE、S 10 0mRNA表达的量 (P <0 0 1)。结论 GbE通过增加脑组织NSE、S 10 0mRNA的表达改变能量代谢及细胞内Ca2 +

钙在嗜铬细胞瘤细胞缺氧性脑损伤中的作用研究

目的观察缺氧后大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞内游离钙的浓度(犤Ca2+犦i)、环磷酸腺苷(cAMP)、钙调蛋白(CaM)和钙调蛋白激酶II(Ca2+/CaM-PKII)的变化。方法采用放免技术,从细胞水平进一步观察缺氧对PC12细胞的毒性、细胞内犤Ca2+犦i变化,cAMP、CaM和Ca2+/CaM-PKII的变化。结果缺氧组PC12细胞cAMP、CaM含量在缺氧后24h明显高于正常对照组;Ca2+/CaM-PKII活性明显低于正常对照组。结论犤Ca2+犦i、cAMP、CaM和Ca2+/CaM-PKII在缺氧PC12细胞损伤机制中起了重要的作用。

缺氧性脑损伤对大鼠癫痫敏感性和脑内PSD-95表达的影响

目的探讨缺氧性脑损伤后癫痫发作敏感性及其与PSD-95的关系。方法采用成年雄性SD大鼠,以8%氧氮混合气体建立大鼠缺氧性脑损伤模型,腹腔注射戊四唑(pentylenetetrazol,PTZ)10mg/(kg.5min)和35mg/(kg.2d)点燃大鼠,检测其癫痫敏感性的改变。分别用免疫组织化学和免疫印迹方法观察大鼠颞叶皮层、海马和中脑神经元脱失的病理学改变以及脑内PSD-95表达的变化。结果缺氧损伤后大鼠癫痫敏感性明显增强。缺氧大鼠和缺氧后PTZ致痫大鼠海马CA1区、颞叶皮层和中脑神经元不同程度的脱失,缺氧大鼠脑内PSD-95表达明显降低。结论成年大鼠缺氧性脑损害后癫痫敏感性增强,可能与神经元脱失以及脑内PSD-95表达变化有关。