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人脑胶质瘤细胞株体外诱导分化相关基因的初步研究 被引量:4
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作者 黄强 孙立军 +3 位作者 董军 李晓楠 王爱东 兰青 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第7期673-679,共7页
背景与目的:我们先前的研究已经证明,在诱导分化剂作用下,胶质瘤胞由分化不良向分化良好方向演进,但该效应的分子机制不明。本研究旨在建立质瘤细胞诱导分化的相关基因表达谱并克隆新基因,为进一步阐明产生该效应的子机制提供基因信息... 背景与目的:我们先前的研究已经证明,在诱导分化剂作用下,胶质瘤胞由分化不良向分化良好方向演进,但该效应的分子机制不明。本研究旨在建立质瘤细胞诱导分化的相关基因表达谱并克隆新基因,为进一步阐明产生该效应的子机制提供基因信息。方法:采用MTT法、软琼脂克隆形成率检测、细胞形态学观察、流式细胞术、胶质纤维酸性蛋白免疫荧光检测等方法,确定诱导分化剂对低分人脑胶质瘤细胞株SHG-44-9的分化效应;用cDNA微阵列技术检测诱导分化前后的基因表达变化;用随机引物差异显示PCR克隆相关基因,并以反Northern杂交验证,再与GenBank比对分析相关基因信息。结果:1.75mmol/L的苯丁酸钠能显著抑制SHG-44-9胶质瘤细胞的生长,并促其向良性方向分化。在含18000个人cDNA的芯片中发现、并经反Northern杂交验证,有98个基因的表达发生显著变化,并克隆12个与分化有关的基因,其中调控c-myc表达的MIBP1基因可能为调控胶质瘤细胞分化的基因。结论:本研究发现的98个与分化相关的基因和克隆的12个基因,有助于进一步研究胶质瘤细胞分化的分子机制和发现新的基因治疗靶点。 展开更多
关键词 脑胶质瘤细胞株 体外 诱导分化 基因 细胞形态学 流式细胞
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牛蒡子苷元对大鼠脑胶质瘤细胞增殖及其瘤体生长的抑制作用 被引量:3
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作者 张朝巍 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第21期41-43,共3页
目的观察牛蒡子苷元(ARG)对大鼠脑胶质瘤细胞株C6增殖及其瘤体生长的抑制作用。方法常规培养C6细胞,分别加入不同浓度0.1、0.3、1.0、3、10、30、100、300μmol/L的ARG作用48 h,采用MTT法测算细胞增殖抑制率及ARG的半数抑制浓度(IC_(50)... 目的观察牛蒡子苷元(ARG)对大鼠脑胶质瘤细胞株C6增殖及其瘤体生长的抑制作用。方法常规培养C6细胞,分别加入不同浓度0.1、0.3、1.0、3、10、30、100、300μmol/L的ARG作用48 h,采用MTT法测算细胞增殖抑制率及ARG的半数抑制浓度(IC_(50))。将C6细胞悬液注入SD大鼠脑组织制备脑胶质瘤模型,将模型随机分为ARG低、高剂量组及替莫唑胺(TMZ)组和对照组;ARG低、高剂量组于C6细胞移植后第2天分别给予0.1、0.3 mg/kg ARG皮下注射,1次/d,连续给药16 d;TMZ组于C6细胞移植后第5天给予20 mg/kg TMZ灌胃,1次/d,连续给药5 d;对照组给予相应的溶媒。C6细胞移植后第17天测算脑胶质瘤体积及抑瘤率;取小鼠肿瘤组织,HE染色后观察肿瘤病理形态;计算小鼠脾脏指数、胸腺指数并进行外周血常规检查。结果 0.1、0.3、1.0、3、10、30、100、300μmol/L的ARG对C6细胞的增殖抑制率分别为19.2%、32.6%、47.5%、43.1%、42.8%、48.0%、57.4%、84.4%,药物浓度越高细胞增殖抑制率越高(P<0.05);ARG的IC_(50)为67.8μmol/L。ARG低剂量组、ARG高剂量组、TMZ组脑胶质瘤体积与对照组比较,P均<0.05;ARG低剂量组抑瘤率与ARG高剂量组比较,P<0.05。对照组大鼠肿瘤细胞布满整个视野,呈浸润性增长;ARG低、高剂量组肿瘤细胞排列致密程度较对照组稀疏,与TMZ组一致。ARG低、高剂量组胸腺指数、血小板计数及血小板压积与TMZ组比较,P均<0.05。结论牛蒡子苷元可抑制大鼠脑胶质瘤细胞增殖及其瘤体生长,且对机体免疫器官及血小板水平无明显不良影响。 展开更多
关键词 胶质 牛蒡子苷元 脑胶质瘤细胞株C6 大鼠
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白藜芦醇联合硫化氢体外诱导U251脑胶质瘤细胞凋亡作用研究
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作者 黄剑 陈喜德 蔡学坚 《中国农村卫生》 2013年第03Z期5-6,共2页
目的探讨白藜芦醇联合体外诱导U251脑胶质瘤细胞凋亡作用。方法采用四甲基偶氮唑兰(MTT)还原检测法检测白藜芦醇联合硫化氢对u251脑胶质瘤细胞生长。结果用白藜芦醇联合处理细胞24小时后,诱导了细胞凋亡和调节细胞周期,凋亡率与对... 目的探讨白藜芦醇联合体外诱导U251脑胶质瘤细胞凋亡作用。方法采用四甲基偶氮唑兰(MTT)还原检测法检测白藜芦醇联合硫化氢对u251脑胶质瘤细胞生长。结果用白藜芦醇联合处理细胞24小时后,诱导了细胞凋亡和调节细胞周期,凋亡率与对照组比较明显升高(P〈O.05)。结论白藜芦醇联合硫化氢能抑U251脑胶质瘤细胞生长,其机制可能是通过诱导凋亡来发挥作用的。 展开更多
关键词 白藜芦醇 硫化氢 联合 U251脑胶质瘤细胞株 凋亡
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枸杞多糖对实验性脑胶质瘤大鼠免疫功能的影响 被引量:9
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作者 单铁英 潘秀兰 +7 位作者 董静 赵沙河 王鸣飞 韩艳珍 刘凤丽 袁征 郑海萍 李桂英 《广东医学》 CAS 北大核心 2015年第23期3601-3603,共3页
目的探讨枸杞多糖(LBP)对C6脑胶质瘤细胞株诱导的脑胶质瘤大鼠免疫功能的影响。方法将40只大鼠随机分为正常对照组、模型组、LBP组和顺铂组,每组10只。除正常对照组外,其余各组均制备大鼠脑胶质瘤动物模型。LBP组用LBP灌胃1次/d,顺铂组... 目的探讨枸杞多糖(LBP)对C6脑胶质瘤细胞株诱导的脑胶质瘤大鼠免疫功能的影响。方法将40只大鼠随机分为正常对照组、模型组、LBP组和顺铂组,每组10只。除正常对照组外,其余各组均制备大鼠脑胶质瘤动物模型。LBP组用LBP灌胃1次/d,顺铂组用顺铂灌胃1次/d,正常对照组和模型组用生理盐水灌胃1次/d,治疗时间共16周。ELISA法检测各组大鼠血清细胞因子中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的水平;用流式细胞术检测各组大鼠外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞(Tr)和CD8^+T细胞数量。结果与正常对照组相比,模型组大鼠外周血CD4^+CD25^+Tr数量增加而CD8^+T细胞的数量减少,血清IL-10水平增加而TNF-α水平降低(P<0.05);与模型组比较,LBP组和顺铂组大鼠外周血CD4^+CD25^+Tr数量减少而CD8^+T细胞数量增加,血清IL-10水平降低而TNF-α水平增加(P<0.05)。各组所测指标在8周与16周之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论脑胶质瘤大鼠免疫功能降低,而LBP可增强实验性脑胶质瘤大鼠免疫功能,从而达到抗肿瘤的作用。 展开更多
关键词 枸杞多糖 C6脑胶质瘤细胞株 胶质 大鼠
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蒿甲醚抗SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成的实验
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作者 伍治平 高诚伟 +4 位作者 吴永贵 朱启顺 王熙才 刘馨 刘淳 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期186-189,共4页
目的探讨蒿甲醚(Artemether)抗SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度蒿甲醚对大鼠C6脑胶质瘤细胞株的生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50)。采用立体定位仪在SD大鼠大脑皮质层接种C6脑胶质瘤细... 目的探讨蒿甲醚(Artemether)抗SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度蒿甲醚对大鼠C6脑胶质瘤细胞株的生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50)。采用立体定位仪在SD大鼠大脑皮质层接种C6脑胶质瘤细胞(1×106/μl)40只,雌、雄各半;随机分为5组,每组8只。在接种第3天后,各组采用灌胃给药法连续给药10天。于接种后的第20天解剖大鼠,经活体左心室灌注4%多聚甲醛,固定肿瘤的全脑标本。在大鼠脑部接种穿刺点做冠状切口,按垂直和水平方向测量肿瘤大小。肿瘤体积=a2bπ?6(a为肿瘤的短径,b为肿瘤的长径)。全脑标本用4%多聚甲醛固定,肿瘤组织做病理观察,免疫组化方法检测移植瘤组织微血管密度。结果各实验组血管计数分别为Ⅰ组(39±4),Ⅱ组(29±6),Ⅲ组(12±8),Ⅳ组(10±5),生理盐水组为(52±7)。各实验组血管计数均明显少于生理盐水对照组,差异有统计学意义(分别P<0.05,P<0.01)。各实验组SD大鼠原位脑胶质瘤体积较对照组显著减小。结论在一定剂量范围内,蒿甲醚具有明显抑制SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成作用;蒿甲醚抑制原位脑胶质瘤生长和转移的机制之一是透过血脑屏障抑制脑胶质瘤血管生成。 展开更多
关键词 蒿甲醚 SD大鼠C6脑胶质瘤细胞株 原位胶质 动物模型
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脑胶质瘤SHG-44细胞株受照后代辐射抗性的研究 被引量:1
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作者 周菊英 李莉 +4 位作者 周乐源 俞志英 秦颂兵 徐晓婷 王利利 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2008年第3期238-240,共3页
放射抗拒是目前脑胶质瘤治疗的一大障碍,阐明其原理就有可能设计出针对性的放疗方案,提高疗效。人们既往对胶质瘤进行辐射敏感性的研究时大都采用单株细胞或不同种系不同脑胶质瘤细胞株进行比较,这些方法为探讨其辐射抗拒的机制提供... 放射抗拒是目前脑胶质瘤治疗的一大障碍,阐明其原理就有可能设计出针对性的放疗方案,提高疗效。人们既往对胶质瘤进行辐射敏感性的研究时大都采用单株细胞或不同种系不同脑胶质瘤细胞株进行比较,这些方法为探讨其辐射抗拒的机制提供了不少信息。如果以同一来源不同放射敏感性的一对细胞为对象进行对照研究,将有更多优势。 展开更多
关键词 SHG-44细胞株 脑胶质瘤细胞株 辐射抗性 后代 辐射敏感性 放射敏感性 放射抗拒 放疗方案
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Ezrin基因敲低及过表达对脑胶质瘤细胞U87迁移的影响 被引量:3
7
作者 刘乃杰 秦治刚 +4 位作者 孙利波 金星一 叶保国 张金男 朱庆三 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第1期56-59,63,共5页
目的分析Ezrin基因敲低及过表达对脑胶质瘤细胞U87迁移的影响,以探讨脑胶质瘤浸润性生长的机理。方法从U87细胞中扩增Ezrin基因CDS区片段,克隆至表达载体pEGFP-C1中,构建Ezrin基因表达质粒pEGFP-C1/Ezrin。将pEGFP-C1/Ezrin、Ezrin基因s... 目的分析Ezrin基因敲低及过表达对脑胶质瘤细胞U87迁移的影响,以探讨脑胶质瘤浸润性生长的机理。方法从U87细胞中扩增Ezrin基因CDS区片段,克隆至表达载体pEGFP-C1中,构建Ezrin基因表达质粒pEGFP-C1/Ezrin。将pEGFP-C1/Ezrin、Ezrin基因shRNA质粒shRNA-Ezrin-2和pEGFP-C1以脂质体LipofectimineTM2000介导分别转染U87细胞,Western blot分析转染细胞中Ezrin蛋白的表达;划痕试验检测转染细胞的迁移情况。结果克隆的Ezrin基因与GenBank中登录的Homo sapiens ezrin(EZR),transcript variant 1,mRNA序列同源性达99%;该基因编码的氨基酸序列与ezrin[Homo sapiens](Sequence ID:ref|NP_003370.2|,Length:586)的一致性为99%,在第S66P、K258R、P265L和K577R位发生变异,读码框正确。pEGFP-C1/Ezrin转染的U87细胞中Ezrin蛋白的相对表达量(1.17)高于shRNA-Ezrin-2转染组(0.47)和pEGFP-C1转染组(0.82)。划痕试验显示,shRNA-Ezrin-2转染组有少量细胞迁移至划痕处,pEGFP-C1/Ezrin转染组细胞几乎占满划痕处。结论 Ezrin基因敲低可阻止U87细胞迁移,其过表达可促进细胞迁移,表明U87细胞浸润性生长与Ezrin基因的表达有关。 展开更多
关键词 EZRIN基因 脑胶质瘤细胞株 细胞迁移
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脑胶质瘤干细胞的培养和鉴定 被引量:2
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作者 冀保卫 田道锋 +3 位作者 陈谦学 易伟 吴立权 沈恒 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1525-1525,共1页
肿瘤干细胞和肿瘤的发生、进展和预后密切相关。我们应用脑胶质瘤细胞株U251,证实人脑胶质瘤干细胞的存在。
关键词 脑胶质瘤细胞株 胶质细胞 细胞 鉴定 养和 U251
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Lentiviral-mediated siRNA against osteopotin in U251 glioma cell line
9
作者 Xu Tao Chen Juxiang +5 位作者 Lu Yicheng Zhou Jinxu Yan Yong Hu Guohan Luo Chun Huang Yan 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2010年第1期1-10,共10页
Background. It has been reported that the expression of SPP1, the mRNA for osteopontin (OPN), is increased in anumber of transformed cell lines and some tumors. Increased serum and plasma OPN levels were associated ... Background. It has been reported that the expression of SPP1, the mRNA for osteopontin (OPN), is increased in anumber of transformed cell lines and some tumors. Increased serum and plasma OPN levels were associated with advanced-stage carcinomas of the lung, breast, colon and prostate. The extent of OPN expression may be correlated with the malignancy degree of gliomas, but the specific role of OPN in the malignancy of gliomas remains to be cla.rified, Methods: In this study, we used a lentiviral system, which could induce a long-lasting down-regulation of gene exprossion, to knock down the OPN gene in human glioma cell line U251. And then we observed the proliferation and apoptosis of glioma cells. Results: OPN mRNA and protein were successfully knocked down in U251 cells, and the expression of caspase-3 and caspase-9 were increased about by 2 folds in OPN down-regulated U251 cells. 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium (MTT) assay showed that OPN down-regulation did not affect the proliferation of U251 cells. Conclusion: Our findings indicate that OPN might play a role in apoptosis, but not in cell proliferation in U251 glioma cells. 展开更多
关键词 GLIOMA OSTEOPONTIN LENTIVIRUS RNA interference Caspase MTT
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