牛蒡子苷元对大鼠脑胶质瘤细胞增殖及其瘤体生长的抑制作用

目的观察牛蒡子苷元(ARG)对大鼠脑胶质瘤细胞株C6增殖及其瘤体生长的抑制作用。方法常规培养C6细胞,分别加入不同浓度0.1、0.3、1.0、3、10、30、100、300μmol/L的ARG作用48 h,采用MTT法测算细胞增殖抑制率及ARG的半数抑制浓度(IC_(50))。将C6细胞悬液注入SD大鼠脑组织制备脑胶质瘤模型,将模型随机分为ARG低、高剂量组及替莫唑胺(TMZ)组和对照组;ARG低、高剂量组于C6细胞移植后第2天分别给予0.1、0.3 mg/kg ARG皮下注射,1次/d,连续给药16 d;TMZ组于C6细胞移植后第5天给予20 mg/kg TMZ灌胃,1次/d,连续给药5 d;对照组给予相应的溶媒。C6细胞移植后第17天测算脑胶质瘤体积及抑瘤率;取小鼠肿瘤组织,HE染色后观察肿瘤病理形态;计算小鼠脾脏指数、胸腺指数并进行外周血常规检查。结果 0.1、0.3、1.0、3、10、30、100、300μmol/L的ARG对C6细胞的增殖抑制率分别为19.2%、32.6%、47.5%、43.1%、42.8%、48.0%、57.4%、84.4%,药物浓度越高细胞增殖抑制率越高(P<0.05);ARG的IC_(50)为67.8μmol/L。ARG低剂量组、ARG高剂量组、TMZ组脑胶质瘤体积与对照组比较,P均<0.05;ARG低剂量组抑瘤率与ARG高剂量组比较,P<0.05。对照组大鼠肿瘤细胞布满整个视野,呈浸润性增长;ARG低、高剂量组肿瘤细胞排列致密程度较对照组稀疏,与TMZ组一致。ARG低、高剂量组胸腺指数、血小板计数及血小板压积与TMZ组比较,P均<0.05。结论牛蒡子苷元可抑制大鼠脑胶质瘤细胞增殖及其瘤体生长,且对机体免疫器官及血小板水平无明显不良影响。

枸杞多糖对实验性脑胶质瘤大鼠免疫功能的影响

目的探讨枸杞多糖(LBP)对C6脑胶质瘤细胞株诱导的脑胶质瘤大鼠免疫功能的影响。方法将40只大鼠随机分为正常对照组、模型组、LBP组和顺铂组,每组10只。除正常对照组外,其余各组均制备大鼠脑胶质瘤动物模型。LBP组用LBP灌胃1次/d,顺铂组用顺铂灌胃1次/d,正常对照组和模型组用生理盐水灌胃1次/d,治疗时间共16周。ELISA法检测各组大鼠血清细胞因子中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)的水平;用流式细胞术检测各组大鼠外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞(Tr)和CD8^+T细胞数量。结果与正常对照组相比,模型组大鼠外周血CD4^+CD25^+Tr数量增加而CD8^+T细胞的数量减少,血清IL-10水平增加而TNF-α水平降低(P<0.05);与模型组比较,LBP组和顺铂组大鼠外周血CD4^+CD25^+Tr数量减少而CD8^+T细胞数量增加,血清IL-10水平降低而TNF-α水平增加(P<0.05)。各组所测指标在8周与16周之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论脑胶质瘤大鼠免疫功能降低,而LBP可增强实验性脑胶质瘤大鼠免疫功能,从而达到抗肿瘤的作用。

蒿甲醚抗SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成的实验

目的探讨蒿甲醚(Artemether)抗SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度蒿甲醚对大鼠C6脑胶质瘤细胞株的生长抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50)。采用立体定位仪在SD大鼠大脑皮质层接种C6脑胶质瘤细胞(1×106/μl)40只,雌、雄各半;随机分为5组,每组8只。在接种第3天后,各组采用灌胃给药法连续给药10天。于接种后的第20天解剖大鼠,经活体左心室灌注4%多聚甲醛,固定肿瘤的全脑标本。在大鼠脑部接种穿刺点做冠状切口,按垂直和水平方向测量肿瘤大小。肿瘤体积=a2bπ?6(a为肿瘤的短径,b为肿瘤的长径)。全脑标本用4%多聚甲醛固定,肿瘤组织做病理观察,免疫组化方法检测移植瘤组织微血管密度。结果各实验组血管计数分别为Ⅰ组(39±4),Ⅱ组(29±6),Ⅲ组(12±8),Ⅳ组(10±5),生理盐水组为(52±7)。各实验组血管计数均明显少于生理盐水对照组,差异有统计学意义(分别P<0.05,P<0.01)。各实验组SD大鼠原位脑胶质瘤体积较对照组显著减小。结论在一定剂量范围内,蒿甲醚具有明显抑制SD大鼠原位脑胶质瘤血管生成作用;蒿甲醚抑制原位脑胶质瘤生长和转移的机制之一是透过血脑屏障抑制脑胶质瘤血管生成。