脑脊液改良抗酸染色联合单核细胞内早期分泌抗原靶-6测定用于结核性脑膜炎早期诊断的研究

目的探寻结核性脑膜炎（TBM）早期诊断的新方法。方法选取徐州医科大学附属医院神经内科2013年5月-2015年2月收治的TBM患者38例及其他中枢神经系统感染患者38例。所有病例入院后24-48h内，腰椎穿刺脑脊液（CSF）并予常规检测，同时采用传统集菌法涂片抗酸染色检测结核分枝杆菌（MTB）、改良抗酸染色检测MTB、免疫细胞化学染色及酶联免疫吸附法（ELISA）测定早期分泌抗原靶-6（ESAT-6）。结果①改良抗酸染色检测MTB的灵敏度（Se）达71．1％，与传统抗酸染色（Se为2．6％）比较，差异有统计学意义（P=0．000）；改良抗酸染色图片中，单核细胞、中性粒细胞内见到MTB，同时淋巴细胞内也发现MTB；在同一样本中，MTB以短棒状、点状、球形及细长弯曲型等多种形态存在。②免疫细胞化学染色诊断TBM的Se为84．2％，Sp为89．5％；单核细胞表达ESAT-6最为常见，中性粒细胞、淋巴细胞内也存在ESAT-6表达现象。③CSF改良抗酸染色联合免疫细胞化学ESAT-6检测诊断TBM的Se为89．5％，与改良抗酸染色比较，差异有统计学意义（P=0．044）；联合检测的Sp为89．5％，与免疫细胞化学染色比较差异无统计学意义（P=0．169）。结论CSF改良抗酸染色联合单核细胞内ESAT-6测定可以提高诊断TBM的灵敏度。

脑脊液ESAT-6、ADA、INF-γ、MMP-9检测在结核性脑膜炎诊断及转归中的应用价值

目的探讨脑脊液分泌性靶抗原6(ESAT-6)、腺苷脱氨酶(ADA)、干扰素γ(INF-γ)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)检测在结核性脑膜炎(TBM)诊断及转归中的应用价值。方法回顾性分析185例TBM患者(TBM组)的临床资料,其中病情为轻症106例、重症79例,预后良好105例、不良80例,复发62例;同时,以96例进行脑脊液检查的非中枢系统疾病患者作为对照组。常规取脑脊液,ELISA法检测ESAT-6、INF-γ和MMP-9,酶动力学终点法检测ADA,分析各指标与TBM诊断及转归的关系。结果 TBM组脑脊液ESAT-6、ADA、INF-γ、MMP-9水平高于对照组(P均<0.05),并且重症者高于轻症者(P均<0.05)。四项指标联合检测诊断TBM的曲线下面积为0.829,高于各个指标单独检测(Z=8.126、9.113、7.596、0.138,P均<0.001),其敏感性为85.95%、特异性为88.54%。TBM患者预后良好者脑脊液MMP-9、INF-γ、ADA和ESAT-6水平均高于预后不良者(P均<0.05);复发者脑脊液ESAT-6、ADA、INF-γ和MMP-9水平高于未复发者(P均<0.05)。结论 TBM患者脑脊液ESAT-6、ADA、INF-γ和MMP-9水平升高,联合检测可提高TBM的诊断效率,并且其水平变化有助于患者预后和复发的判断。

脑脊液单核细胞内ESAT-6检测对结核性脑膜炎的诊断意义

目的评价检测脑脊液中单核细胞内的早期分泌性抗原靶6(ESAT-6)对结核性脑膜炎诊断的意义,为结核性脑膜炎的诊断提供有效的方法。方法将20例结核性脑膜炎患者与20例对照组患者进行脑脊液常规、生化、细胞学检查,同时用免疫组化的方法检测脑脊液单核细胞内的ESAT-6及PPD。结果结核性脑膜炎患者单核细胞内存在ESAT-6,在20例结核性脑膜炎患者中14例显示阳性,对照组中1例阳性,结核性脑膜炎组单核细胞内ESAT-6阳性检出率显著高于对照组,(P<0.05),该方法诊断结核性脑膜炎敏感性为70%,特异性为95%,约登指数0.65。结核性脑膜炎组单核细胞内PPD阳性检出率显著高于对照组,(P<0.05),敏感性为0.65,特异性为0.90,约登指数为0.55。结论检测脑脊液单核细胞中ESAT-6是诊断结核性脑膜炎的一种简便、特异的方法 。

脑脊液单核细胞内ESAT-6对结核性脑膜炎的诊断价值

目的通过检测结核性脑膜炎(tuberculous meningitis,TBM)患者脑脊液单核细胞中的早期分泌抗原靶蛋白6(early secreted antigenic target,ESAT-6),探讨ESAT-6在TBM诊断中的价值。方法将42例TBM患者与47例对照组患者进行脑脊液生化、细胞学、抗酸染色检查,同时用免疫荧光细胞化学染色法检测脑脊液单核细胞内的ESAT-6。结果在临床诊断TBM的42例患者中有38例脑脊液单核细胞中检出ESAT-6,47例对照组中检出4例。TBM组ESAT-6的检出率明显高于对照组(P<0.05)。该方法诊断TBM的敏感性为90.48%,特异性为91.49%。约登指数达到0.82。结论检测脑脊液单核细胞内结核特异性抗原ESAT-6用于诊断TBM,具有灵敏度、特异度高的特点,而且简单易行,有望成为诊断TBM的一种新的辅助方法。

超滤浓缩脑脊液ESAT-6对结核性脑膜炎的诊断价值

目的探讨离心超滤技术浓缩脑脊液检查结核杆菌早期分泌性抗原靶蛋白6(ESAT-6)在诊断结核性脑膜炎(TBM)中的价值。方法选取TBM患者40例(TBM组)和非TBM患者20例(非TBM组),每位患者留取2份脑脊液(一份为原液,另一份为离心超滤浓缩),使用ELlSA法检测其ESAT-6水平。结果 TBM组中浓缩ESAT-6的敏感性高于原液(P<0.05),而非TBM组中浓缩ESAT-6的敏感性与原液比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论利用离心超滤浓缩技术能提高脑脊液ESAT-6检查的敏感性,且操作简单,可作为快速诊断TBM的参照指标。

ESAT-6和干扰素-γ表达水平在结核性脑膜炎诊断中的应用价值

目的探讨脑脊液早期分泌性靶抗原-6(ESAT-6)和干扰素-γ(IFN-γ)表达水平变化在结核性脑膜炎的临床诊断中的应用价值。方法将2012-05~2016-05延安大学附属医院收治的90例结核性脑膜炎患者为观察组,选择同期住院的90例非结核性脑膜炎患者为对照组。采用ELISA法检测两组患者的脑脊液中的ESAT-6和IFN-γ水平,对观察组按照不同时相(急性期与恢复期)、不同病情程度(重症和轻症)分组进行ESAT-6、IFN-γ水平比较,并比较ESAT-6和IFN-γ单独与联合检测的灵敏性、特异性和阳性结果准确性。结果 1观察组结核性脑膜炎患者急性期的ESAT-6和IFN-γ水平均较对照组明显升高(P<0.05);而观察组结核性脑膜炎患者恢复期的ESAT-6和IFN-γ水平和对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。2观察组重症结核性脑膜炎患者的ESAT-6和IFN-γ水平均较轻症组和对照组明显升高(P<0.05);观察组轻症结核性脑膜炎患者的ESAT-6和IFN-γ水平均较对照组明显升高(P<0.05)。3ESAT-6和IFN-γ联合检测的灵敏性、特异性和阳性结果准确性均较单独ESAT-6、单独IFN-γ检测明显提高(P<0.05)。结论脑脊液ESAT-6和IFN-γ表达水平变化将有助于结核性脑膜炎的早期临床诊断。

比较结脑病人血液和脑脊液IFN-γ的表达水平

目的采用结核分枝杆菌特异性IFN-γ酶联免疫斑点(Elispot)检测结核性脑膜炎病人外周血和脑脊液细胞中IFN-γ的表达,评价该方法在结核性脑膜炎诊断中的应用情况。方法采用自建立的结核分枝杆菌特异性IFN-γElispot检测技术(简称Elispot)检测16例结核性脑膜炎病人PBMC和脑脊液中结核菌特异性IFN-γ水平。结果 ELISPOT检测两种细胞分别在ESAT6蛋白和Pool A多肽的作用下,释放的IFN-γ水平均没差别(P>0.05);两种标本ELISPOT检测阳性率没有差异(P>0.05)。结论建立的结核特异性的Elispot检测诊断方法适用于脑脊液标本的检测,并且其检测效果与外周血细胞的检测是基本一致。

早期分泌靶抗原6在结核性脑膜炎早期诊断中的价值

目的检测结核性脑膜炎（TBM）及非TBM患者脑脊液中单核细胞内早期分泌靶抗原6（ESAT-6）阳性细胞百分率及其动态变化，评价ESAT-6在TBM早期诊断中的价值。方法以临床诊断的40例TBM患者（TBM组）及40例非TBM患者（对照组，其中化脓性脑膜炎9例，病毒性脑膜炎24例，新型隐球菌脑膜炎3例，脑囊虫病3例，神经梅毒1例）为研究对象。入院后除常规检查外，行免疫细胞化学染色检测脑脊液中单核细胞内ESAT-6，并进行比较。结果TBM组脑脊液中单核细胞内ESAT-6阳性细胞百分率为24％，对照组为0，两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，以ESAT-6阳性细胞百分率≥8．5％判定为阳性，〈8．5％判定为阴性，则TBM组ESAT-6阳性35例，对照组阳性4例，ESAT．6诊断TBM的灵敏度为87．5％，特异度为90．0％。TBM组30例入院前未行抗结核治疗者在抗结核治疗2周后复查脑脊液中单核细胞内ESAT-6，治疗前阳性率为93．3％（28，30），治疗后为46．7％（14／30），差异有统计学意义（P=0．000）。结论早期检测单核细胞内ESAT．6阳性细胞百分率诊断TBM灵敏度及特异度较高；动态观察ESAT-6阳性细胞百分率对TBM病情判断有实用价值。