CRNDE调节miR-126-5p减弱患儿脓毒症脑损伤的机制研究

目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA)结直肠肿瘤差异表达(colorectal neoplasia differentially expressed,CRNDE)和微小RNA-126-5p(miR-126-5p)在脓毒症相关性脑损伤中的作用机制。方法选择符合脓毒症诊断标准同时无中枢神经系统疾病30例患者作为研究对象,在体外构建LPS诱导的星形胶质细胞模型。采用RT-PCR检测脓毒症患儿血清和LPS诱导的星形胶质细胞中CRNDE和miR-126-5p的水平;采用生物信息法和荧光素酶法推测和证实二者间的相互关系;MTT法检测细胞的增殖;western blot检测凋亡相关蛋白(Bax、Bcl2)、NF-κB、Keap1、Nrf2的水平;采用ELISA检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的水平。结果LPS显著降低了星形胶质细胞细胞中CRNDE的表达水平(P<0.05)。在LPS诱导的星形胶质细胞中过表达CRNDE后,星形胶质细胞的增殖水平上调(P<0.05)。上调LPS诱导的星形胶质细胞中CRNDE的水平后,细胞中Bax的水平显著下调,而Bcl2的水平上调。ELISA和western blot结果显示,上调CRNDE后,LPS介导的星形胶质细胞中TNF-α、IL-1β、NF-κB、MDA、Keap1的水平下调,而SOD和Nrf2的水平上调(P<0.05)。双荧光素酶报告试验表明,miR-126-5p模拟物可降低含CRNDE-wt的荧光素酶报告体的荧光素酶活性,而对CRNDE-mut载体的荧光素酶活性没有显著影响。CRNDE与miR-126-5p相互作用且能负向调节其表达。结论CRNDE能够靶向miR-126-5p减弱脓毒症患儿脑损伤。