脓毒症晚期小鼠髓系造血情况的研究

目的利用小鼠盲肠结扎穿刺模型探讨脓毒症晚期髓系造血情况。方法将C57 BL/6小鼠分成假手术组和脓毒症组,采用盲肠结扎穿刺术(CLP)建立小鼠脓毒症模型。利用流式细胞仪检测CLP术后12d脓毒症小鼠骨髓和脾脏造血前体细胞比例的变化情况。结果与假手术组相比,CLP术后12d小鼠骨髓中的GMPs(粒-单核细胞祖细胞)、MPPs(多潜能祖细胞)、LSKs(造血干细胞Lin^(-)Sca-1^(+)c-Kit^(+))的比例显著增加;脾脏中GMPs、LSKs的比例也明显增加。结论脓毒症晚期小鼠髓系造血显著增加。

PD-1/PD-L1通路在脓毒症晚期免疫抑制作用中的研究进展

脓毒症是炎症、免疫激活、缺氧等复杂因素相互作用的结果,目前仍缺少针对性治疗方案。文章指出免疫负性调控蛋白程序性细胞死亡受体1(PD-1)/程序性细胞死亡配体1(PD-L1)通路可通过胞内多种机制,如磷酸磷脂酰激酶-3(PI3K)等诱导脓毒症患者T、B淋巴细胞,抗原提呈(DC)细胞,中性粒细胞等免疫细胞的凋亡、耗竭,以此维持机体抗炎和促炎反应的平衡,这种过度的免疫负性调控导致晚期脓毒症患者出现免疫抑制状态,是导致患者死亡的主要原因。提示脓毒症免疫抑制是一个多细胞、多种群、多层次参与的复杂的病理生理过程,PD-1/PD-L1通路在晚期脓毒症免疫抑制发挥着重要作用。抗PD-1抗体在体内和体外实验中已取得阶段性治疗成效,PD-1/PD-L1通路可成为治疗脓毒症的一个新靶标。

乌司他丁对脓毒症晚期大鼠肠黏膜屏障功能的影响

目的 探讨乌司他丁对脓毒症晚期大鼠肠黏膜屏障功能的影响。方法 选取18只SD雄性大鼠随机分为假手术组、脓毒症组和治疗组,每组6只。盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型。假手术组切开腹壁后缝合,其余两组行CLP术。治疗组在建模后20 min经尾静脉注射乌司他丁,其余两组于相同时间点注射等容积生理盐水。各组大鼠于CLP后24 h处以安乐死。取心脏血、股动脉血及小肠标本。分别检测小肠病理光镜、空肠组织紧密连接蛋白(ZO-1)、血浆二胺氧化酶(DAO)、小肠微管相关蛋白质轻链3(LC3)和降解底物P62。结果 脓毒症组大鼠小肠绒毛顶端上皮脱落,固有层崩解,毛细血管出血和溃疡形成,乌司他丁治疗组显著减轻了上述病理改变;与假手术组相比,脓毒症组ZO-1水平降低(P<0.05),乌司他丁治疗组可提升其水平(P<0.05);与假手术组相比,脓毒症组DAO浓度升高(P<0.05),乌司他丁治疗组可降低其浓度(P<0.05);与假手术组相比,脓毒症组P62表达增加,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ下降(P<0.05);与脓毒症组比较,乌司他丁治疗组p62表达下降,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ上升(P<0.05)。结论 脓毒症晚期大鼠的肠上皮自噬功能受损;乌司他丁可通过提升其水平改善脓毒症大鼠肠黏膜屏障功能障碍。

糖皮质激素对烫伤后晚期脓毒症大鼠细胞免疫功能的影响

目的:探讨糖皮质激素(GC)对烫伤后晚期脓毒症大鼠细胞免疫功能的影响。方法:48只健康雄性的SD大鼠随机分为脓毒症组(非GC组,24只)、脓毒症糖皮质激素干预组(GC组,24只);每组平均分为1d、10d两亚组。脓毒症组大鼠背部用沸水制造体表面积30%的Ⅲ度烫伤,12h后腹腔注射5mg/kg的内毒素造模。糖皮质激素干预组应用氢化可的松(10mg/kg)于脓毒症造模成功后即刻胃管内注入;脓毒症组以生理盐水替代氢化可的松(10mg/kg)经胃管注入。应用流式细胞仪检测各组大鼠外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD11、CD95、CD95L及NK细胞分别占淋巴细胞的百分比;应用放射免疫方法检测各组大鼠血中皮质醇水平。结果:脓毒症时,CD8+和CD95细胞计数明显下降(P<0.05)。CD3+细胞计数在GC 10d组较1d组明显上升(P<0.01),CD4+、CD8+细胞计数在GC 10d组较1d组明显下降(P<0.01);CD3+细胞计数在GC 1d组、GC 10d组较非GC 1d组、非GC10d组明显下降;CD11b细胞计数在GC 1d组较非GC 1d组明显下降,CD95L细胞计数在GC 1d组、GC 10d组较非GC 1d组、非GC 10d组明显上升;GC组10d亚组皮质醇激素水平较1d组明显下降(P<0.01)。结论:糖皮质激素会抑制脓毒症时机体的细胞免疫状态。