血浆脯肽酶活性测定在肝病诊断中的意义

本文观察了各类肝病患者血浆脯肽酶活性的测定结果。肝硬化患者(21例)尽管ALT正常,但脯肽酶活性显著升高,异常率明显高于ALT;慢性活动性肝炎患者(11例)虽然脯肽酶与ALT均显著升高,但二者变化无明显相关,脯肽酶异常率明显高于ALT;急性肝炎患者(58例)脯肽酶与ALT均显著升高,二者变化呈正相关,脯肽酶恢复正常时间早于ALT。研究结果表明,血浆脯肽酶活性测定既是一项反映肝病慢性化,也是一项反映肝细胞损伤的良好指标。在评价脯肽酶作为肝病慢性化指标的意义时应首先除外急性肝损伤。

血清羟脯氨酸浓度和脯肽酶活性在判断肾纤维化病程中的意义

目的 :探讨血清羟脯氨酸浓度和脯肽酶活性在反映肾纤维化中的意义。方法 :经肾活检证实的有(纤维化组)和无(无纤维化组)肾小球硬化与肾间质纤维化的肾脏病人各10例 ,健康献血员(对照组)10例 ,测血清羟脯氨酸浓度、血清脯肽酶活性等指标。结果 :纤维化组血清羟脯氨酸浓度显著高于无纤维化组(P<0.001)和健康对照组(P<0.001) ,以此指标显著增高判断肾纤维化 ,敏感性100 % ,特异性91 % ,假阳性9 % ,与肾活检符合率95 %。纤维化组血清脯肽酶活性亦显著高于无纤维化组(P<0.05)和健康对照组(P<0.05) ,以此指标显著增高判断肾纤维化 ,敏感性80 % ,特异性100 % ,未发现假阳性 ,与肾活检符合率90 %。血清羟脯氨酸浓度与患者血清肌酐浓度、纤维化肾小球比率和病变肾小管、肾间质比率显著正相关。结论 :血清羟脯氨酸浓度和脯肽酶活性 ,可作为判断肾脏病人肾纤维化的无创性检查指标 ,尤其适用于有肾活检禁忌症的病人。

血清脯肽酶测定在肝损伤中的应用

ＣＣｌ＿４致小鼠急性肝损伤后血清脯肽酶（ＰＬＤ）和丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）活性均显著升高，二者变化呈正相关（Ｐ＜０．０１）。ＣＣｌ＿４致小鼠肝硬变经历胶原纤维增生（１～６周），肝硬变形成（６～９周）和肝硬变（９周后）１３个阶段，ＰＬＤ在第１周开始升高、第３周至峰值，第９周降至正常，其变化与ＡＬＴ无关（Ｐ＞０．０５）静止期慢活肝和肝硬变病人ＰＬＤ活性显著升高，而ＡＬＴ正常，ＰＬＤ异常率明显高于ＡＬＴ异常率（Ｐ＜０．０５）。表明血清ＰＬＤ活性测定是一项良好的肝损伤指标，并与进展性肝纤维化有关。

血清脯肽酶与肝损害

采用ＣＣｌ４致小鼠急、慢性肝损伤模型，平行动态观察了肝组织学改变与同期血清脯肽酶（ＰＬＤ）和丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）变化关系。急性肝损伤中，血清ＰＬＤ和ＡＬＴ活性均明显升高，且二者变化呈显著正相关（ｎ＝１００，ｒ＝０．３８５３．Ｐ＜０．０１）。ＰＬＤ峰值期为注射ＣＣｌ４后１６ｈ，与肝坏死最严重的时相一致。ＰＬＤ峰值和恢复时间均早于ＡＬＴ。肝硬化形成大致可分为胶原纤维增生（１～６周），肝硬化形成（６～９周）和肝硬化（９～１２周）３个阶段。其间血清ＰＬＤ活性第１周开始升高、３～６周达高峰，而后开始下降，９周后降至正常，而ＡＬＴ无明显变化。结果表明，血清ＰＬＤ活性测定是一项诊断急性肝损伤的敏感指标，除外急性肝损伤、ＰＬＤ活性在某种程度能较好地反映进展性肝纤维化。

血清脯肽酶Ⅰ的测定及其临床意义

作者检测本院１９９４年１月～１９９４年４月肝炎患者６０例、其它疾病患者２７例血清中的脯肽酶Ⅰ（ＰＬＤＩ）的水平与健康献血员血清ＰＬＤＩ进行比较．结果表明各型肝炎患者血清ＰＬＤＩ均明显升高．急（ｎ＝２４）、慢性肝炎（ｎ＝２２），肝硬变（ｎ＝１４）和其它疾病（ｎ＝２７）患者分别为１９５３．６±５７０．７μ／Ｌ，１４４５．７±３２５．８μ／Ｌ，１８３１．１±３７０．９μ／Ｌ，１２５４．４±４４８．３μ／Ｌ，与对照组（９１０．８±２００．３μ／Ｌ）相比，Ｐ均＜０．０１．急性肝炎中，ＰＬＤＩ与丙氨酸转氨酸（ＡＬＴ）均升高，且呈明显正相关（ｒ＝０．６６６，Ｐ＝０．０００７）；慢性肝炎中，ＰＬＤＩ与ＡＬＴ虽均升高，但无相关性；肝硬变中，ＰＬＤＩ明显升高，而ＡＬＴ多正常，提示ＰＬＤＩ比ＡＬＴ能更好地反映肝病的转归，是一项较灵敏的肝病慢性化指标．

肝纤维化大鼠血清脯肽酶变化及维生素E治疗的研究

目的 观察肝纤维化大鼠血清脯肽酶 (PLD)变化及维生素E(VE)治疗对其影响。方法 将大鼠分组 ,用 40 %四氯化碳 (CCl4 )诱导其肝纤维化。预防组 (于注射CCl4 时 )和治疗组(于肝纤维化形成后 )分别给予 5 %VE乳剂 10 0mg/kg尾静脉注射 ,2次 /周 ,连续 8～ 10周。定期测定血清PLD ,ALT及AST活性 ,观察VE治疗后肝纤维化大鼠肝组织的病理改变情况。结果 肝纤维化大鼠血清PLD活性显著增高 ,VE预防组和治疗组大鼠血清PLD活性显著低于同期对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。治疗组大鼠肝纤维化组织沉积较对照组减少。结论 肝纤维化大鼠血清PLD持续增高 ,用VE治疗可降低其活性 。

血清脯肽酶与慢性肝病

本文通过肝纤维化动物模型、临床应用及与血清透明酸(HA)和前胶原Ⅱ(PC Ⅱ)水平的平行比较，进一步评价了血清脯肚酶(PLD)活性测定在慢性肝病诊断中的意义。模型显示，PLD活性变化与肝纤维化平均积分(Mf)呈“剪刀差”改变。6周前PLD活性随Mf增加而升高，6周后Mf继续增加而PLD活性逐渐降至正常，提示PLD主要是反映肝纤维化进展，并不反映肝纤维量的多少。慢性活动性肝炎和代偿期肝硬变患者的PLD升高最明显，显著高于慢性迁延性肝炎和失代偿期肝硬变患者。PLD活性与HA及PCⅡ水平呈显著正相关。同时从胶原蛋白合成和降解角度研究胶原蛋白代谢，能更准确地反映肝纤维化的进展情况。

血清脯肽酶Ⅰ活性测定及临床应初探

血清脯肽酶Ⅰ活性测定及临床应初探四川临床检验中心（成都６１００７２）陈光荣，杨明清，何德秀四川省人民医院检验科李顺君血清脯肽酶Ⅰ（ｐｒｏｌｉｄａｓｅ，ＰＬＤ，ＥＣ３．４．１９．９）是一种蛋白水解酶，大量存在于肝细胞浆中，能水解氨基酸Ｃ末端含脯氨酸或羟...

血清脯肽酶Ⅰ测定的临床意义

血清脯肽酶Ⅰ测定的临床意义王福美，游丽荣，刘玉书，王延伟，吕富强（中国人民解放军第２２２医院检验科１３２０１１）张革红（吉林市妇幼保健所化验室１３２０１１）血清脯肽酶（ＰＬＤ）是一种蛋白水解酶，富含于肝细胞浆，能水解氨基酸Ｃ末端含脯氨酸或羟脯氨酸的多...

慢性肝病患者血清脯肽酶活性的研究

本文检测了１５例慢迁肝，２１例慢活性，４０例肝硬化，１８例慢性重症肝炎及２３例患者血清脯肽酶活性，结果均显著高于正常对照组，血清脯肽酶活性与ＡＬＴ呈轻度正相关，与白蛋白无明显相关，研究结果表明，血清脯肽酶活性测定对慢性肝病，尤其是肝硬化的辅助诊断具有一定的意义。

来源于超嗜热古菌雅氏火球菌(Pyrococcus yayanosii)CH1耐热耐压脯肽酶的酶学性质研究

【目的】脯肽酶是一种能从二肽(Xaa-Pro)的C末端水解脯氨酸或羟脯氨酸残基的肽酶。对深海来源的雅氏火球菌(Pyrococcus yayanosii)CH1基因组中PYCH_07700基因编码的蛋白Pyprol的体外酶学性质进行研究,以期发现新型脯肽酶。【方法】在小宝岛热球菌(Thermococcus kodakarensis)TS559中异源表达Pyprol。使用二肽Met-Pro作为底物,检测重组蛋白的脯肽酶活性。【结果】Pyprol的最适温度为100℃,最适pH为6.0。Pyprol在与Co^(2+)结合时活性最高,最适的金属离子浓度为1.2 mmol/L。与P.furiosus来源的脯肽酶Pfprol相比,Pyprol在更宽的pH范围具有活性,并且能够耐受更高浓度的金属离子。Pyprol是耐压蛋白,最适静水压为40 MPa。与常压条件下相比,40 MPa下,Pyprol在40、70和100℃均有更高的活性。【结论】来源于深海热液喷口的严格嗜压的超嗜热古菌P.yayanosii CH1的新型脯肽酶Pyprol具有热稳定和耐压特性。

血清脯肽酶与慢性肝病

本文通过肝纤维化动物模型、扩大临床应用及与血清HA和PCⅢ水平的平行比较，进一步评价了血清PLD活性测定在慢性肝病诊断中的意义。模型显示，PLD活性变化与肝纤维化平均积分（Mf）呈"剪刀差"改变。6周前PLD活性随Mf增加而升高，6周后Mf继续增加而PLD活性逐渐降至正常，提示PLD主要是反应映肝纤维化进展，并不反映肝纤维化量的多少。慢活肝和代偿期肝硬化患者，PLD升高最明显，显著高于慢迁肝和失代偿期肝硬化患者。PLD活性与HA及PCⅢ水平呈显著正相关。同时从胶原蛋白合成和降解角度研究胶原蛋白代谢，能更准确地反映肝纤维化的进展情况。

脯氨酰内肽酶培养条件的优化及高密度发酵

基因工程菌E.coliBL21/pGEMPEP可以组成型表达重组的点状产气单胞菌脯氨酰内肽酶(PEP),但培养条件极大地影响着酶的产量,为了获得高效表达,首先测定了工程菌表达PEP的稳定性并考察了培养温度、pH、发酵时间、碳源、氮源、无机盐等对产酶的影响,得到了优化的发酵条件,L9(34)正交试验进一步明确了摇床转速、培养温度、pH值、培养时间对产酶量的影响都有高度的统计学意义。在此基础上利用NBSBioFlo3000型5L自控发酵罐进行了高密度、高表达发酵、经20h培养,最终菌体密度达OD60060(相当于干菌体225g/L),PEP表达量为28%,每升发酵液中含PEP酶315g。

实验性肝纤维化大鼠血清Ⅲ型前胶原N端肽和脯胺肽酶活力的动态观察

用CCl_4腹腔注射2至11周诱发大鼠肝纤维化,动态观察其血清Ⅲ型前胶原N端肽(sP Ⅲ NP)、脯胺肽酶活力的变化,并以半定量评分估测肝纤维化程度。sP Ⅲ NP 和脯胺肽酶活力在第2周开始增加,第6周达峰值,第9至11周保持较高水平。前6周sPⅢNP和脯胺肽酶均与肝纤维化评分呈正线性相关;在11周内,脯胺肽酶和sPⅢNP 也呈正线性相关。结果表明:sP Ⅱ NP 是反映肝纤维化的主要指标之一;脯胺肽酶活力可能是反映肝内胶原代谢加速的指标。

尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定对铅、汞中毒肾损害探讨

目的研究尿液甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)测定对铅、汞中毒肾损害的临床应用价值。方法选择铅中毒45例、汞中毒38例和正常对照组40例,其中铅汞中毒分为轻、中、重3组,采用GPDA连续检测法,分别对其尿中GPDA活力进行测定,并与其他反映早期肾损害的指标N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)及尿微量白蛋白(UMA)相比较。结果铅中毒患者尿液GPDA[(36.1±32.7)U/g.Cr]和汞中毒患者尿液GPDA[(38.2±35.1)U/g.Cr]显著高于正常对照组[(12.8±7.9)U/g.Cr]的水平(P<0.01),尿GPDA与NAG、UMA均呈显著的正相关。结论尿液GPDA的操作简单、快速、稳定性好,干扰因素少,结果准确,是一项新的检测铅、汞中毒早期肾损害的敏感指标。