高效液相色谱法测定唾液乳杆菌脱基因毒性作用

采用高效液相色谱法（HPLC）测定唾液乳杆菌对4-硝基喹啉-N-氧化物（4-NQO）基因毒性的抑制作用。Lact．salivariusFDB89与4-NQO（终浓度为20mg／L）共培养后，利用SOS-显色反应法检测唾液乳杆菌的脱基因毒性作用，同时采用高效液相色谱分析共培养前后的4-NQO含量变化。色谱分析条件为：C18反相色谱柱（kromasil100-5C18），以乙腈、水为流动相进行梯度洗脱，流速1mL/min；检测波长365nm。结果表明，唾液乳杆菌转化4-NQO，降低了4-NQO的基因毒性；HPLC测定的4-NQO峰面积与SOS-显色反应测定的基因毒性值呈正相关，相关系数r^2为0．991。HPLC方法测定脱基因毒性检出限为1．2ng，菌体浓度在10^6～10^9cfu／mL范围内回收率为85％～98％。HPLC法测定唾液乳杆菌的脱基因毒性操作简单，其重复性和精确度均优于SOS-显色反应，可以采用HPLC代替SOS-显色反应。本研究在应用仪器分析方法代替生化分析方法测定乳杆菌脱基因毒性方面提供了一条新思路。

脱基因毒性乳酸菌的筛选

脱基因毒性功能是乳酸菌的重要功能之一。本研究通过检测菌体与致癌物4-NQO共培养后致癌物质的残留量对菌体的脱基因毒性功能强弱进行评价。结果表明:在选取的6个不同种属共计55株乳酸菌中,有11株乳酸菌具有较强的基因毒性脱除作用,脱除率大于75%。其中唾液乳杆菌9株,发酵乳杆菌2株。不同种类乳酸菌脱除基因毒性的剂量反应关系和最小作用剂量有很大区别。

益生菌脱基因毒性作用的研究进展

益生菌具有脱基因毒性的作用。在益生菌脱基因毒性研究中常见的基因毒性物质主要有4-硝基喹啉-1-氧化物、甲基硝基亚硝基胍、黄曲霉毒素。主要研究方法有Ames实验,SOS显色反应和高效液相检测法。益生菌脱基因毒性的作用机理主要通过吸附致癌物质或将致癌物代谢为无毒物质。