叶绿酸对恶性转化细胞周期及体外生长的影响

目的 研究叶绿酸对反式 7,8二羟 9,10环氧苯并 (a)芘 (反式BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞系(16HBE)体外生长及细胞周期影响。方法 采用噻唑蓝 (MTT)比色法和流式细胞术 (FCM) ,同时观察正常人支气管上皮细胞 (16HBE)、反式 -BPDE恶性转化细胞系、叶绿酸抗反式 -BPDE恶性转化细胞系生长曲线和生长周期的变化以及经叶绿酸处理后的影响。结果 BPDE恶性转化细胞系增殖活性明显大于正常细胞系 (16HBE) ,经 10 0 μmol/L叶绿酸抗BPDE恶性转化细胞组增殖活性较转化组有一定降低。经同样浓度叶绿酸处理的正常细胞组 ,未见降低细胞增殖活性作用。反式 -BPDE恶性转化细胞组G0 /G1期细胞周期比例明显少于正常组细胞。但经叶绿酸抗转化组G0 /G1期比例有所提高 ,而经同样浓度叶绿酸处理的正常细胞组G0 /G1期细胞周期比例无明显改变。结论 对正常细胞无影响的一定浓度叶绿酸有抑制反式 -BPDE恶性转化人支气管上皮细胞增殖活性的作用 ,并通过提高恶性转化细胞G0 /G1期细胞周期比例而影响细胞周期的进程 ,从而改变恶性细胞的增殖和分化。

叶绿酸抗细胞恶变相关cDNA序列的克隆

目的:克隆叶绿酸抑制人支气管上皮细胞系(16HBE)恶性转化的相关差异表达cDNA序列。方法:以叶绿酸及反式-BPDE共同处理的16HBE细胞为实验细胞,以反式-BPDE单独处理的16HBE细胞为对照细胞,采用cDNA代表性差异分析法,比较2种细胞基因表达的差异,分离叶绿酸抗反式-BP-DE作用的相关差异表达cDNA片段。分离的片段分别与pGEM-T载体连接并转化入JM109细菌中,对质粒DNA进行测序。以BLASTN程序进行GenBank的同源性检索。结果:克隆的5条cDNA序列中,有3条为新基因序列,另2条分别与类S18/S6人核糖体蛋白及alpha-烯醇酶等有同源性。结论:克隆的5条cDNA序列所在的基因可能与叶绿酸抗细胞恶性转化分子机制密切相关。