乳酸菌肽聚糖对雏鸭饲粮中黄曲霉毒素B 1的脱毒效果研究

本试验旨在探究乳酸菌肽聚糖对黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))的吸附作用,为乳酸菌肽聚糖的制备和饲粮中AFB_(1)的脱毒提供科学依据及理论基础。试验以4种乳酸菌(嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、罗伊氏乳杆菌和植物乳杆菌)为原料提取乳酸菌肽聚糖,采用高效液相色谱法比较4种乳酸菌肽聚糖对AFB_(1)的体外吸附率,选取体外吸附效果最好的罗伊氏乳杆菌肽聚糖进行动物试验。选择1日龄健康樱桃谷鸭120只,随机分为5组,每组4个重复,每个重复6只。对照组饲喂基础饲粮,AFB_(1)组在基础饲粮中添加0.10 mg/kg AFB_(1),试验组在AFB_(1)组饲粮中分别添加0.10%(Ⅰ组)、0.15%(Ⅱ组)和0.20%(Ⅲ组)罗伊氏乳杆菌肽聚糖。预试期3 d,正试期21 d。结果表明:1)乳酸菌肽聚糖种类、添加量及二者的交互作用均能够显著影响AFB_(1)的体外吸附率(P<0.05),其中10.0 mg/mL罗伊氏乳杆菌肽聚糖对AFB_(1)的体外吸附率最高,达75.29%。2)与对照组相比,AFB_(1)组的平均日增重、平均日采食量显著降低(P<0.05),料重比显著升高(P<0.05);血浆谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(AKP)活性及丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05),肝脏、脾脏、胸腺和法氏囊指数显著升高(P<0.05),血浆免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及总抗氧化能力(T-AOC)显著降低(P<0.05)。3)与AFB_(1)组相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的平均日增重显著升高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的血浆IgG、IFN-γ、IL-2、IL-4含量和SOD、GSH-Px活性显著升高(P<0.05),血浆AST、AKP、ALT活性及MDA含量显著降低(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ组的胸腺和法氏囊指数显著降低(P<0.05)。由此可见,不同乳酸菌肽聚糖对AFB_(1)体外吸附效果不同,饲粮中添加罗伊氏乳杆菌肽聚糖能够部分消除AFB_(1)对雏鸭造成的生长性能下降,改善AFB_(1)所导致的免疫功能降低以及肝脏毒性。

不同菌种对呕吐毒素脱毒效果的研究

本文选择短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌为脱毒菌种,研究3种菌种的上清液、菌悬液和细胞悬浮液对呕吐毒素(DON)的脱毒效果。选择脱毒效果较好的处理进行单因素试验设计,研究其在不同温度(35、45、55℃)、不同pH值(5、7、9)下的脱毒效果。结果表明,3种菌种的上清液、菌悬液、细胞悬浮液均对DON有脱毒作用,其中短小芽孢杆菌菌悬液、枯草芽孢杆菌上清液、地衣芽孢杆菌上清液的脱毒率最高,分别为54.74%、63.32%、57.68%;其最适温度分别为55、45、45℃,脱毒率分别达到74.35%、75.50%、83.51%,显著高于其他温度下的脱毒率(P<0.05);其最佳pH值分别为7、5、5,脱毒率分别达到72.89%、70.81%、75.60%,显著高于其他pH值下的脱毒率(P<0.05)。

棉酚脱毒微生物的筛选及其脱毒效果的研究

经反复发酵脱毒试验，筛选出了一株棉酚脱毒菌（Ｓ９６０６）。试验结果证明，该菌能将含棉酚在０．０４５％～０．１８％范围内的各种棉籽饼（粕）一次性脱毒，使游离棉酚残留量在０．０２６％以下，脱毒率随棉酚含量的升高而升高（４９％～８５．３％）。脱毒后的棉籽蛋白中有６种必需氨基酸（蛋氨酸、赖氨酸、缬氨酸、苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸）的含量增加，其中蛋氨酸提高了３５．７％～４０％，赖氨酸提高了１９．４％～２７．６％，同时精氨酸减少２０％左右，使赖氨酸与精氨酸之比接近正常的吸收比值。发酵脱毒后的棉籽饼（粕）质量有了明显的提高。

螺杆结构对棉籽粉双螺杆挤压脱毒效果的影响

利用自行开发的双螺杆食品挤压机对棉籽粉做了挤压脱棉酚试验 ,分析了 11种螺杆结构中的捏合盘元件对脱毒效果的影响。试验中含水量、螺杆转速、喂料率及试验区温度分别设定为 5 0 % (w .b.)、180 r/ m in、12 kg/ h及 12 0～ 130℃。结果表明 :捏合盘的加入能有效改善脱毒效果 ,螺杆结构不同效果也不同。捏合盘长度、位置及两者交互效应都是影响脱毒效果的显著因素 ,捏合盘间距的影响则不显著。试验结果还表明 。

1株降解黄曲霉毒素B1的解淀粉芽胞杆菌的分离鉴定及其体外脱毒效果

旨在筛选出能够高效降解黄曲霉毒素B1(AFB1)的菌株,并对其脱毒活性组分的脱毒效果进行研究,本研究以香豆素为唯一碳源对目标细菌进行初筛,以对AFB1的降解率为指标进行复筛,并从形态学、生理生化试验和16S rDNA序列分析对筛选菌株进行鉴定;通过测定该菌株不同发酵组分对AFB1的降解率,来定位其脱毒活性组分,同时采用CCK-8法测定活性组分降解AFB1后对LMH细胞毒性,并研究了热处理、紫外线照射、强酸、强碱及蛋白酶K处理对活性组分脱毒作用的影响。结果显示,从样品中初筛分离到24株能够在初筛培养基生长良好的菌株,经复筛从中筛选到一株能高效降解AFB1的菌株Y1-B1,其AFB1降解率达到73.2%;经形态学、生理生化试验和16S rDNA序列分析确定该菌为解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。对菌株Y1-B1培养物的不同组分进行的脱毒活性研究表明,不同组分对AFB1的降解率不同,上清液的脱毒能力最强,细菌细胞裂解物的脱毒能力下降明显,菌体悬液和菌体裂解物上清的脱毒能力最差,由此确定解淀粉芽胞杆菌Y1-B1的脱毒能力主要来源于上清液中的某种活性物质;细胞毒性结果显示,与AFB1对LMH细胞的毒性作用相比,AFB1被上清液降解后其产物的毒性显著降低。该脱毒活性组分对不同理化因素处理呈现出不同的表现,对高温、紫外照射抵抗力较强,对强酸、强碱抵抗力较差,蛋白酶K仅造成脱毒能力部分减弱。本研究将为解决黄曲霉毒素污染问题提供新的微生物种质资源,同时为后续微生物脱毒制剂的开发奠定基础。

不同脱毒方法处理棉粕脱毒效果的比较试验

[目的]比较棉粕生物发酵法与化学法的脱毒效果,筛选出棉粕脱毒的有效方法.[方法]采用不同生物脱毒剂（M81、EM菌）发酵与常规脱毒方法（硫酸亚铁法、尿素法）脱毒处理棉粕,筛选出生物发酵的适宜发酵条件.[结果]生物发酵脱毒处理棉粕的脱毒效果主要受发酵剂的添加比例和发酵天数的影响,发酵湿度为35％～40％时对脱毒效果的影响不明显.其中,EM菌液添加比例在3％以内时对脱毒效果的影响不明显,而M81的添加比例极显著影响脱毒效果（P＜0.01）.2种生物发酵剂的发酵处理天数显著影响脱毒率（P＜0.05）,生物制剂发酵处理棉粕与传统硫酸亚铁法无明显差异（P＞0.05）.[结论]有益菌液可作为发酵脱毒处理棉酚的有效方法.

多菌种混合发酵对菜籽饼脱毒效果的初步研究

据报道,我国油菜籽年产量约1300万吨。在现代工业条件下加工,可得到约800万吨的菜籽饼粕。菜籽饼粕是一个潜在营养价值很高的巨大的植物蛋白资源,其营养价值可与联合国粮农组织和世界卫生组织推荐的理想蛋自氨基酸组成模式相媲美。一般情况下，菜籽饼粕含蛋白质35％-45％，菜籽蛋白营养效价为3．35，生物效价为91，营养效价和生物效价均高于大豆蛋白、花生蛋白和棉籽蛋白。

甘薯茎尖培养和脱毒效果研究

试验以MS为基本培养基 ,附加不同浓度的BAP(苄氨基嘌呤 )和不同种类的生长素 (NAA、GA3)作为甘薯茎尖分生组织的诱导培养基。结果表明 :MS +BAP 1～ 2mg/L为较适宜培养基 ,其芽分化率和成苗率均可达 90 %。同时BAP附加低浓度的NAA ,有利于甘薯茎尖培养芽的分化 ;而附加GA3对芽的分化有抑制作用。病薯经脱毒培养后 ,生长旺盛 ,产量提高 ,品质改善 ,增产幅度为 2 0 %～ 2 2 4%。

马铃薯脱毒效果与茎尖大小的关系

以鄂马铃薯3号、米拉和川芋4号为材料,研究了不同品种脱毒效果与茎尖大小的关系。试验结果表明,剥离茎尖大小与成活率及成苗率呈显著正相关,与PVX、PVY、PVS等病毒脱除效果呈负相关;而在不同等级大小的茎尖中,PLRV脱除率均达100%。但为保证成活率,同时兼顾脱毒效果,剥离茎尖长度为0.1～0.3mm并带1～2个叶原基的茎尖较好。

二次茎尖脱毒法对草莓茎尖培养及脱毒效果的影响

为了解决生产上常用的脱毒方法不能保证草莓的成苗率和脱毒率的问题,以童子一号草莓茎尖为外植体,采用热处理和二次茎尖培养相结合的方法脱除病毒,研究二次茎尖脱毒法对草莓茎尖培养及脱毒效果的影响。结果表明:热处理结合二次茎尖培养脱毒方法的成苗率高达60.33%,脱毒率也高于其它处理,平均脱毒率达到80.58%。

棉仁（籽）饼脱毒剂Ⅰ、Ⅱ的脱毒效果研究

选用１０５羽８月龄健康太湖种鹅，对棉仁（籽）饼脱毒剂Ⅰ、Ⅱ的脱毒效果进行了试验。结果表明，在高比例棉仁饼（１１％）日粮中应用Ⅰ、Ⅱ号棉仁（籽）饼脱毒剂对种鹅产蛋性能和蛋的种用价值有明显提高，蛋重、孵化率分别相应提高０．４２ｇ，１ｇ；２．３０％，６．３１％，减少体内ＦＧ残留量，且减轻对器官组织的损伤，血清中ＧＯＴ活性明显降低。使用Ⅱ号脱毒剂的组３蛋重、孵化率比使用Ⅰ号脱毒剂的组２分别相应提高０．５８ｇ，４．０１％。

生物霉菌毒素吸附剂—霉必吸对AFB_1的脱毒效果及其对维生素的吸附性检测

为了检测霉必吸对黄曲霉毒素B1(AFB1)的脱毒性能和对饲料中维生素类物质的影响,采用全收粪法检测动物食用霉变饲料后,以霉必吸吸附后排除体外的黄曲霉毒素B1占食入总量的比例,评价脱毒效果;选择维生素C作为检测对象,测定霉必吸对维生素C的吸附性。实验结果表明添加2‰的霉必吸脱霉效果最好,AFB1的排出率可达72.3%,脱酶效果显著;霉必吸对维生素C并没有吸附性能,作为脱霉剂在饲料中添加不会影响饲料中维生素C的含量。

比较几种吸附剂对3种霉菌毒素体外吸附脱毒效果的研究

霉菌毒素吸附剂是一种能有效去除饲料中霉菌毒素的物质。本文研究了13种不同市售吸附剂对黄曲霉毒素B（1AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）和呕吐毒素（DON）体外吸附的效果，发现不同处理时间，吸附率有所不同。某些硅铝酸盐吸附剂对黄曲霉毒素B1有非常好的吸附效果，吸附率达到95％以上；某些吸附剂对玉米赤霉烯酮也有较好的吸附脱毒能力，但与处理时间关系密切；某些吸附剂对呕吐毒素的吸附率比较低，且处理时间变长，脱毒效果更差。

霉菌毒素吸附剂对玉米赤霉烯酮脱毒效果的评价

本试验旨在评价几种霉菌毒素吸附剂对玉米赤霉烯酮(ZEA)的体外和体内脱毒效果。分别采用pH 3.0和6.5的缓冲盐溶液为反应介质,分析比较市场上常见的12种霉菌毒素吸附剂对ZEA的体外吸附能力,依据分析结果选取体外吸附效果最好的3种吸附剂A3、A4和A6进行动物试验评价。选取健康三元杂交(杜×长×大)青年母猪40头,按日龄[(75±2)日龄]和平均体重[(29.19±0.76)kg]相近原则分为5组,每组8个重复,每个重复1头。对照组饲喂不含ZEA的基础饲粮,ZEA组饲喂添加1 mg/kg ZEA的基础饲粮,试验E1、E2、E3组饲喂在ZEA组饲粮基础上分别添加质量分数为0.2%的吸附剂A3、A4和A6的饲粮。预试期7 d,正试期21 d。通过比较不同组间猪只的生长性能、阴户宽度、器官指数、血清生化指标和血浆中ZEA含量及其代谢产物的残留水平评价吸附剂的体内脱毒效果。结果表明:1)12种霉菌毒素吸附剂在不同pH反应体系中对ZEA的体外吸附效果不同,其中吸附剂A3、A4和A6对ZEA的体外吸附效果最佳,在pH 3.0和6.5的反应介质中吸附率均达到90%以上。2)与对照组相比,饲粮中添加1 mg/kg的ZEA对青年母猪的平均日增重、平均日采食量、料重比,肝脏指数、脾脏指数、肾脏指数,血清中总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白G含量及碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酸脱氢酶(GLDH)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)和肌酸激酶(CK)活性均没有显著影响(P>0.05),但能显著增加阴户宽度、生殖器官指数、血浆中ZEA含量及其代谢物α-玉米赤霉烯醇(α ZOL)和β-玉米赤霉烯醇(β ZOL)含量(P<0.05),并显著降低血清中雌二醇含量(P<0.05)。3)与ZEA组相比,饲粮中添加0.2%的吸附剂A4和A6能使生殖器官指数恢复至对照组水平。3种吸附剂对血清中雌二醇的含量均有一定恢复效果。吸附剂A4能显著改善阴户红肿并降低血浆中ZEA及其代谢物的含量(P<0.05)。由此可见,市场上不同霉菌毒素吸附剂对ZEA的体外吸附效果差异较大,体外吸附效果并不能完全代表体内脱毒效果,霉菌毒素吸附剂的脱毒效果评价需要体内与体外试验相结合进行。

不同培养条件对分蘖洋葱茎尖脱毒效果的影响

为建立高效的分蘖洋葱脱毒体系,以吉林省内不同地区分蘖洋葱品种为试验材料,在建立分蘖洋葱茎尖脱毒体系的基础上,通过热处理温度及处理时间的比较,提高了茎尖剥离的体积,降低了茎尖剥离的难度。结果表明,最佳茎尖启动培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+zip 0.4 mg/L,生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1mg/L;最佳热处理条件为80℃处理10 min,茎尖大小从原0.1~0.5 mm增大到0.5~1.0 mm;不同品种处理后成活率均在90%以上,脱毒率也均在93.3%以上。

2株棉酚分解菌对棉籽油脱毒效果的研究

以从棉花秸秆中分离得到的2株棉酚分解菌莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)和死谷芽孢杆菌(Bacillus vallismortis)为实验菌株,对棉酚含量高的棉籽油进行脱毒实验。结果表明:莫海威芽孢杆菌和死谷芽孢杆菌对棉籽油具有一定的脱毒作用,脱毒率分别达到22.1%和22.2%。

大蒜脱毒苗脱毒效果的电镜鉴定

大蒜病毒病发生普遍,主要为线条状病毒,应用营养茎尖分生组织培养技术,可以获得脱毒大蒜。本试验应用电镜“负染—环圈计数法”定量检测大蒜脱毒苗的脱毒效果,从28份试管苗中筛选出13份无毒试管苗,该法对于大蒜脱毒试管苗高质量的扩繁具有重要作用。