微小RNA-485-5p通过靶基因DHRS3调控骨髓间充质干细胞增殖和分化

目的研究miR-485-5p和脱氢酶/还原酶3(DHRS3)在骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和分化中的表达和作用。方法将细胞分为第1转染组、第2转染组、第3转染组和第4转染组,分别用anti-miR-con、anti-miR-485-5p、si-con和si-DHRS3分别转染/共转染BMSCs细胞。转染9 d后,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率,实时荧光定量-聚合酶链式反应检测各组细胞中miR-485-5p和DHRS3 mRNA的表达,Western blot检测DHRS3、成骨分化蛋白标志物核心结合蛋白因子2(RUNX2)、骨钙蛋白(OCN)和骨形态发生蛋白2(BMP2),增殖蛋白周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1),Notch受体1(Notch 1)、Notch配体(Jagged1)和Split多毛增强子1(Hes1)蛋白的表达。结果第1转染组、第2转染组、第3转染组和第4转染组的细胞存活率分别为(100.58±10.09)%,(132.50±11.45)%,(135.62±12.66)%和(110.96±9.58)%;DHR3蛋白相对表达量分别为0.31±0.03,0.59±0.05,0.62±0.06和0.43±0.05;RUNX2蛋白相对表达量分别为0.33±0.04,0.49±0.03,0.52±0.06和0.37±0.07;OCN蛋白相对表达量分别为0.35±0.04,0.56±0.06,0.62±0.04和0.39±0.05;BMP2蛋白相对表达量分别为0.32±0.04,0.65±0.06,0.75±0.07和0.41±0.05;和Notch1蛋白相对表达量分别为0.45±0.04,0.74±0.07,0.77±0.06和0.55±0.05。第2转染组与第1转染组比较、第4转染组与第3转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-485-5p靶向DHRS3通过Notch信号调控BMSCs细胞增殖和成骨分化。