15脱氧前列腺素J2对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的研究15脱氧前列腺素J2(15-deoxy-Δ12,14-prostaglandin J2,15d-PGJ2)对体外培养的人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法不同浓度的15d-PGJ2干预体外培养的HepG2细胞,采用MTT比色法检测细胞增殖能力,3H-TdR掺入实验检测细胞DNA合成速率,RT-PCR和Western blot检测PPARγmRNA和蛋白表达情况,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期;使用GW9662和/或转染pSG5-PPARγ真核表达质粒来观察PPARγ通路在15d-PGJ2抑制HepG2细胞增殖中的作用,并使用pGCsi-PPARγ转染观察PPARγ沉默后15d-PGJ2对HepG2细胞增殖作用的影响;最后采用凝胶迁移电泳实验(EMSA)检测NF-κB的DNA结合活性。结果 15d-PGJ2作用于HepG2细胞后能够导致使细胞增殖受到抑制、DNA合成速率减慢,并诱导了细胞凋亡,此作用呈一定的剂量依赖关系;在上述过程中,G0/G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例明显减少,但PPARγmRNA和蛋白的表达并没有显著变化。GW9662可以部分拮抗15d-PGJ2的增殖抑制作用,但转染pSG5-PPARγ可以逆转GW9662的作用;15d-PGJ2在20μmol/L时对pGCsi-PPARγ转染的HepG2细胞仍可以表现出增殖抑制效应,EMSA结果表明其在50μmol/L时明显抑制了NF-κB的DNA结合活性。结论 15d-PGJ2能够抑制HepG2细胞的增殖、诱导其凋亡并干扰细胞周期,表现出明显的抑瘤作用,此过程涉及PPARγ依赖途径和非依赖途径,而其中PPARγ非依赖途径可能与其抑制NF-κB的作用有关。

15-脱氧前列腺素J2在大鼠缺氧性神经细胞损伤中的作用

目的观察环氧合酶-2的代谢产物15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)在原代培养的大鼠皮质神经细胞损伤中的作用。方法原代培养大鼠皮质神经细胞,随机分为未处理组、缺氧再复氧组、不同浓度15d-PGJ2处理的缺氧再复氧组。用噻唑蓝(MTT)比色法测定神经细胞生存率,用DNA凝胶电泳法检测神经细胞凋亡情况。结果 15d-PGJ2具有剂量依赖性保护神经细胞免于缺氧导致的死亡的作用,15d-PGJ2在10μmmol/L以上保护神经细胞,与未处理组比较差异有统计学意义(P<0.01);15d-PGJ2预处理组皮质神经细胞凋亡的DNA所出现的梯形裂解条带比单纯缺氧再复氧组明显减轻。结论环氧合酶-2代谢产物15d-PGJ2参与了神经细胞死亡、凋亡的病理过程,减轻缺氧再复氧后神经细胞的损伤。

15-脱氧前列腺素J_2对非酒精性脂肪肝大鼠影响的研究

目的研究15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的治疗作用。方法高脂饲料喂养Wistar大鼠12周制备NAFLD大鼠模型,再将其随机分为HI组(15d-PGJ2高剂量干预组)、LI组(15d-PGJ2低剂量干预组)、MC组(模型对照组);将普通饲料喂养大鼠作为NC组(正常对照组)。干预2周后检测肝组织匀浆中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC),血清丙氨酸转氨酶(ALT)、TG、TC及血糖(GLU)的含量,观察各组大鼠的肝组织病理学变化。结果高脂饮食可引起大鼠肝脏脂肪变性。HI组所有检测指标及LI组肝内TC水平均高于NC组;LI组和NC组所有检测指标及HI组ALT、TC、TG水平均低于MC组;HI组ALT、TG、GLU水平均高于LI组,差异有统计学意义(P<0.05)。HI组、LI组肝组织脂肪变性程度较MC组改善更明显。结论 15d-PGJ2可有效改善NAFLD大鼠的肝脏病变。

15脱氧前列腺素J_2对同型半胱氨酸诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨15脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的抑制作用和对细胞外信号调节蛋白激酶(ERK1/2)的作用。方法:用不同浓度的Hcy和15d-PGJ2对大鼠VSMCs进行刺激,以3H-TdR掺入方法观察15d-PGJ2对Hcy诱导大鼠VSMCs增殖的抑制作用,以Western印迹方法分析ERK1/2蛋白表达和ERK1/2磷酸化水平。结果:15d-PGJ2可明显抑制Hcy诱导的大鼠VSMCs增殖,但对Hcy诱导的ERK1/2磷酸化无明显作用。结论:15d-PGJ2可能通过MAPK/ERK1/2信号途径的下游步骤抑制Hcy诱导的大鼠VSMCs增殖。

15-脱氧前列腺素J_2对脂肪肝大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达的影响

目的观察15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)表达的影响。方法普通饲料喂养的雄性Wistar大鼠作为正常对照组8只;高脂饲料喂养雄性Wistar大鼠建造NAFLD模型16只,将建模成功的大鼠随机分为模型对照组8只和实验组8只。模型对照组大鼠腹腔注射生理盐水2ml·kg-1·d-1;实验组大鼠腹腔注射15d-PGJ210μg·kg-1·d-1。干预2周后处死各组大鼠,检测各组肝组织匀浆总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量,苏木精-伊红(HE)染色光镜下观察各组大鼠肝组织的病理改变,免疫组织化学法检测各组大鼠肝组织PPAR-γ、TNF-α和IL-6的表达。结果模型对照组肝组织总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平明显高于正常对照组,TC(1.27±0.26)mmol/g vs(0.74±0.18)mmol/g、TG(1.56±0.27)mmol/g vs(1.13±0.39)mmol/g(P<0.01);实验组肝组织TC、TG水平明显低于模型对照组,TC(1.01±0.22)mmol/g vs(1.27±0.26)mmol/g、TG(1.15±0.20)mmol/g vs(1.56±0.27)mmol/g(P<0.05)。光镜下未见正常对照组肝组织病理形态学异常;模型对照组可见大量肝细胞脂肪变性及肝组织多处点状坏死;实验组大鼠肝细胞脂肪变性及点状坏死较模型对照组减轻;正常对照组肝组织PPAR-γ普遍表达而TNF-α和IL-6几乎不表达;实验组肝组织PPAR-γ表达强于模型对照组,而TNF-α和IL-6表达低于模型对照组。结论 15d-PGJ2可以缓解NAFLD大鼠肝细胞脂肪变性和坏死、降低肝组织TC和TG水平,这种效果可能是通过增加肝脏PPARγ和减少TNF-α、IL-6的表达来实现的。

15-脱氧前列腺素 J_2体外诱导肝癌细胞失巢凋亡的研究

目的研究15-脱氧前列腺素 J_2(15-d-PGJ_2)体外诱导人肝癌细胞系 BEL-7402细胞失巢凋亡的特性,并探讨其机制。方法在纤连蛋白(Fn)或多聚2-羟乙基甲基丙烯酸脂(poly-HEMA)包被的培养板中,应用光学显微镜观察不同因素处理后的细胞生长状态和形态学变化;应用 DNA 片段分析和流式细胞术观察细胞的凋亡变化;应用 Western 印迹技术观察细胞焦点黏着斑激酶(FAK)和磷酸化 FAK(p-FAK)蛋白质的表达;应用小 RNA 干扰技术来沉默 FAK 基因。结果在 Fn 包被的培养板中贴壁生长的 BEL-7402细胞经15-d-PGJ_2处理24 h 或48 h 后,细胞变圆,脱离细胞外基质呈悬浮状态改变,而且这种改变呈时间和剂量依赖性关系;其中以浓度为20 μmol/L 的15-d-PGJ_2最为显著,24 h 和48 h 时间点细胞的黏附比率分别为(66.0±3.6)%和(35.0±5.0)%,与肝癌细胞对照相比差异有统计学意义(P<0.05)。经流式细胞术和 DNA 片段分析后发现肝癌细胞发生了失巢凋亡;Western 印迹显示 p-FAK 蛋白下降,而 FAK 蛋白质表达水平未发生改变。结论 15-d-PGJ_2在体外能够诱导 BEL-7402细胞失巢凋亡,这一过程与细胞 FAK 磷酸化水平降低有关。

15-脱氧-前列腺素J_2对单核巨噬细胞中巨噬细胞移动抑制因子表达的影响及作用机制

目的研究15-脱氧-前列腺素J2(15 d-PGJ2)对小鼠单核巨噬细胞中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)表达的影响及作用机制。方法以小鼠单核巨噬细胞系J774A.1为研究对象,分别给予以下处理:(1)脂多糖(LPS)组:1μg/ml LPS孵育1 h;(2)正常对照组:PBS孵育1 h;(3)阴性对照组:5μmol/L 15 d-PGJ2孵育1 h;(4)15 d-PGJ2组:5μmol/L 15 d-PGJ2预孵育1 h,1μg/ml LPS孵育1 h;(5)GW9662组:10μmol/L GW9662预孵育1 h,5μmol/L 15d-PGJ2孵育1 h,1μg/ml LPS孵育1 h;(6)Vehicle组:即GW9662对照组,使用GW9662的溶剂DMSO替代GW9662。采用免疫荧光和琼脂糖凝胶电泳技术检测小鼠单核巨噬细胞系J774A.1中MIF的表达,RT-q PCR和Western blot技术检测15 d-PGJ2对LPS诱导的J774A.1炎症反应模型中MIF mRNA和蛋白水平变化情况。观察GW9662对15 d-PGJ2调节MIF作用的影响,采用高内涵分析技术检测15 d-PGJ2是否调节巨噬细胞炎症反应时过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的核转位。结果 J774A.1在基因和蛋白水平均表达MIF。LPS组细胞中MIF mRNA表达上调到正常对照组的1.75倍(P=0.037),15 d-PGJ2组细胞中MIF mRNA表达上调被抑制,下调至LPS组的50%(P=0.026),MIF蛋白水平变化情况与mRNA水平相一致。GW9662逆转了15 d-PGJ2对MIF mRNA表达的下调(P=0.016)。高内涵自动成像系统分析结果显示,15 d-PGJ2处理组细胞中PPAR-γ的核质比上调至LPS组的1.39倍(P=0.003)。结论 15 d-PGJ2可抑制单核巨噬细胞中MIF的表达,该作用可能依赖于PPAR-γ。

15-脱氧-Δ^(12,14)-前列腺素J_2对大鼠酸性胃内容物吸入性肺损伤的保护作用

目的:探讨15-脱氧-Δ^(12,14)-前列腺素J_2(15-deoxy-Δ^(12,14)-prostaglandin J2,15d-PGJ_2)在大鼠酸性胃内容物(combined acid and gastric particles,CAGP)吸入性肺损伤中的保护作用。方法:制备大鼠CAGP模型,将20只大鼠模型随机分为对照组与治疗组,每组10只。对照组:气管内滴注CAGP,腹腔内注射PBS;治疗组:气管内滴注CAGP,腹腔内注射15dPGJ_2。肺损伤后4h和12h,两组各取5只大鼠采集标本,测定动脉血氧分压(PaO_2)、肺组织湿重/干重比值(W/D)、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)总蛋白浓度、BALF白细胞计数和分类计数、BALF和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度、肺组织苏木精-伊红(H-E)染色炎症评分等指标。结果:与对照组比较,损伤后4h和12h,治疗组大鼠肺组织H-E染色炎症程度减轻,肺组织炎症评分下降,动脉血压分压(PaO_2)升高,肺组织W/D、BALF总蛋白浓度、白细胞总数和中性粒细胞数均下降,BALF和血清TNF-α浓度下降(P<0.05)。结论:15d-PGJ_2能减轻大鼠CAGP吸入性肺损伤和肺部炎症水平,改善动脉血氧分压。

15-脱氧前列腺J2对糖尿病脑缺血再灌注损伤大鼠脑梗死体积及核转录因子-κb的影响

目的观察15-脱氧前列腺J2(15d-PGJ2)对糖尿病脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积及核转录因子-κb(NF-κb)的影响。方法将80只成年SD大鼠随机分为假手术组、正常血糖组、糖尿病组及15d-PGJ2干预组,每组20只。采用链脲佐菌素诱导糖尿病,应用改良的Zea-Longa法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。15d-PGJ2干预组在成功制备糖尿病大鼠模型后,给予15d-PGJ2 200μg/kg·d腹腔注射21 d后制作大脑中动脉缺血再灌注模型。再灌注后3 h腹腔注射15d-PGJ2 400μg/kg,以后给予15d-PGJ2 200μg/kg·d腹腔注射,连续6 d。分别于再灌注24 h及7 d对各组大鼠进行神经功能评价,TTC染色计算脑梗死体积,常规HE染色观察组织形态变化;采用ELISA法检测NF-κb水平。结果与假手术组比较,正常血糖组、糖尿病组、15d-PGJ2干预组再灌注24 h及7 d的神经功能评分及NF-κb水平显著升高,梗死体积均显著增加(均P<0.05)。与糖尿病组比较,正常血糖组再灌注24 h及7 d的神经功能评分、NF-κb水平及脑梗死体积均显著降低(均P<0.05)。15d-PGJ2干预组大鼠再灌注24 h及7 d的神经功能评分、NF-κb水平及脑梗死体积显著低于糖尿病组及正常血糖组(均P<0.05)。结论高血糖可加重缺血及再灌注后的脑损伤。15d-PGJ2可以减轻糖尿病及脑缺血对大脑的损伤,改善神经功能,减少脑梗死体积及NF-κb含量。

15-脱氧-△^12，14-前列腺素J2在脑缺血中的神经保护作用

15-脱氧-A12,14-前列腺素J2（15-deoxy-△^12，14-prostaglandinJ2，15d-PGJ2）是过氧化物酶体增殖物激活受体1的天然配体之一，在脑缺血中发挥重要的保护作用。文章对15d-PGJ2神经保护机制的研究进展进行了综述。

PPARγ的配体15d-PGJ_2对人类胃癌细胞生长的影响

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)的配体15-脱氧前列腺素J2(15-deoxy-△12,14-prostaglandin J2,15d-PGJ2)对人类胃癌MGC803细胞生长的影响及其机制。方法:RT-PCR检测PPARγ和survivin mRNA,Western blot检测PPARγ、survivin、S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)和p27蛋白;MTT法及流式细胞术检测细胞增殖、凋亡及细胞周期分布;Hoechst 33342染色观察细胞凋亡的形态学变化。结果:PPARγmRNA和蛋白在MGC803细胞均表达。15d-PGJ2作用MGC803细胞24 h后,5、10、20、30、40μmol/L组的增殖抑制率和凋亡率均高于0μmol/L组(P<0.001),且随浓度的增加而升高。30μmol/L组的MGC803细胞增殖抑制率和凋亡率,随时间的延长而升高。G0/G1期细胞比例,30μmol/L组明显高于0μmol/L组(P<0.001);S和G2/M期细胞比例,30μmol/L组均明显低于0μmol/L组(分别为P<0.001,P<0.01)。随15d-PGJ2作用MGC803细胞浓度的增加,sur-vivin mRNA和蛋白及Skp 2蛋白的表达均降低,p27蛋白表达升高。结论:15d-PGJ2抑制人胃癌MGC803细胞的增殖、诱导其凋亡并将其阻滞在G0/G1期,survivin和Skp 2表达下调及p27表达上调在这个过程中起重要作用,提示15d-PGJ2可能对治疗胃癌有效。

PPARγ激动剂15d-PGJ_2在大鼠肝脏缺血-再灌注损伤中的保护作用及机理

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)在大鼠肝脏缺血-再灌注损伤中的保护作用及机理。方法建立70%的大鼠肝脏缺血-再灌注损伤模型,40只SD大鼠随机均分为4组:假手术组、缺血-再灌注损伤组(缺血-再灌注组)、15d-PGJ2预处理组(15d-PGJ2组)及15d-PGJ2+GW9662预处理组(15d-PGJ2+GW9662组)。再灌注后,取静脉血检测肝血清酶(ALT、AST)水平,取肝脏组织检测髓过氧化物酶(MPO)活性、NF-κB活性、TNF-α含量和ICAM-1表达。结果与假手术组相比,其余3组血清ALT和AST水平、肝脏组织MPO和NF-κB活性、TNF-α含量和ICAM-1表达均增加(P<0.05)。与缺血-再灌注组相比,15d-PGJ2组血清ALT和AST水平、肝脏组织MPO和NFκ-B活性、TNF-α含量和ICAM-1表达均明显降低(P<0.05);而15d-PGJ2+GW9662组与缺血-再灌注组相比有差异但无统计学意义(P>0.05)。与15d-PGJ2组相比,15d-PGJ2+GW9662组血清ALT和AST水平、肝脏组织MPO和NF-κB活性、TNF-α含量和ICAM-1表达明显增加(P<0.05)。结论PPARγ激动剂15d-PGJ2对肝脏缺血-再灌注损伤有保护作用,其机理可能是通过PPARγ途径抑制NFκ-B活性,减少TNF-α和ICAM-1炎症介质的释放实现的。

PPARγ激动剂15d-PGJ_2对大鼠肝缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂15d-PGJ2对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中细胞凋亡的作用及可能的机制。方法建立70%的大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,40只SD大鼠随机均分为4组:假手术组(SO组)、缺血再灌注损伤组(IR组)、15-脱氧前列腺素J2预处理组(15d-PGJ2组),15d-PGJ2+GW9662预处理组(15d-PGJ2+GW9662组)。再灌注后,取静脉血检测肝血清酶(ALT、AST)水平,取肝脏组织TUNEL法检测缺血肝脏细胞凋亡指数(apoptotic index,AI),免疫组化检测Bcl-2、Bax、Caspase-3表达。结果与SO组相比,其他3组血清ALT和AST水平、肝脏细胞AI、Bax、Bcl-2及Caspase-3均升高(P<0.05)。与IR组相比,15d-PGJ2组血清ALT和AST水平、肝脏细胞AI、Bax及Caspase-3表达降低,Bcl-2表达升高(P<0.05);而15d-PGJ2+GW9662组与缺血再灌注组相比差异无显著性(P>0.05)。与15d-PGJ2组相比,15d-PGJ2+GW9662组血清ALT和AST水平、肝脏细胞AI、Bax及Caspase-3表达增加,Bcl-2表达减少(P<0.05)。结论PPARγ激动剂15d-PGJ2对肝脏缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能是通过PPARγ激活上调Bcl-2、下调Bax的表达和抑制Caspase-3活性实现的。

15d-PGJ_(2)抑制LPS对巨噬细胞的毒性作用

目的探讨15脱氧前列腺素J2(15dPGJ2)作用下脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对巨噬细胞毒性作用的影响。方法体外培养Wistar大鼠腹腔巨噬细胞,加入LPS(终浓度为10μg/ml)的同时加入终浓度为2μg/ml的15dPGJ2,用MTT法检测巨噬细胞活力;用硝酸还原酶法测一氧化氮(NO)的浓度。结果巨噬细胞经LPS(10μg/ml)处理后,于24h开始MTT值明显下降,与对照组、15dPGJ2组相比,差异有显著性(P<0.05),LPS+15dPGJ2组与其他3组相比,MTT值在48h后表现出显著性差异(P<0.05),LPS组NO在前24h内释放明显增多,高于对照组、15dPGJ2组和LPS+15dPGJ2组(P<0.05),24h后NO释放减少。LPS+15dPGJ2组NO的释放在24h后均高于对照组和15dPGJ2组,差异有显著性(P<0.05)。结论15dPGJ2能部分拮抗10μg/mlLPS对巨噬细胞的毒性作用,可能与NO的产生有关。提示15dPGJ2可作为维持巨噬细胞活性药物,以防止内毒素诱导的免疫损伤。

15d-PGJ2对非酒精性脂肪肝大鼠的保护作用

目的探讨15-脱氧前列腺素J2(15 d-PGJ2)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的保护作用。方法将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组)和模型组,分别给予普通饲料和高脂饲料喂养,12周末制成NAFLD大鼠模型;再将模型组随机分为4组:15 d-PGJ2低剂量治疗组(LT组),15 d-PGJ2高剂量治疗组(HT组),模型对照组(MC组),饮食疗法组(DT组)。治疗2周后处死大鼠,观察各组大鼠的肝组织病理变化,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、空腹血糖(GLU)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的水平。结果与MC组大鼠相比,LT组、HT组及DT组大鼠血清ALT、AST、ALP、GLU、TG、TC的水平降低,肝细胞脂肪变性及炎症浸润均有减轻,其中以LT组改变最明显(P<0.05)。结论适量的15d-PGJ2对NAFLD大鼠有明显的保护作用,可以改善大鼠的NAFLD。

PPAR-γ配体联合顺铂对人肺癌PLA-801D细胞增殖抑制及诱导凋亡作用

目的:探讨15-脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)联合顺铂(DDP)对人肺癌PLA-801D细胞生长的影响及其诱导凋亡的机制。方法:取生长良好的人肺癌PLA-801D细胞株,接种于96孔培养板,培养24 h后分别加入不同浓度15d-PGJ2(0、5、10、20、40、80μg.L-1)(单纯使用15d-PGJ2各组)和联合加入15d-PGJ2与DDP(3 mg.L-1)(15d-PGJ2+DDP各组)(0μg.L-1为对照组),作用24 h后用倒置显微镜观察每组细胞形态学的变化。采用MTT比色法检测15d-PGJ2联合顺铂对人肺癌PLA-801D细胞增殖抑制作用;DPA法检测其活性;流式细胞术检测其诱导细胞凋亡及周期的变化。结果:当低浓度15d-PGJ2(5、10和20μg.L-1),作用于人肺癌PLA-801D细胞时,细胞生长抑制率、凋亡率、DNA片段化比率和caspase-3活性与对照组比较差异均无显著性(P>0.05),当浓度为40μg.L-1时,细胞生长抑制率、凋亡率、DNA片段化比率和caspase-3活性均高于对照组(P<0.01);当15d-PGJ2(10μg.L-1)和DDP(3 mg.L-1)联合应用时,即可使人肺癌PLA-801D细胞生长抑制率、细胞凋亡率、DNA片段化比率和caspase-3活性均较单独使用15d-PGJ2明显增高(P<0.01)。当15d-PGJ2(40μg.L-1)作用人肺癌PLA-801D细胞24 h后,G0/G1期细胞比例明显高于对照组(P<0.01),S和G2/M期细胞比例均明显低于对照组(P<0.01)。结论:单独使用15d-PGJ2在高浓度时可以诱导人肺癌PLA-801D细胞凋亡,15 d-PGJ2与DDP联合应用时,前者低浓度即可诱导人肺癌PLA-801D细胞凋亡作用增强。

PPARγ配体对人肺癌细胞95-D增殖的影响及机制探讨

目的观察过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)的合成配体曲格列酮(TGZ)和天然配体15-脱氧前列腺素J2(15-PGJ2)对肺癌95-D细胞增殖活性及凋亡的影响,并探讨其机制。方法将对数生长期的95-D细胞分为TGZ组、15-PGJ2组、对照组,分别加入500μl的TGZ溶液、15-PGJ2溶液、DMSO混合溶液培养;采用MTT法检测95-D细胞的增殖能力,采用流式细胞仪检测95-D细胞凋亡率和细胞周期变化,采用免疫细胞化学法检测95-D细胞中的PPARγ。结果与对照组比较,TGZ、15-PGJ2组95-D细胞增殖抑制率显著增加(P均<0.01),且存在时相性;95-D细胞凋亡率增加,S期细胞比例升高,G1期细胞比例降低;95-D细胞中PPARγ表达水平增加。结论PPARγ配体TGZ、15-PGJ2可抑制95-D细胞增殖,诱导其凋亡;该作用与PPARγ表达增加有关。

15d-PGJ_2减弱香烟提取物抑制人脐静脉内皮细胞迁移

目的探讨15-脱氧-Δ12,14-前列腺素J2(15d-PGJ2)对香烟提取物(CSE)抑制人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移的保护作用。方法 "划痕法"检测HUVECs的迁移。毛细管样成管实验检测HUVECs的血管新生。Western blot检测occludin蛋白表达。结果与对照组相比,CSE显著抑制HUVECs迁移,使单个视野划痕内细胞数由629±28降低至364±17(P<0.01),15d-PGJ2干预可使细胞数回升至546±20(P<0.01)。CSE抑制HUVECs血管新生,15d-PGJ2可逆转CSE对HUVECs血管新生的抑制。与对照组相比,CSE使HUVECs occludin蛋白表达量由0.37±0.04降至0.12±0.03(P<0.01)。15d-PGJ2干预可使其回调至0.28±0.04(P<0.01),但仍低于对照组(P<0.05)。结论 CSE对HUVEVs迁移的抑制作用可能是通过下调occludin蛋白的表达实现的。15d-PGJ2减弱CSE下调occludin表达而逆转CSE对HUVECs迁移的抑制。

PPARγ激活物对体外肥大心肌细胞的影响

目的 :探讨PPARγ激活物吡格列酮和 15脱氧前列腺素J2 (15d PGJ2 )对体外肥大心肌细胞的影响。方法 :新生大鼠的原代培养心肌细胞 ,以血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激建立体外肥大心肌细胞模型 ,并用不同浓度的吡格列酮和 15d PGJ2 作用于上述细胞。采用RT PCR法检测肥大心肌细胞特征性基因心钠肽 (ANP)和脑钠肽 (BNP)的mRNA表达 ,以3 H 亮氨酸掺入实验检测心肌细胞蛋白合成速率 ,并分析心肌细胞表面积。结果 :所建立的肥大心肌细胞模型呈现心肌细胞表面积、ANP和BNP的mRNA表达以及蛋白合成速率均为增加 ;而吡格列酮和 15d PGJ2 可以逆转这些变化 ,并呈一定的剂量依赖性。结论 :PPARγ激活物吡格列酮和 15d PGJ2 对体外心肌细胞肥大有抑制作用 。