绿豆幼苗UV-B敏感性与环丁烷嘧啶二聚体累积的关系

【目的】明确绿豆品种间UV-B敏感性的差异与环丁烷嘧啶二聚体(CPDs)累积间的关系。【方法】采用单克隆抗体ELISA法,研究0.4W·m-2UV-B对两绿豆品种中绿-1和秦豆-20(PhaseolusraditusL.cv.Zhonglü-1andQindou-20)幼苗叶片DNA链内环丁烷嘧啶二聚体(CPDs)的诱导形成及其光、暗修复,并对CPDs累积与绿豆UV-B敏感性的关系进行分析。【结果】两品种绿豆幼苗经UV-B处理4d后,中绿-1叶片的生物量和净光合速率被抑制的程度明显低于秦豆-20,说明中绿-1对UV-B的敏感性低于秦豆-20。相应中绿-1叶片DNA中CPDs累积量和其形成能力也都低于秦豆-20,光修复能力明显高于秦豆-20,而两品种CPDs的暗修复能力基本相同,且均显著低于光修复能力。【结论】两品种幼苗CPDs形成能力和光修复能力的不同造成了两品种幼苗叶片在可见光下CPDs累积量的不同,进而可能导致了绿豆品种间UV-B敏感性的不同。另外,两品种CPDs形成能力的差异与紫外吸收物质含量有关。

色氨酸及其肽对cis-syn型1,3-二甲基胸腺嘧啶二聚体的光敏化裂解作用

通过荧光猝灭实验和测定二聚体裂解程度的辐照实验 ,研究色氨酸 (Trp)及其二肽色氨酰苯丙氨酸 (Trp Phe)对cis syn型 1,3 二甲基胸腺嘧啶二聚体 (DMTD)的光敏化裂解作用 .结果表明 ,色氨酸及其二肽在较强光 (λ >2 90nm)辐照下 ,主要通过双光子电离生成的水合电子 (e-aq)导致二聚体裂解 ,其次 ,通过激发单重态与二聚体间的电子转移导致二聚体裂解 .另外一导致二聚体裂解的可能途径 :色氨酸残基激发三重态与二聚体间的电子转移光敏化二聚体裂解 .

NaCl胁迫对UV-B辐射诱导的绿豆环丁烷嘧啶二聚体和紫外吸收物质含量变化的影响(英文)

将2个对UV-B敏感性不同的绿豆品种‘秦豆-20’和‘中绿-1’幼苗放在培养室内,进行0.4W/m^2 UV-B辐射和0.4%NaCl胁迫的单独或复合处理,研究了NaCl胁迫对UV-B辐射诱导的DNA伤害和修复的影响。结果显示:在NaCl胁迫下,(1)在光下抗UV-B的品种‘中绿-1’的环丁烷嘧啶二聚体(CPD)累积量降低,而敏感品种‘秦豆-20’的CPD累积量未发生变化;(2)两品种CPD形成量均比无NaCl胁迫时低;(3)抗UV-B品种DNA的光、暗修复能力均比无NaCl胁迫时高:(4)而敏感品种DNA的光修复能力比无NaCl胁迫时低、暗修复能力未发生变化。另外,CPD形成量与紫外吸收物含量间具有明显的负相关性。说明NaCl胁迫不仅影响2个绿豆品种幼苗的CPD形成量,而且影响DNA的光、暗修复能力,进而导致了CPD累积量发生变化,由此影响了幼苗的UV-B敏感性。结果也暗示CPD形成量的变化是由于紫外吸收物质含量的不同所导致的。

新磺酰脲类化合物N-[2-(4-甲基)嘧啶基]-N'-2-甲氧羰基苯磺酰脲的合成及其二聚体结构

合成并用X-射线晶体衍射法测定了标题化合物 (C14H14N4O5S, Mr = 350.35)的结构。晶体属正交晶系, 空间群为Pna21, 晶胞参数a = 13.242(4), b = 9.478(3), c = 24.889(8) ? V = 3123.7(17) 3, Z = 8, Dc = 1.490 g/cm3, m = 0.241 mm-1, F(000) = 1456。独立可观测点数为3268。最终偏离因子R = 0.0592, wR = 0.1217 (I > 2s(I) 2153), S = 1.122。X-射线衍射证实标题化合物分子晶体中存在2种构型, 分子中苯环所在的位置同嘧啶磺酰脲平面的取向相反。每种构型中嘧啶磺酰脲、苯环及甲氧羰基分别形成3个独立的平面共轭体系。除此之外, 经由O(1)N(6)和N(2)O(6)形成的分子间氢键以及苯环平面间的p-p 相互作用将2个分子结合在一起从而形成二聚结构。

手性金属配合物Δ,Λ-[Ru(IP)_2dppz]^(2+)对含G:T错配的环丁烷嘧啶二聚体识别和部分构型修复的分子力学研究

环丁烷嘧啶二聚体(CyclobutanePyrimidineDimer,CPD)是紫外线对DNA损伤导致皮肤癌的首要环节,XPC-hHR23B是最早作为对CPD的损伤识别剂的,但其识别效率很低.本文首次采用分子力学方法模拟了一种新的手性金属配合物?,Λ-[Ru(IP)2dppz]2+对含G:T错配的CPD双螺旋DNA的识别作用.模拟结果显示:金属配合物[Ru(IP)2dppz]2+的两个手性异构体都对含G:T错配的CPD双螺旋DNA具有识别作用,识别的过程体现了很强的手性选择性、沟选择性和位点特异性.同时,我们发现:在Λ-[Ru(IP)2dppz]2+插入到CPD后,形成CPD的两个T碱基由原来的敞口形状部分地转为近平行状,使其在构型上得到初步的修复.

胞核嘧啶氢键二聚体的电子拓扑性质研究

采用GAUSSIAN程序包,在B3LYP/6-311++G**水平下,对胞核嘧啶及其7种氢键二聚体进行了结构优化和能量分析。使用AIM2000程序,在分子中的原子理论框架下对这些体系进行了详尽的电子拓扑性质的理论研究。从理论的角度证明了这些氢键的存在并探讨了其性质,比较了各种不同类型的氢键及二聚体的稳定性,为实验研究提供了一定的理论参考数据。

6-甲基-4-羟基嘧啶二聚体氢键结构性质

运用密度泛函理论B3LYP方法和6-311+G*基函数对6-甲基-4-羟基嘧啶二聚体进行结构优化与频率计算.结果表明:6-甲基-4-羟基嘧啶二聚体存在两个稳定氢键异构体,均具有C2h对称性.二聚体分子间有强的相互作用,经基组重叠误差BSSE和零点振动能ZPE校正后的相互作用能为-63.285和-70.893 kJ.mol-1.氢键的形成导致H?O(N)伸缩振动频率红移.298.15 K和标准状态下,二聚体形成过程的Gibbs自由能为-16.780和-25.824 kJ.mol-1,显示6-甲基-4-羟基嘧啶二聚体的形成反应是一个热力学自发过程.

用EndoV和碱电泳法检测哺乳动物细胞嘧啶二聚体的切除修复

紫外线(UV)辐射是自然环境中重要的DNA致伤因子。UV辐射在DNA造成的最主要一类损伤产物是环丁烷嘧啶二聚体(pyrim-idine dimer,PD),它是由DNA中一条多核着酸链上两相邻嘧啶碱基各自的C5和C6共价连接形成的环丁烷结构。哺乳动物细胞主要通过切除修复途径移除PD,恢复DNA的正常结构。一种从噬菌体T4感染的E.coli中提取的T4核酸内切酶V(EndoV)能特异识别PD,并在该损伤位点切断磷酸二醋键,造成单链断裂。本文即以EndoV为探针,以其敏感位点(endonuclease-sensitive-site,ESS)

胸腺嘧啶-胞嘧啶二聚体光解离反应的动力学模拟

采用半经典动力学方法模拟了紫外辐射诱导下胸腺嘧啶-胞嘧啶二聚体(T<>C)光解离反应过程.采用FWHM=25 fs的激光激发游离的(T<>C),模拟发现解离是非协同过程,C5-C5′键先断裂,C6-C6′键随后断裂.解离后生成一个胸腺嘧啶单体和一个胞嘧啶单体,这两个分子在断键的同时衰减至基态.

不同抗氧化剂在紫外线所致人体皮肤环丁烷嘧啶二聚体形成中的作用

本实验应用碱性凝胶电泳技术探讨了活性氧自由基在紫外线照射人体皮肤形成环丁烷嘧啶二聚体中的作用。人皮肤ＤＮＡ加抗氧化剂后，经紫外线照射，Ｔ４Ｎ５切割，电泳，最后进行凝胶成像系统分析。结果可见，抗氧化剂对环丁烷嘧啶二聚体的形成起到一定的抑制作用，尤其是β胡萝卜素和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）比谷胱甘胱（ＧＳＨ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）的作用明显，但均未能完全阻止ＣＰＤ的形成，这提示活性氧自由基在ＣＰＤ的形成中起部分的介导作用。

胸腺嘧啶单体及环丁烷型胸腺嘧啶二聚体的表面增强拉曼散射

采用DFT-B3LYP方法,6-311G(d,p)(C,H,O原子)和lanl2dz(Ag原子)基组计算了胸腺嘧啶单体(Th)和DNA光损伤产物—环丁烷型胸腺嘧啶二聚体(Th_2)吸附在Ag纳米粒子上形成复合物的结构和表面增强拉曼散射(SERS).结果显示,Ag纳米粒子在胸腺嘧啶单体(Th)和环丁烷型胸腺嘧啶二聚体中最有利的吸附位点是O_7位,相比于单个分子,复合物Th-Ag,Th_2-Ag的结构和光谱发生了变化.对胸腺嘧啶单体分子,其SERS的增强因子为10,主要由N-H伸缩振动引起;复合物Th_2-Ag中,SERS增强了大约18倍,主要由C_2=O的伸缩振动引起,此增强机理属于极化率变化产生的静化学增强.

连续胸腺嘧啶二聚体的形成及其在PCR反应中的应用

探究紫外线照射下多个连续胸腺嘧啶对形成二聚体的影响及所形成的二聚体对DNA聚合酶作用下引物延伸的影响,并用含二聚体的引物获得具有单链粘性末端的PCR产物。通过对含有不同数量胸腺嘧啶的单链DNA进行紫外线照射,随后用与其互补的短引物在DNA聚合酶作用下进行延伸,通过电泳验证不同数量连续胸腺嘧啶二聚体对延伸反应阻隔的效果,最后使用含有二聚体的引物进行PCR扩增。当模板中含有2个胸腺嘧啶时,阻隔产物百分比为13.7%;当模板中含有4个连续胸腺嘧啶时,阻隔产物百分比为58.4%;PCR扩增产物的电泳结果表明形成了具有单链粘性末端的PCR产物。

实时RT-PCR检测二氢嘧啶脱氢酶mRNA的表达

目的 建立实时逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测二氢嘧啶脱氢酶mRNA的定量方法,并分别从 RNA水平与蛋白质水平检测二氢嘧啶脱氢酶在人体部分组织中的表达。方法 采用基于TaqMan探针技术的 实时RT PCR方法检测二氢嘧啶脱氢酶mRNA的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测其蛋白质表达水 平。结果 实时RT PCR检测二氢嘧啶脱氢酶的线性范围可达102～109拷贝数/μl,批内误差<5%。结论 这 一实时RT PCR的方法可以从纳克级的总RNA中检出二氢嘧啶脱氢酶的表达,并且ELISA结果与实时RT PCR 结果有较好的相关性。

水溶液中1，3-二甲基尿嘧啶光[2＋2]环加成的区域与立体选择性

以丙酮为光敏剂,研究了1,3二甲基尿嘧啶在水溶液中的光二聚作用.用1,3-二甲基尿嘧啶在溶液中辐照二聚生成四种环丁烷型二聚体,结果表明,这四种二聚体的比例与溶剂中丙酮的含量有关.最后对溶剂与这四种二聚体分布的关系作了相应的机理解释.

1,3-二甲基胸腺嘧啶光[2+2]环加成反应的区域和立体选择性研究

以丙酮为光敏剂 ,研究了 1,3 二甲基胸腺嘧啶 (DMT)在溶液中的光 [2 +2 ]环加成反应 ,DMT在溶液中辐照二聚生成 4种环丁烷型嘧啶二聚体 ,二聚体的比例与反应途径和温度有关 :通过基态聚集体的单重态二聚途径主要生成 (h t)型异构体 ,而扩散控制的三重态途径则有利于 (h h)型异构体的生成 ;升高反应温度对前一反应途径不利 ,对后一反应途径有利 ;反之亦反 .

二氢嘧啶脱氢酶在大肠癌的表达及其与5-氟尿嘧啶化疗敏感性的研究

本研究通过免疫组织化学检测大肠癌中二氢嘧啶脱氢酶（DPD）的表达情况,结合体外药敏试验,探讨DPD表达水平与5-氟尿嘧啶（5-FU）化疗敏感性的相关性,从中分析药物代谢相关酶的表达情况,为临床开展耐药指标筛查,指导大肠癌个体化疗提供理论依据。

血浆D-二聚体水平对消化系统恶性肿瘤病情的评估

目的探讨血浆D-二聚体(D-Di)水平对消化系统恶性肿瘤患者病情评估的价值。方法通过对90例消化系统恶性肿瘤患者血浆中D-Di浓度和血清癌胚抗原(CEA)测定,根据患者血D-Di和CEA浓度变化与肿瘤不同分期之间的关系等进行分析,并选取50名健康人检测血D-Di浓度作为对照组。结果与对照组相比,恶性肿瘤组患者血浆D-Di浓度明显升高(P<0.01);在胃癌无转移、周围淋巴结转移、远处脏器转移三组患者之间,血CEA浓度差异无统计学意义(P>0.05),而三组患者的血D-Di浓度差异有统计学意义(P<0.05);结肠癌患者发生转移组与无转移组血CEA及D-Di相比,血CEA及D-Di浓度明显升高(P<0.01)。结论D-Di可作为消化系统恶性肿瘤患者病情评估的指标之一。

消化系统恶性肿瘤放化疗前后血浆D-二聚体与血浆癌胚抗原变化及临床意义

目的探讨消化道恶性肿瘤患者化疗前后血浆D-二聚体及血清癌胚抗原的临床意义。方法测定63例消化道恶性肿瘤化疗前后血浆D-二聚体浓度及癌胚抗原浓度。结果化疗后疗效达完全缓解(CR)及部分缓解(PR)组D-二聚体阳性率26.47%,CEA阳性率38.23%;化疗后疗效为稳定(SD)组血浆D-二聚体阳性率66.67%,CEA阳性率60%;化疗后疗效进展(PD)组血浆D-二聚体阳性率78.57%,CEA阳性率64.29%。三组间比较,D-二聚体有差异P<0.05,CEA有差异P<0.05。结论测定消化系统恶性肿瘤患者血浆D-二聚体有助评估临床放化疗效果。

局部中晚期鼻咽癌患者血浆D-二聚体与纤维蛋白原检测的临床意义

目的:探讨血浆D-二聚体(D-Dimer)与血浆纤维蛋白原(FIB)在局部中晚期鼻咽癌患者体内的变化趋势及关系。方法:局部中晚期鼻咽癌患者共200例,健康体检者132例作为对照组。根据年龄分为两组:即≤65岁组和>65岁组;根据性别分为两组:男性组和女性组;再根据临床病理分期分为两组:III期组和IV期组。血浆D-二聚体水平的检测采用免疫比浊法,而血浆纤维蛋白原的检测采用凝固法。结果:1血浆D-二聚体及纤维蛋白原水平在局部中晚期鼻咽癌组中高于对照组(P<0.05);2≤65岁组与>65岁组相比,血浆D-二聚体及纤维蛋白原水平在>65岁组间浓度偏高(P<0.05);3血浆D-二聚体及纤维蛋白原水平在不同性别间的差异无统计学意义;4病理分期越重,血浆D-二聚体及纤维蛋白原水平越高,两者水平在病理分期IV组显著高于III期组(P<0.05)。结论:鼻咽癌患者晚期的纤溶系统发生改变,年龄及病理分期越高,血浆D-二聚体及纤维蛋白原水平越高。

冠心病病程中联合检测HCY、hS-CRP、LP(a)及D-二聚体的临床意义

目的:分析对冠心病患者在疾病期间进行D-二聚体(DD)、超敏C反应蛋白(hsCRP)、脂蛋白(a)[LP(a)]、同型半胱氨酸(HCY)联合检测的临床意义。方法:156例冠心病患者作为观察组,其中稳定型心绞痛(SAP)35例,不稳定型心绞痛(UAP)40例,急性心肌梗死(AMI)53例,隐匿型冠心病28例;将同期在体检的80例健康人员作为对照组。采集两组受检者晨起空腹静脉血液标本进行hs-CRP、DD、LP(a)、HCY水平检测。结果:观察组中hs-CRP、DD、LP(a)、HCY水平均高于对照组(P<0.05);观察组中,AMI患者HCY、hs-CRP、DD、LP(a)水平均>UAP患者>SAP患者>隐匿型冠心病患者,各组数据对比差异有统计学意义(P<0.05)。各项指标单独检测的阳性率中,AMI>UAP>SAP>隐匿型冠心病,且四项指标联合检测的阳性率明显大于单独检测的阳性率,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对冠心病患者进行hs-CRP、DD、LP(a)、HCY水平动态检测可以了解患者的疾病危险分层,病情转化情况,联合检测的阳性率高,对疾病的诊断、治疗方案的选择及治疗效果评估具有指导意义。