波生坦及氨氯地平对脱氧皮质酮-盐型高血压大鼠肾脏纤维化和微血管的影响

目的:比较波生坦和氨氯地平对脱氧皮质酮(DOCA)-盐型高血压大鼠(DHR)肾脏纤维化和微血管的影响,探讨内皮素-1(ET-1)在DHR肾脏损害中的作用及可能机制。方法:30只10周龄清洁级雄性SD大鼠,切除左侧肾脏,1周后存活24只,随机分成对照组、波生坦组、氨氯地平组和安慰剂组。对照组给予饮自来水,另3组予DOCA[50mg/(kg·周)]皮下注射,饮盐水,同时分别予波生坦、氨氯地平和安慰剂;5周时测定24h尿蛋白排泄量(24h-UPER)、血压、尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr);处死后评估病理切片肾小球硬化和肾小管间质损害程度;观察转化生长因子β1(TGF-β1)和Smad7的表达,分析肾组织毛细血管指数和增生内皮细胞数。结果:与对照组相比,安慰剂组血压、24h-UPER增加,肾脏有较明显的组织学改变,肾内TGF-β1和Smad7的蛋白表达明显上调,波生坦能较显著地抑制上述异常(P<0.05)。氨氯地平虽显著抑制血压升高,但对肾脏损害指标似无改善(P>0.05)。各组肾功能指标在正常范围内。安慰剂组中肾小球毛细血管指数(GCI)和肾小管周毛细血管指数(PCI)和增生内皮细胞数较对照组明显减少,波生坦、氨氯地平均能显著增加毛细血管和新生毛细血管数(P<0.01),但氨氯地平组增加程度不如波生坦组,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-β1与GCI、PCI和增生内皮细胞数具有显著的负相关性。结论:ET-1在DHR肾脏损害中发挥重要作用,其机制可能为通过上调TGF-β1和Smad7蛋白表达及直接抑制新生血管形成,间接加速毛细血管毁损而加重肾缺血和肾损害。

Bosentan对DOCA-盐敏感型高血压大鼠血管重构的影响

目的 :观察Bosentan对DOCA -盐敏感型高血压大鼠血管重构的影响 ,探讨其血管重构的机制。方法 : 4 0只 16 0～ 180 g的雄性SD大鼠 ,切除左侧肾脏 ,一周后随机分为 4组。 1组为空白对照组 ,饮自来水。术后一周 ,2、3、4组予脱氧皮质酮 (DOCA)皮下注射 ,5 0mg/kg/w ,饮 1%盐水 ;在开始DOCA上皮下注射的同时 ,予药物灌胃 ,2组 :安慰剂 :3组 :Bosentan 10 0mg/kg/d ;4组 ;依那普利 2 0mg/kg/d ,持续 4周。每周测尾动脉压。 4周后 ,抽血并处死动物取材 ,放免法测内皮素 (ET)、血浆肾素活性 (PRA)。光镜下观察主动脉组织学改变 ,测主动脉厚度、直径。结果 :血压 :2周后 ,2～ 4组血压轻度升高 ,与对照组相比 ,P <0 .0 5 ;4周后 ,Bosentan可以减缓血压上升幅度。血浆ET浓度 :安慰剂组、依那普利组、对照组差别无显著性 :Bosentan组与对照组比显著升高 (P <0 .0 1) ;血浆PRA浓度 :对照组比其他 3组显著增高 ,差异显著 (P <0 .0 1) ;依那普利组比安慰剂组更低 ,差异显著 (P <0 .0 1) ;血管厚度 :安慰剂组、依那普利组显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;Bosentan组与对照组于显著差异 ,明显低于安慰剂组 (P <0 .0 1) ;依那普利组与安慰剂组差别无显著性 ,(P >0 .0 5 )。结论 :Bosentan可延缓DOCA

四氢生物蝶呤通过蛋白激酶Cε途径对醋酸脱氧皮质酮-盐型高血压小鼠左心室舒张功能的影响

目的探讨四氢生物蝶呤(BH4)对醋酸脱氧皮质酮(DOCA)-盐型高血压小鼠左心室舒张功能及蛋白激酶Cε(PKCε)表达的影响。方法雄性C57BL/6小鼠分为手术组(n=50)与假手术组(n=40),手术组小鼠切除左侧肾脏后在颈部埋入DOCA药片,术后以普通饲料及1.05%NaCl溶液饲养,至术后14d,排除死亡小鼠6只后随机分为DOCA组(n=22)与DOCA+BH4组(n=22,2.5%的BH4溶液0.1mL/10g灌胃7d),假手术组小鼠仅游离左侧肾脏而不切除,并在颈部埋入安慰剂药片,术后以普通饲料及常规不含盐净化水饲养,然后随机分为假手术组(n=20)及假手术+BH4组(n=20)。动物在术后22d时处死,采用酶联免疫吸附试验、Western-blot以及高效液相色谱法(HPLC)测定心肌组织中环磷酸鸟苷(cGMP)、丙二醛、BH4和PKCε等指标的变化。处死前行鼠尾动脉压、心脏超声及血流动力学检查。结果与假手术组相比,DOCA组血压升高(P<0.05),DOCA+BH4组与DOCA组相比,血压差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组相比,DOCA组二尖瓣舒张早期血流速度与二尖瓣环舒张早期运动速度比值(E/E’)、舒张末期压力-容积关系(EDPVR)及Tau指数增高[分别为(38.49±3.91)比(25.77±5.21),(0.22±0.05)比(0.15±0.02)mm Hg/μL,(14.27±0.79)比(10.60±0.52)ms,均P<0.05]。与DOCA组相比,DOCA+BH4组EDPVR及Tau指数减小[(0.16±0.04)比(0.22±0.05)mm Hg/μL,(12.05±1.35)比(14.27±0.79)ms,均P<0.05]。与假手术组相比,DOCA组超氧化物歧化酶(SOD)及一氧化氮减少,给予BH4干预后,SOD及一氧化氮增多。Western-blot结果显示,与假手术组相比,DOCA组PKCε的表达减少(P<0.05),与DOCA组相比,DOCA+BH4组PKCε的表达增加(P<0.05)。结论 BH4无明显降压作用,但可改善左心室舒张功能不全,这可能与其通过PKCε途径降低体内氧化应激水平、提高一氧化氮表达等有关。