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酿酒酵母中脱氧羟腐胺赖氨酸合酶的结构研究
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作者 李珍珍 孟肖肖 +3 位作者 乔治 戴莉 杨晓娜 滕衍斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第12期1995-2001,共7页
目的通过研究酿酒酵母中脱氧羟腐胺赖氨酸合酶DHS(Dys1)的结构,揭示羟腐胺赖氨酸化修饰的分子机制,为人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)等高增殖性疾病的治疗提供理论基础和依据。方法利用大肠埃希菌BL21表达系统,体外构建表达载体并表达Dys1... 目的通过研究酿酒酵母中脱氧羟腐胺赖氨酸合酶DHS(Dys1)的结构,揭示羟腐胺赖氨酸化修饰的分子机制,为人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)等高增殖性疾病的治疗提供理论基础和依据。方法利用大肠埃希菌BL21表达系统,体外构建表达载体并表达Dys1。通过亲和层析、分子筛等方法分离纯化Dys1的蛋白质样品。在6%聚乙二醇(PEG)8000、0.1 mol/L羟乙基哌嗪乙磺酸(Hepes)pH 6.5、8%乙二醇的条件下得到Dys1的锥形晶体。用X射线衍射晶体,用CCP4i、Coot软件解析2.8分辨率下的Dys1三维晶体结构。结果Dys1的整体结构为四聚体,活性口袋和辅因子NAD+结合位点位于每个单体之间,单体的核心部位形成一个罗斯曼折叠,构成活性位点的氨基酸残基具有高度保守性。结论首次解析了Dys1的三维结构,发现了辅因子NAD+与酶的结合模式,证实了该酶四聚体的形式和N端的模体是其行使催化功能所必需的。 展开更多
关键词 酿酒酵母 脱氧腐胺 蛋白质表达纯化 晶体结构 X-射线晶体衍射
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DHPS在胃癌转移中的作用及其机制研究
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作者 苏文雨 王吉林 +1 位作者 熊华 房静远 《胃肠病学》 2018年第2期70-74,共5页
背景:脱氧羧腐胺赖氨酸合酶(DHPS)是催化真核生物翻译起始因子5A(e IF-5A)前体翻译后修饰的关键因子,而后者与肿瘤细胞增殖、侵袭的调控密切相关。目的:探讨DHPS在胃癌中的表达及其临床意义,探究其在胃癌转移中的可能作用机制。方法:使... 背景:脱氧羧腐胺赖氨酸合酶(DHPS)是催化真核生物翻译起始因子5A(e IF-5A)前体翻译后修饰的关键因子,而后者与肿瘤细胞增殖、侵袭的调控密切相关。目的:探讨DHPS在胃癌中的表达及其临床意义,探究其在胃癌转移中的可能作用机制。方法:使用含92例胃癌组织及其相应癌旁组织的组织芯片,以免疫组化染色检测DHPS表达,分析其表达与胃癌临床病理特征间的关联。利用DHPS-siRNA和DHPS抑制剂GC7分别干预人胃癌细胞株MGC803,以细胞侵袭实验检测细胞侵袭力,以ELISA法检测转移相关蛋白血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9表达。结果:62例(67.4%)胃癌组织DHPS高表达,其表达强度与肿瘤直径、TNM分期、浸润深度密切相关(P<0.05),与患者性别、年龄、淋巴结转移和远处转移无明显相关性(P>0.05)。DHPSsiRNA和GC7均可显著下调MGC803细胞的侵袭力,前者还可下调VEGF、MMP2和MMP9蛋白表达(P<0.05)。结论:DHPS在胃癌中表达升高,并与肿瘤浸润和进展密切相关。其参与胃癌细胞侵袭和转移的调控,有望成为胃癌诊断和治疗的新靶点。 展开更多
关键词 胃肿瘤 肿瘤转移 脱氧羧腐胺赖氨酸合酶 真核生物翻译起始因子5A 基因表达调控
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广西原发性肝癌抗血管生成治疗机制及围手术期肝功能评估研究 被引量:2
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作者 唐振勇 董小峰 +3 位作者 杨建荣 唐耘天 宋怀宇 殷舞 《中国临床新医学》 2018年第5期418-423,共6页
目的探讨广西原发性肝癌抗血管生成治疗机制和评估围手术期肝功能。方法通过体外分子生物学实验、体内动物实验、耐药实验结合肝癌患者生存资料进行分析;通过观察104例肝癌患者声脉冲辐射力成像(acoustic radiation force impulse,ARFI... 目的探讨广西原发性肝癌抗血管生成治疗机制和评估围手术期肝功能。方法通过体外分子生物学实验、体内动物实验、耐药实验结合肝癌患者生存资料进行分析;通过观察104例肝癌患者声脉冲辐射力成像(acoustic radiation force impulse,ARFI)评分与术后标准残肝体积(SRLV)进行直线回归分析;检测术前尿8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)及外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+表达。结果 COX-2/PGE2信号通路可调控肝癌中血管内皮生长因子(VEGF)的上游靶点蛋白缺氧诱导因子2α(HIF-2α)的活性;PEG-SS-PLL有效地转染si VEGF,其细胞毒性可忽略不计,且在体外和体内均显著降低了VEGF在mRNA和蛋白水平的表达,抑制了肿瘤生长;重度代偿不全的SRLV的临界值为503 ml/m2。术前ARFI评分及术后SRLV进行直线回归方程为SRLV(ml/m2)=149.6×ARFI评分(m/s)+194.1。术前尿8-OHd G水平显著高于对照组[(16.15±4.96)ng/mg Cr vs(12.13±4.66)ng/mg Cr]。结论 COX-2/PGE2通路的特异性抑制剂Meloxicam或Celecoxib可明显增强肝癌分子靶向药物索拉菲尼的药物敏感性,PEG-SS-PLL/si VEGF可能被应用于肝细胞癌的抗血管生成基因治疗;联合SRLV及肝纤维化程度测定对原发性肝癌术前安全切肝量评估有重要指导价值,对伴中、重度肝纤维化病例安全SRLV临界值为503 ml/m2;尿8-OHd G在肝癌诊治及疗效评价中有较高应用价值。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子2 ALPHA N(ε)-苄氧羰基-L- 血管内皮生长因子 标准残肝体积 8-羟基脱氧鸟苷 环氧-2
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转eIF-5A及其修饰酶DHS基因选育作物新品种的研究进展
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作者 梁霆 王雷 +2 位作者 李丽莉 赵金海 杨志兴 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期88-91,共4页
概述eIF-5A和DHS的研究与应用的进展。脱羧腐胺赖氨酸合酶(deoxyhypusine synthase,DHS)广泛分布在微生物、植物、动物的细胞中,同时参与真核细胞翻译起始因子eIF-5A(eukaryotic initiation factor-5A)的蛋白质合成及其延伸与折叠和翻... 概述eIF-5A和DHS的研究与应用的进展。脱羧腐胺赖氨酸合酶(deoxyhypusine synthase,DHS)广泛分布在微生物、植物、动物的细胞中,同时参与真核细胞翻译起始因子eIF-5A(eukaryotic initiation factor-5A)的蛋白质合成及其延伸与折叠和翻译后修饰功能。可见eIF-5A具有多种生物学功能,主要参与蛋白质翻译、合成蛋白质的延伸和折叠、细胞增殖、细胞周期的转化、mRNA的运输、降解、细胞衰老与凋亡等。而且eIF-5A是DHS的唯一底物,DHS的表达被抑制的植物表现为速生、抗逆性增强、种子的产量和植株增高,开花期与果实储存期延长的特征。转调控DHS和eIF-5A基因可能是一种农作物遗传育种的新途径。 展开更多
关键词 植物遗传改良 脱氧羧腐胺赖氨酸合酶 真核细胞翻译起始因子
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GC7在炎症及缺氧缺血性相关疾病中的作用 被引量:1
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作者 王啟华 周婺 +3 位作者 曹礼理 吴晓晗 袁成福 王俊杰 《生命的化学》 CAS 2021年第12期2556-2562,共7页
临床上,炎症和缺氧缺血与大多数疾病的病情严重程度及预后等密切相关。真核翻译起始因子5A(eukaryotic translation initiation factor 5A, EIF5A)在线粒体代谢功能的调节及促炎因子的释放中发挥重要作用,影响炎症及缺氧缺血的发生发展... 临床上,炎症和缺氧缺血与大多数疾病的病情严重程度及预后等密切相关。真核翻译起始因子5A(eukaryotic translation initiation factor 5A, EIF5A)在线粒体代谢功能的调节及促炎因子的释放中发挥重要作用,影响炎症及缺氧缺血的发生发展。N1-甲眯基-1,7-二氨基庚烷GC7(N1-guany1-1,7-diaminohep-tane)是EIF5A活化中的关键酶[脱氧羧腐胺赖氨酸合酶DHS(deoxyhypusinesynthase)]的抑制剂,可以通过抑制EIF5A的活性,进一步稳定线粒体功能,预防有毒活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成,减少炎症因子的释放,从而改善脑卒中、肾移植、肾缺血等缺氧缺血相关疾病和炎症相关疾病的症状。所以,GC7有望成为临床上治疗炎症和缺氧缺血相关疾病的不错选择。本文对GC7在炎症和缺氧缺血相关疾病中的作用及机制进行综述。 展开更多
关键词 N1-甲眯基-1 7-二基庚烷 真核翻译起始因子5A 脱氧羧腐胺赖氨酸合酶 缺氧 缺血 炎症
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Virus-induced silencing of a tobacco deoxyhypusine synthase gene 被引量:2
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作者 WANG Hongzhi MA Rongcai +2 位作者 LI Ruifen WANG Guoying WEI Jianhua 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2005年第23期2707-2713,共7页
A cDNA fragment corresponding to deoxyhy-pusine synthase gene NbDHS was isolated and cloned into potato virus X (PVX) vector for functional analysis in Nico-tiana benthamiana by using virus-induced gene silencing (VIG... A cDNA fragment corresponding to deoxyhy-pusine synthase gene NbDHS was isolated and cloned into potato virus X (PVX) vector for functional analysis in Nico-tiana benthamiana by using virus-induced gene silencing (VIGS). Plants agroinfected with recombinant virus vector PVX-NbDHS exhibited an increase in leaf biomass, delay in natural leaf senescence and flowering time, and decrease in leaf chlorophyll content. Semi-quantitative RT-PCR and Northern analysis showed that the transcript level of DHS was significantly lower in PVX-NbDHS infected plants. At the same time, the expression for eIF-5A, the target proteins of DHS in N. benthamiana, was concomitantly suppressed by semi-quantitative RT-PCR and Western analysis. From the phenotypic feature of the infected plants and the reduced expression abundance of DHS and eIF-5A, we concluded that NbDHS plays important roles in plant growth, development and senescence. The possible application of DHS gene in ge-netic modification of crops and horticultural plants was dis-cussed. 展开更多
关键词 烟草 脱氧腐胺基因 基因克隆 生长促进作用
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