利用拓扑异构酶Ⅱ提高转化效率及其在从细菌群落中克隆六六六γ异构体脱氯化氢酶基因中的应用(英文)

一个简单的技术上的调整被应用于利用T载体构建的基因组或宏基因组文库策略中。该技术利用拓扑异构酶Ⅱ将超螺旋引入松散的T-A环状重组分子,从而提高转化效率。利用该技术构建一个宏基因组文库,并从中克隆到一个六六六γ异构体脱氯化氢酶基因(linA-like)。

遗传稳定型六六六、多菌灵降解基因工程菌构建(英文)

通过PCR的方法从六六六降解菌Sphingomonas sp.BHC-A扩增出完整的脱氯化氢酶基因linA。将其克隆到含有mini-Tn5的自杀性质粒pUT4K上,构建成质粒pUT/mini-Tn5-linA.通过三亲杂交,在辅助质粒RK600的帮助下,将pUT/mini-Tn5-linA转移到一株高效降解多菌灵菌株Rhodococcus sp.DJL-6中。利用mini-Tn5的转座作用将linA基因整合到DJL-6的染色体DNA上,得到工程菌株DJL-6A。该工程菌具有同时降解多菌灵和六六六的功能,且对于初始浓度为0.05μg/mL和5μg/mL的六六六的降解活性与亲本菌株BHC-A相当。在不加任何选择压力的条件下工程菌株进行连续传代,结果证明linA基因可以持续稳定的存在于宿主的染色体DNA上。

害虫抗药性——第二讲 害虫抗药性的生化机理

害虫对农药为什么发生抗性,到目前为止,虽然还没有完全搞清,但目前已经明确的是:害虫抗药性的产生是大量使用农药,长期选择的结果;抗性是可以遗传的,它是受遗传物质——抗性基因(R)所控制;大量使用农药以后,含有各种抗性基因的个体在害虫群体内发展,引起了害虫生化机理的改变,从而产生了抗性。因此,害虫生化机理的改变是发生抗性的直接原因,而抗性基因的发展是产生抗性和日益加强的根本原因。本文主要讲为什么害虫生化机理的改变是产生抗性的直接原因。