同种脱矿骨基质研究中专利文献的应用

背景:专利是知识产权中科技含量高的重要组成部分,专利文献的利用在很多方面都有重要作用。目的:综述国内外常用专利网站的检索方法,研究专利检索在临床研究及科研中的应用,以指导临床研究者增加专利文献的利用。方法:详细介绍了专利的历史发展、分类方法及国内外常用的6个专利检索系统(欧洲专利数据库、美国专利商标局专利检索系统、德温特专利数据库、免费专利在线、国家知识产权局专利数据库及专利信息服务平台)的特点及检索方法,并以“脱矿骨基质”为例,展示专利的检索方法并对检索结果进行对比分析。结果与结论:通过检索专利文献,可获得最新的关于脱矿骨基质的信息;相比其他文献,检索结果更精准及新颖。在6个常用专利检索系统中,欧洲专利数据库收录的专利范围广,高级检索方式简单有效,容易掌握。国家知识产权局专利数据库有利于对某一技术领域的最新专利进行追踪。不同的专利检索系统有不同的检索规则,要按照各数据库专利信息的规范表述形式输入检索词进行检索;采用分类号+检索词组合的方式检索,可以提高效率。充分利用一些专利检索系统的管理功能,可及时了解国内外专利信息,跟踪最新科研成果,为科学研究和技术创新服务。

羟基磷灰石/脱矿骨复合物增高牙槽嵴的实验研究

【目的】观察羟基磷灰石 (HA) /脱矿骨复合物骨膜下植入增高牙槽嵴的成骨反应。【方法】在犬下颌体部及下颌磨牙区无牙颌牙槽骨顶部 ,骨膜下植入羟基磷灰石 /脱矿骨复合物为实验组 ,并设单独羟基磷灰石植入为对照组。经 3周、6周、12周和 2 4周后处死动物 ,取材作大体观察、组织学观察和扫描电镜观察。【结果】实验组术后 3周即见类骨质产生 ,材料和基骨界面开始结合 ;术后 6周材料和基骨大部分结合 ;12～ 2 4周新骨增多 ,相互连接 ,充满羟基磷灰石间隙并与之结合。对照组术后 3周未见新骨形成 ;术后 6周材料与基骨始见结合 ;术后 12～ 2 4周只见新骨从界面少许形成。【结论】骨膜下植入羟基磷灰石 /脱矿骨复合材料较之单纯的羟基磷灰石植入可见较快的新骨形成 ,材料和基骨界面较早结合 。

超临界流体技术制备脱矿骨基质／聚乳酸复合材料及相关性能

以聚乳酸（PLA）为塑型剂，通过超临界二氧化碳（SC-COe）合成法，将脱矿骨基质（DBM）构建成三维多孔组织工程骨材料，并选取最适复合分子量及最适复合比例，为骨库大量骨皮质不能被有效利用提供一种有效的解决办法。方法：取不同重均分子量的PLA，利用SC-CO2合成法制备多孔材料，通过孔隙率、生物力学性能评价，筛选出与DBM复合的最适分子量；将DBM与PLA按1／9、2／8、3／7、4／6、5／5、6／4、7／3质量比均匀混合，相同方法制备一系列复合多孔材料，通过孔隙率、生物力学性能、体外细胞毒性、扫描电镜观察，选择最适的DBM／PLA复合比例。结果：5万、10万、50万重均分子量PLA支架材料孔隙率分别为65．39％、76．46％、85．52％，10万重均分子量PLA支架材料抗压强度及弹性模量为264．03及49．71MPa，优于5万及50万重均分子量PLA；DBM与PLA不同比例复合，随着DBM含量的增加材料孔隙率逐渐变大，力学性能逐步下降，细胞毒性逐渐降低，当DBM含量为60％时，材料的孔隙率为79．71％，抗压强度及弹性模量为108．72及13．82MPa，细胞毒性为0级或1级，扫描电镜观察材料混合均匀，结合致密，材料孔隙分布均匀。结论：10万重均分子量的PLA更适合与DBM进行复合；6／4为DBM／PLA的最佳复合比例。

异体部分脱矿骨在颌面部骨缺损中的临床应用

应用异体部分脱矿骨对１０例颌面部骨缺损的患者进行修复。通过１～２４个月随访观察，ｘ线片或ＣＴ片显示：ｌ年后植骨区均为正常骨组织修复。患者面形对称，复视及眼球运动障碍消失。镶牙后咀嚼力恢复良好，无并发症。临床实践表明：异体部分脱矿骨具有组织相容性好，骨诱导能力强、机械强度高，易修剪塑形的优点。其移植修复后，面形恢复好、牙槽嵴高度恢复满意，是颌面部骨缺损修复的较理想材料，尤其适用于下颌骨大块骨缺损的修复。

羟基磷灰石、脱矿骨用于骨缺损修复的研究进展

骨缺损修复材料的研究是近百年来的热点课题之一。近年来 ,脱矿骨和羟基磷灰石作为骨缺损修复材料的研究 ,已取得较大进展 ,且已应用于临床 ,但两种材料存在各自的性能缺陷 ,使其应用的广泛性受到限制。本文对于这两种材料的近期研究进展加以汇总 ,以期有助于理想植骨材料的进一步研究。

脱矿骨的制备及其骨诱导活性的实验研究

目的研究运用超声与盐酸结合的方法制备脱矿骨的脱矿效果及骨诱导活性。方法采用超声条件下酒精脱脂、盐酸脱矿、冻干辐照的方法,制备人类脱矿皮质骨,检测其pH值、钙含量,并比较超声波对脱矿速度的影响。腹腔注射地塞米松造成大鼠的免疫抑制,将所制备脱矿骨异位植入大鼠的股部肌袋,术后不同时间取材,行组织学观察及碱性磷酸酶活性测定以观察脱矿骨的骨诱导活性。结果超声波条件下脱矿速度明显加快;脱矿骨异位植入后4周开始形成软骨细胞与软骨基质,5、6周形成较多的软骨组织,表现出良好的骨诱导活性。结论本研究所制备的脱矿骨具有良好的骨诱导成骨活性,是良好的骨移植材料。

脱矿骨基质明胶复合块状生物活性陶瓷人工骨修复下颌骨缺损的实验研究

本文作者采用同种脱矿骨基质明胶（ＢＭＧ）表面复合的人工骨植入缺乏骨膜的狗下颌骨骨缺损区，于术后４周、１２周、２０周进行组织学观察，四环素标记。发现随着ＢＭＧ的吸收，局部有多量的新骨生成，并可在人工骨表面沉积或长入其孔内；而对照组各期均未见有新骨形成。此结果表明复合植入能使人工骨表面产生骨性封套层，从而增加了生物活性陶瓷人工骨的韧性、抗折强度，提高了修复质量。

脱矿骨在免疫抑制大鼠体内的骨诱导活性

背景:传统的脱矿骨骨诱导活性检测方法是在小鼠股部肌袋异位植入模型,通过异位成骨方式评价骨诱导物质活性的高低,但由于动物宿主对植入材料存在着免疫排斥,影响了骨诱导活性的表达。目的:实验旨在建立以免疫抑制大鼠为实验动物骨诱导活性检测的新方法,降低动物对植入材料的免疫排斥,从而不影响其骨诱导活性的表达。设计、时间及地点:独立样本观察实验,于2005-09/2006-04在山西省医用组织库完成。材料:合格供体长骨皮质骨用于脱矿骨的制备,体质量200g左右的Wistar大鼠24只。方法:采用超声条件下盐酸脱矿、冻干、辐照等方法,制备人类脱矿皮质骨,对照样品为经高温高压灭活的脱矿骨。Wistar大鼠腹腔注射地塞米松造成免疫抑制,手术形成双侧股部肌袋,分别植入试验样品与对照样品。主要观察指标:术后3、4、5、6周取出植入材料行组织学观察与碱性磷酸酶的活性检测。结果:组织学观察显示,术后3周实验组脱矿骨吸收腔内间充质细胞聚集,术后4周脱矿骨内开始形成软骨细胞与软骨基质,术后5周形成较多的软骨组织,术后6周时形成类骨质。对照组材料被纤维组织包裹,显示吸收,未见成骨迹象。实验组碱性磷酸酶活性显著高于对照组(P<0.05)。结论:采用腹腔注射地塞米松方法造成大鼠免疫抑制,降低了宿主大鼠对植入人脱矿骨基质的排斥,异位植入后,脱矿骨吸收腔隙内出现软骨细胞,形成软骨组织与类骨质。

异体脱矿骨-胶原蛋白-四环素复合材料促进兔下颌骨牵张成骨实验研究

目的研究异体脱矿骨-胶原蛋白-四环素复合材料促进兔下颌骨牵张成骨作用。方法将四环素和胶原蛋白包被于兔脱矿骨颗粒上,制备成兔脱矿骨-胶原蛋白-四环素复合材料。选用36只新西兰大白兔,随机分为三组,每组12只,A组为对照组,B组为脱矿骨组,C组为脱矿骨-胶原蛋白-四环素复合材料组。建立单侧下颌骨牵张模型,术中即牵张2 mm间隙。A组间隙注入0.5 ml生理盐水,B组和C组分别在间隙中填充0.5g的脱矿骨颗粒和脱矿骨-胶原蛋白-四环素复合材料。在牵张后固定期第1、3、6周分别进行X线、组织学检查及血清碱性磷酸酶活性及骨钙素含量、骨密度、生物力学检测。不同组间均值比较采用t检验,SPSS 13.0统计软件包统计分析。结果 C组的新骨成骨速度和质量明显好于A、B两组,B组的新骨成骨速度和质量好于A组;各检测指标,除固定期第3、6周,C组和B组血清骨钙素含量没有显著性差异外,三组间均有显著性差异(p<0.05)。结论异体脱矿骨-胶原蛋白-四环素复合材料能够明显促进兔下颌骨牵张成骨。

骨组织工程支架材料:脱矿骨基质

背景:脱矿骨基质是目前研究较多的具备骨诱导及骨引导的生物支架材料之一。目的:总结脱矿骨基质作为骨组织工程支架材料的研究进展,并展望其发展趋势。方法:由第一作者检索1965年1月至2013年5月PubMed数据库、中国生物医学数据库、万方数据库及FMJS数据库有关脱矿骨基质及其作为骨组织工程支架材料的相关文献。英文检索词为"Demineralized Bone Matrix,Scaffold material,Groowth factor,Cells,drugs",中文检索词为"脱矿骨基质,支架材料,生长因子,细胞,药物",根据纳入标准排除重复性研究,保留34篇密切相关文献进行归纳总结。结果与结论:骨组织工程支架材料是组成组织工程骨的主体,而脱矿骨基质既具备骨诱导性又具备骨引导性,可为骨组织细胞的修复提供空间,又可与生物活性因子、活细胞、抗生素等在体外构建成复合体,植入骨内促进骨缺损的愈合。但这一技术也面临着脱矿骨基质与各种物质的配比、消毒、保存成骨活性及抗原性的消除等问题,充分了解脱矿骨基质作为骨组织工程支架的研究,可为其服务于临床提供理论依据。

同种脱矿骨在牙周病植骨术的体会

同种脱矿骨在牙周病植骨术的体会戴克忠，程虹，王燕，陈健，王前程（包头市第四医院）牙周病是常见多发病。发病率在５６％以上，晚期患者萎缩的牙槽骨自难新生，一般对严重牙周病牙采用拔除之法，对患者身心不利，鉴于近年来同种脱矿骨广泛用于口腔颌面外科骨缺损的移植...

不同长骨制备的脱矿骨基质中BMP-2含量测定及其成骨性能的体外研究

目的测量不同长骨制备的脱矿骨基质(demineralized bone matrix,DBM)中BMP-2的浓度,评价不同DBM诱导MC3T3-E1细胞成骨分化的能力。方法取同一尸体标本不同长骨制备DBM,按取材部位分成尺骨组(uDBM组)、肱骨组(hDBM组)、胫骨组(tDBM组)和股骨组(fDBM组),以煮沸后的DBM为对照组(cDBM组)。将各组DBM经盐酸胍提取蛋白后采用ELISA法检测BMP-2含量;然后将其与MC3T3-E1细胞共培养,细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法观察各组细胞增殖情况,行茜素红、ALP、Van Gieson染色定性观察和ALP含量定量分析各组细胞成骨分化能力;并采用线性回归分析DBM中BMP-2浓度对细胞合成ALP的影响。结果各DBM组间BMP-2浓度比较差异均有统计学意义(P<0.05),下肢长骨中BMP-2浓度高于上肢长骨,其中fDBM组BMP-2浓度约为uDBM组的35.5倍。CCK-8法检测示,共培养5 d内各组细胞持续增殖,5 d时各组吸光度(A)值从高到低依次为fDBM组>tDBM组>hDBM组>uDBM组>cDBM组。共培养14 d,各组细胞表达ALP、钙化结节和胶原纤维的程度与DBM中BMP-2浓度分布趋势一致。ALP含量从低到高依次为cDBM组<uDBM组<hDBM组<tDBM组<fDBM组,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。线性回归分析示,y^=0.361+0.017x,DBM中BMP-2浓度对细胞ALP含量的影响有统计学意义(t=3.552,P=0.005);BMP-2浓度每增加1 ng/g,ALP含量将增加0.017[95%CI(0.006,0.027)]U/100 mL。结论不同长骨中天然BMP-2浓度差异较大,下肢长骨高于上肢长骨,骨骼取材部位是影响DBM骨诱导能力的重要因素。

新型脱矿同种骨修复材料的骨诱导活性研究

目的研究一种新型脱矿同种骨修复材料的骨诱导活性。方法在裸鼠腿部肌肉内植入脱矿骨纤维材料,植入样品后第2周和第4周取材进行组织学形态观察和骨诱导活性研究。结果脱矿骨纤维植入裸鼠肌肉后2周,可见新生血管和软骨形成,植入4周后,可见多个新骨形成区。结论该种脱矿骨纤维具有明显的骨诱导效果,可作为一种较理想的临床骨修复材料。

人胚胎脱矿骨在根尖周病变的初步临床应用

通过对３５例患者（５４个牙）采用同种异体大月份引产的胚胎脱矿骨植入根尖周骨缺损处，一次性治疗前牙及双尖牙根尖骨质破坏病变，取得满意效果。该治疗方法简单、适应证宽、节约时间、无特殊禁忌证。

部分脱矿异体骨移植修复大块下颌骨缺损的实验研究

实验制备部分脱矿异体骨，用以修复狗下颌骨３ｃｍ长的连续性骨缺损（１４例），并与新鲜自体皮质骨移植（８例）相比较．术后用Ｘ线、四环素荧光标记、血管内墨汁灌注、组织学分析等方法连续观察６个月，并测定骨移植侧下颌骨术后第４月和第６月的机械强度．实验结果表明：部分脱矿异体骨具有较好的组织相容性，其愈合过程与新鲜自体皮质骨移植相同．术后第６月时绝大部分移植骨已被宿主新生骨所替代．仅有小块岛状移植骨残留并与新生骨相互融合．部分脱矿异体骨移植后其机械强度逐渐增高．不易发生疲劳骨折．

脱矿脱细胞骨基质环支架体外构建组织工程化椎间盘纤维环

目的:探计以脱矿脱细胞骨基质环为支架、纤维环细胞为种子细胞体外培养构建组织工程化椎间盘纤维环的可行性。方法:取兔椎间盘纤维环细胞培养,应用甲苯胺蓝染色和Ⅰ型、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色进行鉴定。用纤维蛋白凝胶接种技术将兔椎间盘纤维环细胞接种到经脱矿脱细胞制备的骨基质环支架材料上,体外培养3个月。每月取培养的细胞支架复合体进行大体形态、HE染色光镜检查和扫描电镜观察,并用生化方法检测羟脯氨酸、氨基葡聚糖(GAG)、脱氧核糖核酸(DNA)含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Ⅰ、Ⅱ型胶原信使核糖核酸(mRNA)表达;免疫组化和蛋白质印迹方法检测Ⅰ、Ⅱ型胶原蛋白表达。结果:培养的第1代细胞甲苯胺蓝染色呈异染性,Ⅰ型、Ⅱ型胶原免疫组化染色均可见阳性表达,表明培养的第1代细胞具有椎间盘纤维环细胞的表型特点。构建的复合体体外培养1、2、3个月时大体呈白色半透明样环状,有光泽,质韧,具有一定弹性,可扭曲;HE染色光镜下见支架孔洞被红染的组织填充,且空洞内的细胞密度逐渐增加;扫描电镜观察材料表面逐渐被组织填充;Ⅰ型、Ⅱ型胶原免疫组化染色均为阳性;培养2个月时复合体羟脯氨酸、GAG、DNA含量明显高于1个月时(P<0.01),3个月时与2个月时比较无显著性差异(P>0.05),各时间点复合体羟脯氨酸、GAG、DNA含量均低于正常纤维环(P<0.05或<0.01);培养1个月时复合体可检测到Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA和蛋白的表达,2个月时与1个月时比较有显著性差异(P<0.01),3个月时与2个月时比较无显著性差异(P>0.05)。结论:以脱矿脱细胞骨基质环为支架、纤维环细胞为种子细胞构建的复合体在体外培养时,细胞能够保持表型特点、逐渐增殖和行使功能,此复合体可被鉴定为类纤维环组织,用其构建组织工程化椎间盘纤维环可行。

可降解珊瑚羟基磷灰石与脱矿无机牛骨在上颌窦提升术后改建的临床对比研究

目的:比较可降解珊瑚羟基磷灰石与脱矿无机牛骨(BIO-OSS)材料在上颌窦提升及种植修复后骨改建情况。方法:选择上颌窦提升种植修复的牙列缺损患者20例并随机分为2组(n=10),A组用可降解珊瑚羟基磷灰石,B组用BIO-OSS为上颌窦提升植骨材料,6月后植入种植体,植入4～6月后进行种植体上部修复。所有患者在5个临床时期进行曲面体层片检查,于中间种植体顶端平面选取定点测量其垂直向骨高度:①中间种植体中点(P1);②与中间种植体远中外缘相距2 mm的位点(P2);③距最远中的种植体的远中外缘5 mm的位点(P3)。统计学比较2组垂直向骨高度的变化。结果:经12～40月的临床追踪观察发现,2组患者的种植体留存以及每组内部P1、P2与P3之间垂直向骨高度改变无统计学差异;A组骨组织替代材料在机体内改建高度变化值大于B组。结论:在上颌窦提升种植修复过程中,可降解珊瑚羟基磷灰石骨替代材料在植入机体后其改建速度快于脱矿无机牛骨。

脱矿人牙骨基质与聚乳酸膜复合体修复骨缺损的研究

研究脱矿人牙骨基质与聚乳酸膜复合体修复骨缺损的特点及机制。采用 Wistar大鼠共 6 0只 ,随机分 A、 B、C3组 ,在其双侧桡骨中段制作 4 mm的骨缺损模型。右侧作为实验侧 ,缺损区 A组植入脱矿人牙骨基质、B组仅外包裹聚乳酸膜、 C组植入二者复合体。左侧为空白对照。分别于 2、 4、 6、 10周处死动物 ,标本行放射学及组织学检查。X线及组织切片均证实该复合体在 6周时已有致密骨组织形成 ,10周时已有新生髓腔生成。表明脱矿人牙骨基质与聚乳酸膜复合体有良好的成骨能力 ,有引导骨组织再生、防止骨不连作用 。

bFGF复合部分脱矿异体骨修复兔下颌骨缺损的实验研究

目的探讨bFGF(basic fibroblast growth factor,碱性成纤维细胞生长因子)复合部分脱矿冻干辐照异体骨在修复下颌骨缺损中的应用。方法在21例兔双侧下颌骨缺损模型中,按照完全随机原则,一侧选用bFGF复合部分脱矿冻干辐照异体骨修复骨缺损,作为实验组;另一侧单纯以部分脱矿冻干辐照异体骨修复,作为对照组。术后3、6、12周分别处死7只实验动物,对标本进行大体观察、X线片观察、组织学病理切片镜下观察。依据Lane-Sandhu X线评分标准和Lane-Sandhu组织学评分法,对X线片观察结果和组织学病理切片镜下观察结果进行量化和统计学处理。结果实验组和对照组手术创口均为一期愈合,宿主对移植物未发生排斥反应。术后不同时期,实验组新生血管的量、新生纤维组织及纤维母细胞、类骨质等均较对照组多。经对X线片和病理切片进行评分,并对评分数据统计分析,实验组和对照组评分结果有显著性差异(P<0.01)。结论bFGF可促进异体骨植骨区骨质形成。