应用脱细胞基质材料补片式治疗尿道狭窄的临床分析

目的 探讨应用脱细胞基质材料补片式治疗尿道狭窄的临床效果.方法 以本院行尿道狭窄手术治疗的50例患者为研究对象.观察有无感染、排斥反应,术后1个月拔除硅胶导尿管,行尿道逆行及顺行造影检查,观察尿道通畅情况.观察尿道修复后狭窄段通畅情况、狭窄段尿道粘膜修复情况、尿流率并与术前比较.结果 本次研究随访时间为8~72个月,平均37.5个月.术前患者最大尿流率1.1~4.5 ml/s,平均(2.8±0.3)ml/s,术后1个月、6个月、12个月和24个月最大尿流量分别为(23.8±3.5)ml/s、(22.7±3.1)ml/s、(22.1±2.9)ml/s和(21.6±2.7)ml/s,均显著高于术前最大尿流量(P<0.05).2例(4.00%)患者于术后3周出现感染、排斥发应.术后经尿道造影显示尿道通畅;术后6周、12周尿道镜检显示补片移植物与周围组织分界清楚;术后24周尿道镜检查小肠粘膜补片已降解,修复段尿道与周围组织间隙消失,黏膜光洁完整,管腔内无明显狭窄;植入补片部位活检显示黏膜表层为移行上皮细胞.患者阴茎勃起功能与术前一致.结论 小肠粘膜脱细胞基质生物材料为尿道狭窄修复重建手术提供了新的选择,该方法创伤较小,抗感染能力强,治疗效果显著,可作为临床治疗尿道狭窄修复材料的重要选择.

不同类型脱细胞基质材料生物补片在青少年腹股沟疝修补术中的应用价值

目的探讨不同类型脱细胞基质材料生物补片在青少年腹股沟疝修补术中的应用价值。方法采用回顾性队列研究方法。收集2013年1月至2018年6月首都医科大学附属北京朝阳医院收治的159例青少年腹股沟疝患者的临床资料;男155例,女4例;中位年龄为15.0岁,年龄范围为13.0~18.0岁。159例患者中,42例行传统疝囊高位结扎术设为传统手术组;61例采用国产交联脱细胞基质材料生物补片行开放Lichtenstein手术设为国产生物补片组;56例采用进口非交联脱细胞基质材料生物补片行开放Lichtenstein手术设为进口生物补片组。观察指标:(1)手术情况。(2)术后恢复情况。(3)随访情况。采用门诊和电话方式进行随访,了解患者术后恢复情况及并发症发生情况。随访时间截至2019年6月。偏态分布的计量资料以M(范围)表示,多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验,两两比较采用Nemenyi检验。计数资料以绝对数表示,多组间比较采用χ^2检验或Fisher确切概率法,两两比较采用χ^2检验或Fisher确切概率法。两两比较采用Bonferroni法进行校正。结果(1)手术情况:3组患者均顺利完成腹股沟疝修补术。传统手术组、国产生物补片组、进口生物补片组患者手术时间分别为20 min(10~25 min)、35 min(30~40 min)、35 min(30~40 min),3组患者手术时间比较,差异有统计学意义(χ^2=91.640,P<0.05)。进一步两两比较,传统手术组患者手术时间分别与国产生物补片组和进口生物补片组比较,差异均有统计学意义(P<0.0167)。国产生物补片组患者手术时间与进口生物补片组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)术后恢复情况:传统手术组、国产生物补片组、进口生物补片组患者术后疝复发率分别为7.1%(3/42)、0、0,3组比较,差异有统计学意义(χ^2=8.150,P<0.05)。进一步两两比较,传统手术组患者术后疝复发率分别与国产生物补片组和进口生物补片组比较,差异均有统计学意义(P<0.0167)。国产生物补片组患者术后疝复发率与进口生物补片组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。传统手术组、国产生物补片组、进口生物补片组患者血清肿发生率分别为0、3.3%(2/61)、17.9%(10/56),3组比较,差异有统计学意义(χ^2=14.929,P<0.05)。进一步两两比较,进口生物补片组患者血清肿发生率分别与传统手术组和国产生物补片组比较,差异均有统计学意义(χ^2=6.517,6.741,P<0.0167)。传统手术组患者血清肿发生率与国产生物补片组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。传统手术组、国产生物补片组、进口生物补片组患者伤口脂肪液化发生率分别为0、3.3%(2/61)、1.8%(1/56),3组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。伤口脂肪液化患者经换药后愈合。传统手术组、国产生物补片组、进口生物补片组患者住院时间分别为3.0 d(2.0~5.0 d)、3.0 d(1.0~5.0 d)、2.5 d(1.0~5.0 d),3组比较,差异无统计学意义(χ^2=0.907,P>0.05)。(3)随访情况:159例患者均获得随访,随访时间为12~77个月,中位随访时间为41个月。随访期间3组患者均无慢性疼痛、异物感及感染发生。结论生物补片修补治疗青少年腹股沟疝安全、有效。两种不同类型的脱细胞基质材料生物补片临床疗效比较,差异无统计学意义,均可用于青少年腹股沟疝修补术。

脱细胞异体真皮基质材料治疗复杂肛瘘52例

目的探讨脱细胞异体真皮基质材料(acellularextracellular matrix,AEM)治疗复杂肛瘘的临床效果。方法2008年7月～2010年3月对52例复杂肛瘘采用近端肛瘘切开结合远端肛瘘AEM填塞进行治疗。结果 42例一期愈合,10例延迟愈合。52例随访12个月无复发,AEM成功率为80.8%(42/52),肛瘘治愈率为100%(52/52)。结论应用AEM治疗复杂肛瘘具有微创、疗程短和不损害肛门功能及外形的优势。

从脱细胞猪真皮基质材料的边角料中提取Ⅰ型胶原

以脱细胞猪真皮基质材料的边角料为原料,使用酸-酶结合法提取I型胶原,并用SDS-PAGE电泳、DSC、FI-IR、SEM、AFM对Ⅰ型胶原进行了结构表征。研究表明:组织学观察发现,脱细胞猪真皮基质材料中不存在细胞和细胞碎片,且胶原纤维得到充分的分离和松散,非纤维成分大部分被水解,有利于Ⅰ型胶原的提取。提取得到的I型胶原红外特征峰明显,分子质量大且分布窄,变性温度为69.4℃;SEM显示胶原呈现孔隙均匀的三维网状结构;AFM观察到胶原大部分排列紧密,相互编织缠绕,形成无规线团,小部分胶原直径较粗,且以线性分布,说明胶原已经发生自聚集现象。综合检测分析结果,可以认为所提取制备得到的确为具有天然三股螺旋结构的I型胶原。

脱细胞真皮基质材料治疗肛瘘的临床效果观察

目的:观察在肛瘘治疗中实施脱细胞真皮基质材料的临床效果和价值。方法:观察病例选择于2018年3月~2019.年3月时段在本院实施治疗的126例肛瘘患者,以治疗方式不同作为分组依据进行分组观察,例数均分,实施脱细胞真皮基质材料疗法、挂线疗法的病例所在组分别以实验组和对照组进行命名,对两种治疗方法的实施效果进行观察和比较。结果:两组经不同的治疗呈现出不同的临床效果,即相对比于挂线疗法,实验组病例经脱细胞真皮基质材料疗法治疗呈现出更为突出的效果,即总治疗有效率提升明显,肛门失禁评分降低明显,各种时间指标(正常生活恢复、创面愈合、疼痛持续、卧床、住院)均缩短明显,并发症发生率降低明显,比较差异性明显(P<0.05);两组复发率比较差异性并不明显(P>0.05)。结论:在肛瘘治疗中实施脱细胞真皮基质材料可达到满意的治疗目标,建议临床推广。

采用同种异体脱细胞基质组织修补材料行腹外疝修补术后的中远期观察

目的观察并分析同种异体脱细胞基质组织修补材料修补腹外疝的中远期疗效。方法选取门诊或电话随访2011年11月至2013年12月在该院应用同种异体脱细胞基质组织修补材料行腹外疝修补术的65例临床病例,观察并分析其术后并发症及复发情况。结果术后随访时间5~7年,65例患者均未出现切口慢性感染及排异反应,4例复发;6例有慢性疼痛,为阵发性隐痛,未影响活动及生活质量;3例早期有局部异物感,但均在术后2~3个月内消失。结论同种异体脱细胞基质组织修补材料在修补腹外疝方面有其优势。但其与人工合成材料相比是否更具优势,仍需大量临床病例研究加以证实。

生物材料的灭菌

从第一代的惰性材料到第三代的活性材料,生物材料近年来发展迅速,在生物医学中展现出巨大的应用前景,但其有效的灭菌变得越来越困难;而生物材料有效的灭菌和消毒是其临床转化必不可少的重要步骤。本综述总结了针对生物材料的经典和新型的多种灭菌消毒方法,以及这些灭菌技术对生物材料理化性质的影响,同时讨论了各种方法的杀菌效果、毒性和实际应用中存在的问题,以期为生物材料研究中的灭菌方法选择提供参考。

新型脱细胞骨基质材料的组织学结构及其细胞相容性观察

目的对新型脱细胞骨基质材料(acellular bone matrix,ACBM)的组织学结构及细胞相容性进行观察,探讨其作为组织工程骨支架的可行性。方法取健康18～24月龄雄性杂种犬股骨头负重区骨柱,高压水枪冲洗、脱脂,Trixon X-100、脱氧胆酸钠等进行脱细胞等理化处理,制备新型ACBM支架;对其行扫描电镜观察,HE染色、天狼星红染色及Hoechst 33258染色,评估其脱细胞程度及结构。采用密度梯度离心法分离培养犬BMSCs,取第3代BMSCs种植至ACBM支架上,MTT法分析支架浸提液毒性;复合培养3 d行倒置显微镜、扫描电镜、活/死细胞荧光染色、组织学等观察细胞在支架的生长、分化情况。结果 HE染色示ACBM支架去细胞彻底,无细胞碎片残留;天狼星红染色示支架呈深红及黄红相间染色;Hoechst 33258染色未见细胞残留。扫描电镜观察示ACBM支架内孔洞相互贯通,具有天然骨的孔径和孔隙率。MTT法检测示,培养1～6 d不同浓度(25%、50%、100%)支架浸提液与对照H-DMEM培养液吸光度(A)值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。倒置显微镜、扫描电镜、组织学观察结果均显示细胞在支架上黏附良好,增殖显著,细胞基质分泌增加;活/死细胞染色示ACBM支架内细胞均呈绿色。结论 ACBM支架去细胞彻底,具备良好的孔径和孔隙率,无毒,细胞相容性良好,可作为良好的支架载体用于组织工程骨的构建。

应用脱细胞真皮基质材料修补复杂腹壁切口疝

目的探讨脱细胞真皮基质材料对复杂的腹壁切口疝的修复治疗效果。方法回顾性分析2008年1月至2010年6月问使用脱细胞真皮基质（acellular dermal matrix，ADM）材料修补的7例复杂的腹壁切口疝的治疗方法。其中男4例，女3例，年龄43～83岁，中位年龄53岁；7例中有2例伴有腹股沟斜疝，给予同时修补；5例同时进行了胃肠道手术，其中有2例伴有小肠瘘；疝环直径为9．2～16．5cm，平均（11．6±2．8）cm；5例使用腹腔内修补（intraperitoneal onlay mesh，IPOM），2例为腹膜外修补（total extraperitoneal prothesis，TEP）。结果本组患者均手术顺利，放置ADM补片至关腹结束的平均手术时间（33±12）min；术中平均出血量（16±4）ml；住院时间7～12d。所有使用ADM的患者均痊愈出院，术后未发现有慢性疼痛、感觉异常、肺炎、尿路感染等并发症，手术切口无红肿、溃破、无血清肿。7例均获随访，随访时间5～26个月，中位随访时间为14个月，随访期间未发现浅部感染或深部感染，无疝复发。结论脱细胞真皮基质材料作为一种新的生物补片，适用于复杂腹壁切口疝，尤其是伴有污染的腹壁切口疝的修补。

小肠黏膜下层材料修复大鼠腹壁缺损的研究

目的构建猪小肠黏膜下层脱细胞基质材料并用于修复大鼠腹壁缺损,与美国强生公司的ULTRAPROTM补片对比,观察猪小肠黏膜下层脱细胞基质材料(SIS)修复大鼠腹壁缺损后的大体效果及局部炎症反应。方法按照文献中报道的方法制作SIS材料并修复大鼠腹壁缺损(S组),并与美国强生公司的ULTRAPROTM补片(P组)进行对比,于术后3、8周取材,观察并评估2组大体修复效果及修复材料-肌肉交界处局部炎症反应。结果术后3周,SIS材料大体外观类似肌肉筋膜组织,缺损修复区域材料增厚;HE染色可见S组与P组大鼠腹壁缺损的修复区域均伴有炎症细胞浸润,SIS部分降解,部分胶原组织生成。术后8周,SIS材料边缘模糊不清,与周围正常肌肉筋膜组织相融合,缺损修复区域组织增厚明显;S组局部炎症细胞浸润程度明显减轻,SIS进一步降解,大量排列紧密、有序的成纤维细胞及胶原纤维增生。术后3周及8周,P组炎症细胞浸润的程度均高于S组,差异有统计学意义。结论 SIS材料修复大鼠腹壁缺损,效果显著,局部炎症反应轻微,并能够促进胶原组织增生。

同源组织工程生物补片在阴道重建中的实验研究

目的探讨猪皮来源的组织工程生物补片对实验猪阴道缺损模型阴道重建的效果。方法建立中国小型实验猪的阴道缺损模型并植入组织工程生物补片重建阴道。在术后1、2、4、6、8周分别取阴道全层,每次1只,其中第4周两只。手术前取其中2只实验猪的正常阴道作为对照组。对不同时间段的阴道全层进行HE染色以观察组织的生长情况;免疫组化检测上皮光谱角蛋白AE1/AE3、层粘连蛋白Laminin和平滑肌肌动蛋白α-actin,以表征重建阴道的上皮生长、完整程度和平滑肌生长;VG染色评价胶原纤维的生成情况。结果HE染色可见重建阴道2周后出现新生黏膜;8周后新生阴道上皮结构与正常阴道无明显差异。AE1/AE3蛋白的免疫组化染色表明上皮组织的存在。Laminin的免疫组化染色提示新生阴道黏膜内基底膜成分的生成。VG染色和α-actin的表达结果显示阴道重建8周后可生成完整的胶原纤维和平滑肌肌束,且排列整齐。结论同源组织工程生物补片进行阴道重建时可形成完整的阴道黏膜和平滑肌,与正常阴道结构相似。