脱细胞异体皮肤细胞外基质——医用组织补片在美容外科的应用

目的介绍脱细胞异体皮肤细胞外基质医用组织补片在美容外科中的临床应用经验。方法自2002年3月至2005年10月，应用脱细胞异体皮肤细胞外基质——医用组织补片，对患者不同部位进行填充的美容手术，其中头面部填充于皮下浅筋膜层，唇部、颏部、唇裂合并牙槽裂部填充于皮下深筋膜层或肌肉浅层，隆乳术中用于胸大肌减张。结果本组115例患者经1～27个月随访．1例唇裂合并牙槽裂者因补片填充量不足凹陷未完全矫正；1例鼻唇沟填充者其左侧出现血肿、局部出现硬结，于2个月后将左侧假体取出重新填充，但术后6个月仍有不平整，其余患者均获得良好的美容效果。结论脱细胞异体皮肤细胞外基质医用组织补片可以广泛地应用于美容外科的临床填充术。

脱细胞软骨细胞外基质匀浆联合氧化苦参碱治疗大鼠骨关节炎

背景:脱细胞软骨细胞外基质治疗骨关节炎具有一定的效果,但其单独应用时的治疗效果有限。氧化苦参碱可缓解白细胞介素1β诱导的软骨细胞凋亡和细胞外基质降解。目的:观察不同剂量氧化苦参碱与脱细胞软骨细胞外基质联合膝关节腔注射对大鼠骨关节炎的治疗作用。方法:获取SD大鼠股骨软骨,采用物理、化学与酶相结合的方法制备脱细胞软骨细胞外基质。取50只SD大鼠,利用随机数字表法分为假手术组、骨关节炎组、单纯材料组、低剂量药物组、高剂量药物组,每组10只,后4组采用改良Hulth法建立大鼠骨关节炎模型。造模成功后,单纯材料组大鼠膝关节腔注射脱细胞软骨细胞外基质匀浆,低剂量药物组、高剂量药物组膝关节腔分别注射含50,100μg氧化苦参碱的脱细胞软骨细胞外基质匀浆。注射4周后取材进行相关检测。结果与结论:①与假手术组比较,骨关节炎组关节腔积液中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子ɑ、丙二醛水平升高(P<0.05),超氧化物歧化酶水平降低(P<0.05);与骨关节炎组比较,低剂量药物组、高剂量药物组关节腔积液中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子ɑ、丙二醛水平降低(P<0.05),超氧化物歧化酶水平升高(P<0.05),其中高剂量药物组变化更显著。②Tunel染色显示,与假手术组相比,骨关节炎组凋亡软骨细胞增多;与骨关节炎组相比,单纯材料组、低剂量药物组、高剂量药物组凋亡软骨细胞减少,其中高剂量药物组减少更显著。③苏木精-伊红与免疫组化染色显示,骨关节炎组大鼠膝关节软骨严重退变,软骨组织中Ⅱ型胶原表达降低(P<0.05)、基质金属蛋白酶9表达升高(P<0.05);与骨关节炎组相比,单纯材料组、低剂量药物组、高剂量药物组大鼠膝关节软骨退变明显改善,软骨组织中Ⅱ型胶原表达升高(P<0.05)、基质金属蛋白酶9表达降低(P<0.05),其中高剂量药物组改善最显著。④Western blot检测显示,与假手术组相比,骨关节炎组软骨组织中Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-9、Bax蛋白表达升高(P<0.05);与骨关节炎组相比,低剂量药物组、高剂量药物组Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Cleaved-caspase-3、Cleaved-caspase-9、Bax蛋白表达降低(P<0.05),其中高剂量药物组改善更显著。⑤结果表明,膝关节腔内联合注射脱细胞软骨细胞外基质与氧化苦参碱可通过促进细胞外基质的合成、抑制炎症与氧化应激反应、抑制软骨细胞凋亡发挥骨关节炎治疗作用,该治疗作用可能与激活Nrf2/HO-1通路有关。

小肠黏膜下层脱细胞基质复合外泌体构建组织工程尿道

背景:小肠黏膜下层脱细胞基质已被临床与基础研究证实可用于尿道的修复重建,但其单独应用时存在宿主细胞生长缓慢、支架血管化不足而成活困难、重建尿道狭窄梗阻等问题,仅适用于较短的尿道狭窄。目的:探讨应用小肠黏膜下层脱细胞基质复合外泌体构建组织工程尿道的可行性。方法:从新西兰大白兔骨髓间充质干细胞中分离提取外泌体;制备猪小肠黏膜下层脱细胞基质,将外泌体负载于小肠黏膜下层脱细胞基质上。将小肠黏膜下层脱细胞基质-外泌体(PKH26染料标记)复合物与脐静脉内皮细胞共培养12 h,观察细胞摄取外泌体情况。选取生长状态良好的脐静脉内皮细胞,分3组培养:空白组常规培养,对照组加入小肠黏膜下层脱细胞基质,实验组加入小肠黏膜下层脱细胞基质-外泌体复合物,通过划痕实验、成管实验、血管生成因子分泌检测评估血管生成情况。取30只新西兰大白兔,建立长段(3 cm)尿道缺损模型,采用随机数字表法分3组干预(n=10):单独材料组植入小肠黏膜下层脱细胞基质,对照组植入小肠黏膜下层脱细胞基质-骨髓间充质干细胞复合物,实验组植入小肠黏膜下层脱细胞基质-外泌体复合物,植入后12周进行尿道造影、尿动力学检查及重建尿道切片病理观察。结果与结论:(1)荧光显微镜下可见小肠黏膜下层脱细胞基质中的外泌体可被脐静脉内皮细胞摄取。(2)与空白组、对照组相比,实验组材料可促进脐静脉内皮细胞的迁移、成血管能力以及成血管因子血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、白细胞介素8的分泌(P <0.05)。(3)尿道造影结果显示,单独材料组10只兔均出现尿道狭窄,对照组10只兔中2只出现尿道狭窄,实验组10只兔均未出现尿道狭窄。尿动力检查结果显示,单独材料组兔材料植入后12周的最大尿道压高于术前(P <0.05),对照组、实验组兔植入后12周的最大尿道压均低于空白组(P <0.05)。苏木精-伊红、Masson与免疫组化染色显示,单独材料组可见明显的再生上皮层、少量的皮下平滑肌与血管,以纤维组织增生为主,伴有明显炎性细胞浸润;对照组可见较完整的再生上皮与少量胶原,可见大量的皮下血管与平滑肌,伴有炎性细胞浸润;实验组可见完整的再生上皮层与大量的皮下血管、平滑肌,未见明显炎性细胞浸润,实验组AE1/AE3、ɑ-平滑肌肌动蛋白、CD31阳性表达均高于单独材料组、对照组(P <0.05)。(4)结果表明,小肠黏膜下层脱细胞基质-外泌体组织工程尿道可通过促进血管生成来修复尿道缺损。

脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架促进大鼠皮肤缺损的修复

背景:研究证实,将脱细胞基质与聚合物进行混合纺丝不仅可改善纤维的结构性质,还可保存脱细胞基质的生物学活性,但是目前将聚氨酯与脱细胞皮肤基质进行静电纺丝制备皮肤组织工程支架还没有相关报道。目的:观察脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架对大鼠皮肤缺损的修复作用。方法:利用静电纺丝技术分别制备聚氨酯静电纺丝纤维支架和脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架。扫描电镜下观察纤维结构;将大鼠脂肪间充质干细胞分别接种于两组支架上,扫描电镜下观察支架上的细胞形态。取10只SD大鼠,在每只大鼠背部制作3个1 cm×1 cm的全层皮肤缺损,其中2处缺损分别植入聚氨酯静电纺丝纤维支架(对照组)、脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架(实验组),剩余缺损处不植入任何材料(空白对照组)。术后第1,2,3周,观察皮肤创面愈合情况;植入后第3周,进行创面苏木精-伊红染色,计算创面瘢痕面积。结果与结论:①扫描电镜下可见两种静电纺丝纤维均为网状结构,并且大鼠脂肪间充质干细胞在两种支架上沿纤维附着,黏附良好。②随着术后时间的延长,各组皮肤创面逐渐愈合,至术后第3周,实验组、对照组皮肤创面基本愈合,空白对照组创面可见小溃疡形成。皮肤创面苏木精-伊红染色显示,对照组、实验组创面表皮覆盖基本完整,真皮层内可见成纤维细胞长入和炎症细胞浸润,并且实验组创面胶原纤维较为丰富、排列规则有序,与表皮面基本平行;空白对照组创面表皮仍有缺损。实验组创面瘢痕面积小于其他两组(P<0.05,P<0.01)。③结果表明,脱细胞皮肤基质/聚氨酯混纺纤维支架可以有效修复大鼠全层皮肤缺损、改善创面瘢痕形成。

甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶促进腹壁缺损修复

背景:目前用于填充腹壁缺损部位的合成高分子材料(如聚丙烯或聚酯)不仅缺乏可降解性和生物活性,还难以适应复杂形状伤口需求,因此,找到免疫原性低、组织相容性好的生物活性材料成为腹壁缺损修复研究的热点。目的:制备甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶,探讨其在腹壁缺损中的潜在应用价值。方法:(1)依次用0.25%胰蛋白酶、1%Triton X-100对猪真皮进行脱细胞处理,获得真皮细胞外基质;胃蛋白酶消化真皮细胞外基质,经甲基丙烯酸酐改性后光交联形成甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶,扫描电镜观察水凝胶的微观形貌,测试其流变学性能、溶胀性等理化性质;(2)将L929成纤维细胞接种到甲基丙烯酰化改性的真皮细胞外基质水凝胶中,检测细胞相容性;(3)将12只SD大鼠随机分为2组(n=6),创建保留腹膜的腹壁缺损模型,聚丙烯组缺损部位填充聚丙烯材料,水凝胶组缺损部位填充甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶,两组创面皮肤均用聚丙烯材料覆盖,观察创面愈合情况并进行组织学分析。结果与结论:(1)采用酶解法对猪真皮进行脱细胞后具有良好的脱细胞效果,并且原有的糖胺聚糖及胶原蛋白保留较好。扫描电镜下可见甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶为疏松多孔结构,孔径在70-120μm之间,该水凝胶的溶胀比为(16.88±3.24)%,吸水率为(94.24±1.11)%,流变学性能测试表明该水凝胶状态稳定且具有剪切变稀特点,具备可注射性;(2)CCK-8检测与Live/Dead染色结果显示,甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶具有良好的细胞相容性;(3)动物实验结果显示,实验组术后7,10,14 d的皮肤创面愈合率高于对照组(P <0.05);皮肤与肌层组织苏木精-伊红、Masson染色显示,与聚丙烯组比较,水凝胶组术后14 d的皮肤创面上皮化情况、毛囊生成、胶原纤维排列及新生血管情况更好,术后28 d的皮肤创面新生组织结构与正常组织相近,并且瘢痕增生较少,术后28 d时可见少量肌肉组织再生;(4)结果表明,甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶可促进腹壁缺损大鼠的皮肤创面愈合和肌肉组织再生。

超临界CO_(2)流体技术制备脱细胞外基质材料及其生物医学应用

脱细胞外基质(decellularized extracellular matrix,dECM)材料在组织工程和再生医学中具有重要应用,超临界CO_(2)流体(supercritical CO_(2)fluid,SCF-CO_(2))技术已被证明可用于dECM材料的制备。文中综述了SCF-CO_(2)的基本原理、SCF-CO_(2)脱细胞及其灭菌机制,介绍了辅助溶剂的使用与预处理技术对SCF-CO_(2)脱细胞的影响,以及dECM材料的生物医学应用。结果表明:与常规方法相比,具有高渗透性、高扩散性的SCF-CO_(2)能更有效地保持细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的结构完整性和生物活性,同时展现出高效灭菌的优势,且制备的dECM材料在组织修复和再生医学领域具有显著应用潜力。

异种脱细胞真皮基质用于老年输液外渗性皮肤组织坏死创面的护理效果观察

[目的]探讨异种脱细胞真皮基质对老年输液外渗性皮肤组织坏死创面护理效果。[方法]选择2014年9月 2018年6月在西安某三级甲等医院接诊的7例输液外渗导致皮肤组织坏死老年病人作为研究对象,给予自溶性和利性清创后,应用异种脱细胞真皮基质(ADM)覆盖等措施治疗。[结果]经过(46.43±21.38)d治疗,换药(13.29±5.94)次,全部创面二期愈合。[结论]异种脱细胞真皮基质的应用有助于减少输液外渗性皮肤组织坏死创面渗液和换药次数,加快康复进程。

脱细胞真皮基质修复急性外伤性皮肤缺损的临床研究

目的 改善皮肤移植的功能和形态 ,提高急性外伤性皮肤缺损治疗的临床效果。方法 应用自制脱细胞真皮基质与自体薄皮片复合移植于 2 3例 (2 6次 )外伤性皮肤缺损的创面上 ,观察其成活率和创面愈合后的质量 ,3例再次手术病人留取创面组织进行组织学检查。结果 复合皮移植后的皮片成活率为 10 0 % 2 1例 2 4次 ;余 2例 2次为 90 %成活 ,植皮区光滑平整 ,供皮区无瘢痕增生 ,组织学检测提示复合皮血管化明显 ,胶原排列有序 ,表皮 -真皮连接结构紧密 ,未见急性和慢性排异反应。结论 脱细胞真皮基质与自体薄皮片复合移植能改善外伤性皮肤缺损创面愈合的皮肤质量 ,优于单纯自体皮移植。

脱细胞猪角膜基质体外支持皮肤细胞生长的实验研究

目的探讨脱细胞猪角膜基质体外是否支持皮肤细胞的生长。方法制备脱细胞猪角膜基质(前期实验已完成)。体外培养人皮肤表皮细胞和成纤维细胞,取第3代人皮肤成纤维细胞接种在脱细胞猪角膜基质的中间基质面,培养3d后,将材料翻转,取第3代人皮肤表皮细胞接种在材料的上皮面上,再培养10d后,取细胞-支架复合体制作石蜡切片,HE染色后光镜下观察。结果组织学观察显示皮肤的表皮细胞和成纤维细胞体外均可在脱细胞猪角膜基质上黏附生长。接种10d后,皮肤表皮细胞在材料表面形成复层结构,可见角化的细胞。接种13d可见成纤维细胞存活并在支架层间生长。结论脱细胞猪角膜基质有良好的细胞相容性,在体外能支持皮肤细胞的生长和增生。

不同退变程度人髓核脱细胞外基质支架的生物学特性研究

目的:探索不同退变程度(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ度)人髓核脱细胞外基质(nucleus pulposus decellularized extracellular matrix,NP-dECM)支架的生物学特性,并选取出生物学特性最优的NP-dECM支架。方法:采用Ⅱ型胶原酶消化法提取人髓核间充质干细胞(nucleus pulposus mesenchymal stem cells,NPMSCs),镜下观察人NPMSCs贴壁、细胞形态及生长情况,行流式细胞术检测细胞表面标志物CD73、CD90、CD105、CD34、CD45、HLA-DR,并进行成脂、成骨、成软骨诱导分化,观察人NPMSCs的三系分化能力,以确定其为本研究所需要的种子细胞。采用物理、去污剂联合核酸酶法制备不同退变程度的人NP-dECM支架(分别为Ⅱ-D、Ⅲ-D、Ⅳ-D组)。通过肉眼观、DNA及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)成分的定量和定性检测、扫描电镜等对比,评价不同退变程度的人NP-dECM支架脱细胞的效果。并运用CCK-8法和活/死细胞染色体外评估不同退变程度人NP-dECM支架的细胞相容性。结果:从髓核组织分离培养的人NPMSCs贴壁生长,细胞呈短梭形、纺锤形,第3代人NPMSCs高表达CD73、CD90、CD105等表面标志物,低表达CD34、CD45、HLA-DR等表面标志物,同时人NPMSCs具有成脂、成骨和成软骨分化能力,符合间充质干细胞标准。三种退变程度的人NP-dECM支架肉眼观形态保持完好,电镜下各组支架疏松多孔。HE染色、DAPI染色及DNA测定结果显示三种退变程度的人NP-dECM支架均有效去除了细胞成分。GAG和HYP定量及定性检测结果均显示ECM成分保留良好,GAG保留量从高到低依次为Ⅱ-D组>Ⅲ-D组>Ⅳ-D组,Ⅱ-D组和Ⅲ-D组HYP含量差异无统计学意义,均高于Ⅳ-D组。CCK-8及活/死细胞染色结果表明Ⅱ-D组、Ⅲ-D组和Ⅳ-D组均表现出良好的细胞相容性。结论:Ⅱ度退变的人髓核组织为制备人NP-dECM支架最佳选择。

异种脱细胞真皮基质在外伤性手指皮肤缺损修复中的应用

目的探讨异种脱细胞真皮基质(acellular dermal matrices,ADM)在外伤性手指皮肤缺损修复中的临床应用效果。方法选取2014年1月—2016年10月我院收治的手外伤手指皮肤损伤32例共53指,均予异种ADM修复,观察皮片存活情况、弹性、瘢痕、感觉、主观满意度及运动效果。结果本组术后35指(66.04%)皮片红润,血运建立良好,且皮片外观平整,与正常连接处瘢痕呈平滑的条索状,无大块瘢痕形成,无瘙痒及水泡等异常反应,其中二点辨别觉5~12(8.42±3.52)mm;感觉功能恢复至S4为19指(54.29%),S3为11指(31.43%),S2为5指(14.29%);运动疗效评定优22指(62.86%),良12指(34.29%),可1指(2.86%)。15指(28.30%)皮片部分覆盖组织,血运及肉芽组织生长良好,但因骨或肌腱不能完全覆盖,再次予自体植皮修复后痊愈。3指(5.66%)皮片苍白,软化失活,予再次植皮修复后痊愈。结论应用异种ADM修复手指皮肤缺损皮片存活率高,手指功能恢复良好。

CGF联合脱细胞真皮基质修复兔皮肤缺损的实验研究

目的 探讨脱细胞真皮基质(ADM)联合浓缩生长因子(CGF)对兔全层皮肤缺损的修复效果。方法新西兰兔12只,术前取血制作CGF膜,在兔背部制备2 cm×1 cm的全层皮肤缺损,A组:ADM+CGF、B组:ADM、C组:空白对照。观察愈合情况,Ⅰ/Ⅲ型胶原纤维生长情况以及TGF-β1、VEGF的表达情况。结果A、B组在1周时已实现初级愈合,镜下胶原纤维排列整齐,C组在2周时实现初级愈合,镜下以Ⅰ型胶原纤维为主,胶原纤维排列紊乱;1周时,TGF-β1表达量A组> B组> C组(P<0.05);2周时,A、B组TGF-β1的表达下降,此时C组的TGF-β1呈增长趋势;1、2周时,VEGF表达量A组> B组> C组(P<0.05)。结论 ADM联合CGF修复兔全层皮肤缺损,可加快创口愈合速度、改善创口愈合质量;增加VEGF的释放,稳定调节TGF-β1的释放以利于伤口的愈合。

细胞连接和细胞外基质相关基因在扩张皮肤新生中的表达分析

目的利用生物信息学方法分析细胞连接和细胞外基质(ECM)相关基因在扩张皮肤中的表达。方法下载GEO数据库中大鼠头部扩张皮肤和小鼠背部扩张皮肤的高通量测序数据,筛选差异表达基因(DEGs),对两组DEGs集富集的生物学过程进行GO富集分析和KEGG富集分析,观察扩张皮肤新生过程中细胞连接和ECM相关基因的表达,使用CytoHubba软件分析扩张皮肤新生中的Hub基因。结果大鼠头部扩张皮肤和小鼠背部扩张皮肤的基因表达集中相同的基因共有287个。GO分析和KEGG分析显示两个DEGs集和共有DEGs均富集在表皮发育、细胞细胞连接组织、细胞细胞黏附、ECM的组织、IL-17信号通路上,其中细胞细胞连接基因共有23个,包括黏附连接(Cdh2、Cdh3)和缝隙连接(Gjb2、Gjb6)等在扩张皮肤中表达上调,ECM基因共有15个,包括Serpinb5、Klk7、Mpzl3、Tgm1、Fermt1在扩张皮肤中表达上调。此外,我们表征了富集在表皮发育、细胞细胞连接组织、ECM的组织、细胞细胞黏附的共有DEGs。结论通过生物信息学方法,我们进一步了解细胞连接和ECM相关基因在扩张皮肤新生过程中的表达,为研究机械牵拉介导的扩张皮肤新生机制提供了新的思路。

异体脱细胞真皮基质复合自体刃厚皮片移植在面颈部烧伤后期瘢痕挛缩整形中的应用效果

目的分析异体脱细胞真皮基质(ADM)复合自体刃厚皮片移植在面颈部烧伤后期瘢痕挛缩整形中的应用效果。方法选取2018年1月至2022年4月诸城市人民医院收治的45例面颈部烧伤后期瘢痕挛缩患者作为研究对象,按照整形修复方案分为对照组(n=22)与观察组(n=23),两组均切除面颈部瘢痕组织并松解挛缩,对照组接受自体中厚皮片移植,观察组接受ADM复合自体刃厚皮片移植。比较两组皮片成活率、二次手术率、创面感染率、植皮区及供皮区愈合时间、创面修复效果、颏颈角及颈部主动活动度的矫正度数。结果观察组皮片成活率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组二次手术率、创面感染率比较差异均无统计学意义。两组植皮区愈合时间比较差异无统计学意义;观察组供皮区愈合时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。术后6个月,两组皮肤柔软度、厚度、色泽、血管分布评分均低于术后3个月,差异有统计学意义(P<0.05);两组术后3、6个月皮肤柔软度、厚度、色泽、血管分布评分比较差异无统计学意义。两组术后6个月颏颈角及颈部主动活动度的矫正度数比较差异均无统计学意义。结论面颈部烧伤后期瘢痕挛缩整形中应用ADM复合自体刃厚皮片移植的整形修复效果与自体中厚皮片移植相近,然而复合移植的皮片成活率更高,供皮区愈合时间更短。

异体脱细胞真皮基质作为组织工程皮肤真皮支架的可行性

背景:组织工程皮肤是目前研究皮肤损伤修复重建的重要手段之一,异体脱细胞真皮基质不存在免疫原性,在异体移植时不会发生排斥反应,是比较理想的真皮替代物。目的:观察异体脱细胞真皮基质的组织相容性。方法:以正常人体真皮组织作为对照,通过体外、体内细胞毒性实验检测异体脱细胞真皮基质的组织相容性,以膨胀度、饱和含水量及生物力学分析检测异体脱细胞真皮基质的亲水性及机械性能。结果与结论:真皮基质中未见任何细胞成分,其网孔直径介于100～180μm之间。脱细胞真皮基质组饱和含水量为(69.6±3.97)%,膨胀度2.30±0.42,最大断裂力为(3.082±0.046)N,与对照组相比,差异无显著性意义(P>0.05)。体内外细胞毒性检测,未见明显细胞生长抑制及免疫排斥反应。提示异体脱细胞真皮基质机械性能接近正常皮肤,组织相容性好,免疫排斥反应小,是构建组织工程皮肤理想的真皮材料。

异种脱细胞真皮基质在修复外耳道乳头状瘤手术皮肤缺损中的应用

外耳道乳头状瘤多发生于外耳道外段皮肤,是外耳道最常见的良性肿瘤之一,在中国南方较多见,好发于20-25岁男性。本病有恶变倾向,恶变发生率2%左右。其主要治疗方法为手术切除,但范围较广的外耳道乳头状瘤术后复发率较高,且术后易发生外耳道狭窄。作者采用异种脱细胞真皮基质（海奥口腔修复膜,中美正海生物技术有限公司）修复外耳道乳头状瘤手术后皮肤缺损,现报告如下。

脱细胞异体真皮基质与人脂肪干细胞的生物相容性

背景:脱细胞异体真皮基质具有优良的生物相容性和组织细胞诱导功能。目的:评价人脂肪干细胞与脱细胞异体真皮基质的生物相容性。方法:取健康成年人吸脂术后的脂肪组织分离脂肪干细胞,并行原代与传代培养,传至第3代,将细胞与脱细胞异体真皮基质联合体外培养3,7d,倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞在支架材料上的黏附、生长及增殖情况,并计算细胞在材料上的黏附率;XTT比色法检测细胞的生长增殖情况。结果与结论:脂肪干细胞在支架材料上分布均匀,24h内细胞开始伸展、黏附,二三天完全伸展变形,以梭形为主,呈网状排列;随着培养时间延长,支架上的细胞逐渐增多;人脂肪干细胞细胞与脱细胞异体真皮基质混合培养后平均黏附率为95.03%,并保持正常的生长增殖速度,表明支架对细胞具有良好的黏附性;脱细胞异体真皮基质材料与人脂肪干细胞复合后相容性良好。

戊二醛交联的异种/异体脱细胞真皮基质的制作及临床应用观察(英文)

目的：为降低异种／异体真皮组织的抗原性，便于临床大面积烧伤患者复合皮（ＣＳ）移植的推广．方法：将胰蛋白酶和戊二醛等处理的、含基底膜成分的１８例人（ｈ－ＣＳ）和８例猪（ｓ－ＣＳ）无细胞真皮基质（ＡＤＭ）与自体刃厚表皮一起重叠移植于１３例烧伤患者Ⅲ度切痂创面上，同时以邻近移植的自体刃厚皮（ＯＴＳ）和自体薄中厚皮（ＴＴＳ）为对照，观察无细胞真皮制作前后的组织结构变化和各组皮片移植的成活率及外观效果．结果：ＡＤＭ表面含薄层基底膜成分，组织内附件上皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等细胞消失．临床应用观察，ｈ－ＣＳ和ｓ－ＣＳ组移植的成活率与ＴＴＳ组和ＯＴＳ组比较无显著性差异，未见排异反应，外观平滑、近期无瘢痕增生；ＣＳ组未成活５例，可能与ＡＤＭ制作过厚（＞０．３ｍｍ）、组织内残留戊二醛等因素有关．结论：ＡＤＭ，尤其是ｓ－ＡＤＭ作为自体刃厚皮移植的载体，可能方便于大面积烧伤患者的ＣＳ移植，但其有一定的占位性，制作仍有待改进．

脱细胞基质与血管内皮细胞体外相容性的研究

目的 将猪血管内皮细胞和异体猪血管脱细胞基质相结合 ,探讨开发一种制备血管移植物的新方法。方法 分别利用 0 .1%胰蛋白酶、0 .0 2 %乙二胺四乙酸钠 (EDTA)和 1.0 % Triton X- 10 0对猪主动脉作用 2 4小时和 176小时进行脱细胞。异体猪血管内皮细胞分离出来并进行体外细胞扩增 ,再将脱细胞的血管内表面种植上血管内皮细胞。通过光镜和扫描电镜检测脱细胞血管基质是否存在细胞成分和内皮细胞是否生长其上。 结果 酶 -化学除垢剂的脱细胞方法几乎使细胞完全脱落 ,且基质纤维的三维结构变得疏松。体外扩增的异体猪血管内皮细胞可以种植在脱细胞基质上并且具有伸展和增殖功能。 结论 Triton X- 10 0和胰蛋白酶制备的脱细胞基质与异体猪血管内皮细胞具有良好的生物相容性 ,能结合到一起并在体外生成血管移植物。

应用异体脱细胞真皮基质关闭即刻种植软组织创面的临床研究

目的探讨及评估应用异体脱细胞真皮基质关闭即刻种植软组织创面的临床效果及组织学特点。方法从2005年7月～2005年12月在北京大学口腔医学院种植中心接受即刻种植的患者10例,共10个种植体区域,其中男性4例,女性6例,年龄为26～59岁(平均56.3岁)。10例患者均已完成修复12个月以上(24～29个月)。临床观察追踪异体脱细胞真皮基质愈合情况。Verhoeff氏法染色观察移植的异体脱细胞真皮基质的组织学特点。结果10例患者中未观察到排异反应及明显的炎症反应,仅1例患者于术后20天时出现软组织伤口裂开,愈合帽暴露,种植体骨结合未受影响,直接安放愈合基台,其余9例均为一期愈合。组织学观察提示异体脱细胞真皮基质可有效的关闭即刻种植软组织创面并直接参与了种植体周软组织的愈合。至最后一次复查,10颗种植体未观察到松动或脱落,种植体周围软组织稳定,无炎症发生。结论异体脱细胞真皮基质可有效的关闭即刻种植软组织创面,近期效果满意。