以脱细胞牛心包膜为支架材料构建组织工程化表皮的初步研究

目的:探讨脱细胞牛心包膜(ABP)作为组织工程化表皮支架材料的可行性。方法:体外分离培养SD大鼠皮肤KC,将KC以1×106个/cm2接种于ABP上,用光镜、扫描电镜观察细胞在ABP上的粘附、增殖情况。结果:KC在ABP上种植5 d后,光镜观察可见KC在ABP上单层生长。扫描电镜观察见KC粘附于ABP表面,呈大小不等的集落。结论:ABP可作为组织工程化表皮的支架材料。

PC交联脱细胞牛心包膜的力学性能、稳定性和血液相容性

测定了原花青素(PC)交联的脱细胞牛心包膜(dbpECM)的力学性能、稳定性和血液相容性.实验结果显示,2.5 mg/mL原花青素交联能将拉伸强度从29.1 MPa提高到51.3 MPa,并保持弹性模量基本不变,而抗胶原酶降解能力与戊二醛相当;PC-dbpECM浸泡于D-Hanks溶液中,仅过量未交联原花青素在一周内释放,而交联的PC在PC-dbpECM中保持稳定.1 mg/mLPC即可基本抑制体外钙化.PC或GA交联的dbpECM都有较好的血液相容性,但PC交联明显优于GA.2.5 mg/mL PC交联的dbpECM血小板的粘附率(7.8%)显著低于未交联组(26.1%)和GA交联组(36.6%),表明PC-dbpECM具有较好的抗血栓形成能力.结果表明PC-dbpECM具有良好的力学性能,稳定性和血液相容性,有可能成为制备人工心脏瓣膜的优良材料.

不同交联剂对脱细胞牛心包膜生物材料改性的实验研究

目的 比较1-乙基-3-（3-二甲氨基丙基）碳化二亚胺[1-ethyl-3-（3-dinethylami-nopropyl） carbodimide，EDC]/N-羟基琥珀酸亚胺（N-hydroxysuccininide，NHS）和京尼平对脱细胞牛心包膜的交联效果，为选择最佳交联剂提供依据。 方法 取市售健康成年黄牛心包膜，采用高/低渗溶液法脱细胞，HE染色观察明确无细胞残留。将脱细胞牛心包膜分别采用EDC/NHS（EDC/NHS组）和京尼平（京尼平组）进行交联处理后，行扫描电镜、厚度、交联度、力学性能、变性温度测定和体外降解与细胞毒性实验，评价不同交联剂对脱细胞牛心包膜的改性效果。以单纯脱细胞牛心包膜（脱细胞组）、正常牛心包膜（空白对照组）作为对照。 结果 扫描电镜观察示，两交联组胶原纤维呈相对规则的网状结构，孔径为10-20 μm。与脱细胞组及空白对照组相比，两交联组牛心包膜厚度、变性温度均显著增加（P〈0.05），但两组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。两交联组交联度比较差异亦无统计学意义（t=0.205，P=0.218）。各时间点两交联组降解率均显著低于空白对照组及脱细胞组（P〈0.05）。两交联组弹性模量和断裂应力均较脱细胞组显著下降（P〈0.05），且接近空白对照组（P〉0.05），而断裂伸长率均较空白对照组和脱细胞组显著增加（P〈0.05）；以上指标EDC/NHS组和京尼平组间比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。细胞培养3、5 d时京尼平组细胞毒性均为1级，而EDC/NHS组5 d时达2级。 结论 京尼平交联脱细胞牛心包膜后生物性能优于EDC/NHS。