猪皮细胞外基质促进创伤小鼠再表皮化的实验研究

目的通过小鼠全层皮肤损伤模型研究脱细胞猪皮细胞外基质(ECM)在皮肤再表皮化过程中发挥的作用。方法 50~80日龄长白猪6只,经取皮、去毛、漂洗、生物酶法脱细胞,HE和免疫组化染色后,对脱细胞猪皮的DNA残余,ECM主要成分胶原(Ⅰ~Ⅴ型)和硫酸糖胺聚糖进行检测。24只NOD-SCID小鼠经背部直径1 cm全层皮肤创伤切口模型构建后,随机分为两组,每组12只,分别使用生理盐水和ECM处理伤口,连续28 d观察伤口形态,分别在第3、7、14、28天对动物模型伤口皮肤取材,HE染色观察实验组和对照组创伤修复过程。结果猪皮经去细胞处理变得透明且失去皮肤纹理,经HE染色和DAPI染色,显示无细胞核残留;免疫组化染色显示胶原蛋白、纤连蛋白、弹性蛋白和透明质酸并未因去细胞过程而有较大丢失,基底膜主要构成Ⅳ型胶原、层连蛋白、巢蛋白及串珠素全部保留。经天狼星红染色,脱细胞猪皮中Ⅰ型和Ⅲ型胶原的含量和分布与正常猪皮组织相比未见明显变化。生理盐水组小鼠第28天时,创口愈合,ECM组创口在14 d时愈合,其创伤愈合速度有显著提高。HE染色证实ECM组在第7天时,出现再表皮化进程,第14天时,再表皮化完成,生理盐水组在第28天发生完全的再表皮化。结论经过酶法获得的脱细胞猪皮基质未见细胞核残余,其主要成分得到保留。猪皮ECM明显促进创伤愈合的速度。