酶辅助法提取脱脂葡萄籽蛋白的工艺研究

采用酶辅助碱溶酸沉法提取脱脂葡萄籽中的蛋白质,探讨酶添加量、酶解时间、酶解温度和酶解pH对脱脂葡萄籽蛋白得率的影响。结果表明:酶添加量为1.5%、酶解时间30 min、酶解温度36℃、酶解pH7.5,此条件下脱脂葡萄籽蛋白得率达31.87%,且影响因素的主次顺序为酶解pH>酶解温度>酶解时间。对得到的葡萄籽蛋白的溶解性、乳化性、起泡性进行了探讨。

葡萄籽蛋白质的分离纯化及电泳分析

以脱脂脱酚葡萄籽粕为原料,采用碱液浸提法对籽粕中蛋白质进行提取,确定蛋白质的最佳提取条件为温度88℃、浸提液pH值11.5、料液比1 g∶25 m L、提取时间130 min,该条件下蛋白提取率达到83.5%。结合蛋白提取液性质,设计了一套可行的葡萄籽蛋白质纯化方案,初步确定了纯化方案中几个关键点的工艺参数。利用SDS-PAGE电泳对纯化前后的样品蛋白进行检测分析,发现样品蛋白中主要存在4种蛋白亚基,分子量分别为40、37、19、17 ku,纯化后4种蛋白亚基占总蛋白的相对含量为91.5%。