猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的表达与纯化

为了研究猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的生物学活性,试验以猪葡萄球菌的基因组DNA为模板,PCR扩增ExhA全基因序列,连接到pCold TF表达载体上,构建重组质粒pCold TF-ExhA,将重组质粒转入E.coil BL2（DE3）,IPTG低温诱导目的蛋白可溶性表达,重组表达的蛋白用Ni-IDA琼脂糖纯化树脂纯化,Western-blot及攻毒试验验证表达蛋白质的生物学功能。结果表明：成功构建了pCold TF-ExhA重组质粒,并且脱落毒素ExhA主要以可溶性形式表达,表达纯化的脱落毒素ExhA具有完整的生物学活性。说明表达的脱落毒素ExhA具有良好的抗原性。