脱落细胞DNA定量分析技术动态监测口腔扁平苔藓伴上皮异常增生病情及光动力治疗1例

口腔扁平苔藓是一种临床上常见的慢性炎性口腔黏膜病,具有癌变风险,临床上应积极干预并随访监测。光动力治疗具有微创、有效、选择性好以及可重复性高等优势,在治疗口腔扁平苔藓中已显现出良好疗效,但其疗效评估方法仍然存在局限性。脱落细胞DNA定量分析技术是一种无创辅助检查手段,可用于口腔潜在恶性疾患癌变及口腔癌的早筛早诊。本文报道1例采用脱落细胞DNA定量分析技术动态监测口腔扁平苔藓癌变风险及光动力治疗疗效的诊疗过程,以期为建立口腔扁平苔藓伴上皮异常增生的精准微创诊疗体系提供参考。

微量DNA提取工作站与Chelex-100法提取指纹脱落细胞DNA效果比较

比较Chelex-100法或自动化工作站提取法对脱落细胞提取DNA的效果。方法 选取3名志愿者制作脱落细胞,用两步擦拭法分别提取脱落细胞检材,使用博坤24道全自动DNA提取工作站和Chelex-100方法分别提取模板DNA,用VeriFilerTM Plus试剂盒进行PCR扩增,扩增产物应用3500型全自动荧光分析仪进行检测、分析,并对分析结果进行比较。结果 两种方法提取的DNA模板经过分型分析,均出现了不同程度的丢峰现象,Chelex-100法的STR基因座检出数平均数为15.3,博坤24道全自动DNA提取工作站检出的STR基因座平均数为19.5。结论 本实验中博坤24道全自动DNA提取工作站提取的脱落细胞DNA检出率高于Chelex-100法。

M48磁珠法和Chelex-100法提取脱落细胞DNA的初步比较

目的对M48磁珠法和Chelex-100法提取脱落细胞DNA的检验效果进行比较,为优化提取方法提供参考。方法选取案件受理检材50例烟蒂、50例纺织物品、50例作案工具,根据不同条件分别用吸附法、沾附法获得DNA,采用磁珠法(M48)和Chelex-100法提取后,常规STR检测。结果烟蒂类检材采用2种方法提取DNA,所得结果没有明显差异;纺织物品和作案工具上脱落细胞DNA的提取采用M48磁珠法提取的效果明显优于Chelex-100法。结论相对而言,M48磁珠法更具优势。

Chelex-100法提取脱落细胞检材DNA的实时定量研究

目的研究脱落细胞检材DNA检验的简便有效的提取方法。方法对76份包括帽子、眼镜、牙刷、剃须刀、梳子、口香糖、羊水在内的7种脱落细胞检材采用Chelex-100法提取DNA,在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量,同时用Identifiler复合扩增系统扩增,在ABI3130遗传分析仪上进行STR分型。结果从帽子(头套)中获得的脱落细胞DNA平均含量为8.31ng,眼镜擦拭物上获得的脱落细胞DNA平均含量为6.20ng,牙刷上获得的脱落细胞DNA平均含量为49.40ng,剃须刀擦拭物上获得的脱落细胞DNA平均含量为6.92ng、梳子擦拭物上获得的的脱落细胞DNA平均含量为10.68ng,口香糖的脱落细胞DNA平均含量为16.30ng,羊水的脱落细胞DNA平均含量为320ng。以上76份检材性别及10个以上STR位点分型成功率为75.8%。结论从帽子、眼镜、牙刷、剃须刀、梳子、口香糖、羊水等检材提取的脱落细胞可用Chelex-100法提取DNA作STR分型。

用拭子提取脱落细胞进行DNA检验

随着DNA数据库的建立，法医DNA检验在刑侦破案中正发挥着越来越重要的作用。采用口腔拭子提取口腔脱落细胞进行DNA检验，取材简便又无创伤，成本低。

3种方法联合运用提取人体脱落上皮细胞DNA

目的寻求提高法医物证检验中附有人体脱落细胞载体检材的DNA检出率的方法。方法根据案件检材的具体条件,选择3种提取方法即Chelex-100法、Chelex-100联合有机法和Chelex-100联合磁珠法。结果采用了分步提取DNA法,可充分、有效地提取微量DNA,提高了人体脱落上皮细胞有效DNA的检出率。结论根据第一步提取方法的检测结果,来调整下一步的提取策略,如是否加以纯化浓缩,可增加人体脱落上皮细胞有效DNA的检出率。

咀嚼后甘蔗渣提取人体脱落细胞DNA检验1例

在实际检案中一些易被忽略的微量检材的成功分型为案件侦破提供了更广泛的证据来源。本文作者对1例犯罪现场嫌疑人咀嚼后的甘蔗渣进行了DNA检验，现报道如下。

Chelex100法从贮存食管拉网脱落细胞涂片中提取DNA并作PCR分析的应用和意义

目的 探讨从贮存 2 0年的食管拉网脱落细胞涂片的微量细胞中抽提DNA的方法和可行性 ;比较p5 3基因在正常食管上皮和重度不典型增生上皮中的突变差异。方法 利用螯合型离子交换树脂Chelex10 0作为介质 ,一步法从食管拉网脱落细胞中提取用作PCR分析的DNA ,共提取食管正常上皮与重度不典型增生上皮细胞涂片各 2 4例 ,采用PCR SSCP分析法进行p5 3基因第 7外显子的突变检测。结果 所有 48例标本中微量细胞的DNA抽提均获成功 ;正常食管组p5 3基因第 7外显子均未发生突变 ,重度不典型增生组 5例发生突变 ,其中 3例在 10年、12年、14年后转变为食管癌。结论 Chelex10 0法简便、高效 ,能从微量细胞中抽提DNA ,使对 2 0年前食管拉网细胞涂片进行分子水平的检测成为可能 ;p5 3基因第 7外显子的突变使食管上皮重度不典型增生细胞具有了癌变趋势。

自口腔粘膜上皮脱落细胞中快速提取人基因且DNA的方法比较

目的 建立简单、快速的人基因组DNA的提取方法。方法 用四种不同取材方法采集人口腔粘膜上皮脱落细胞，利用三种不同提取步骤提取人基因且DNA，并将各种方法所提的DNA进行比较。结果 通过对所提DNA进行OD值测定并计算DNA的质和量后发现，用牙签刮取人口腔粘膜上皮细胞、利用细胞裂解法提取的DNA其纯度和产量最高，以各种方法所提的DNA为模板作PCR后均出现了预定条带。结论 用本文建立的人基因且DNA样品的制备方法取材方便、提取简单、对身体无创伤且适合不同需要，值得推广应用。

脱落细胞DNA倍体分析联合肿瘤标志物对良、恶性胸腹水的诊断价值

目的探讨脱落细胞DNA倍体分析联合肿瘤标志物对良、恶性胸腹水的诊断价值。方法收集永康市第一人民医院2020年1月至2022年1月收治的93例胸腹水患者。收取患者腹水进行细胞学病理诊断和脱落细胞Feulgen染色DNA定量分析。采集患者静脉血血清,采用化学发光免疫分析技术测定糖类抗原(CA)125、CA153和癌胚抗原(CEA)。观察脱落细胞DNA倍体分析准确率,计算血清肿瘤标志物阳性率,分析脱落细胞DNA倍体分析联合肿瘤标志物诊断恶性胸腹水的灵敏度和特异度。结果脱落细胞DNA倍体分析发现,恶性胸腹水38例,良性胸腹水55例,检测恶性胸腹水准确率为95.00%(38/40)。恶性胸腹水组CA125、CA153和CEA阳性率高于良性胸腹水组(P<0.05)。脱落细胞DNA倍体分析联合肿瘤标志物诊断恶性胸腹水灵敏度和特异度高于脱落细胞DNA倍体分析或肿瘤标志物单项检测(P<0.05)。结论脱落细胞DNA倍体分析联合肿瘤标志物诊断恶性胸腹水灵敏度和特异度均良好,可提高诊断价值。

三种磁珠法提取脱落细胞DNA的比较

法医DNA鉴定中的脱薄细胞检材是指含有人体皮肤黏膜脱落上皮细胞的检材,是当前刑事案件现场最有可能提取到的生物物证6目前关于：脱落细胞提取纯化方法对比的报道较多,但相同提取方法效果横向比较的研究较少，本研究对IQ磁珠、M48磁珠、ftepFiler磁珠三种常见的鐵珠法提取脱落细胞DNA的检验效果进行比较,为法庭科学实践提供参考依据,现报道如下.

应用QIAamp DNA Micro Kit(50)系统对微量体表脱落细胞DNA的提取纯化方法

衣帽等物上附着的微量体表脱落细胞 DNA 多态性分析成功与否,主要取决于细胞的采集与 DNA 提取技术。在2起交通肇事逃逸案例中探索采用吸尘设备收集细胞、3M 9002A 防尘口罩截流细胞的方法采集微量体表脱落细胞;利用 QIAamp DNA Micro Kit(50)系统提取、纯化 DNA,得到理想的 STR 分型结果。

棉签二次转移法有效提取现场手套印脱落细胞DNA

1案例资料 案例1 某年1月，某市连续发生夜盗农宅案件10余起，价值5万余元。犯罪嫌疑人通过撬扳窗栅爬窗的手段进人室内盗窃，经对现场提取鞋印分析和串并，为两人所为。犯罪嫌疑人在现场接触部位均发现明显的手套印。对其中一起案件进出口一楼窗户窗框上和进入口一楼厨房灶台上的手套印分别进行了棉签转移提取，送DNA室检验，成功检出两个不同高纯度的DNA分型，经数据库比对比中两名贵州籍有盗窃前科的犯罪嫌疑人迟某和周某，成功破获了该串系列案件。

Amicon~ Ultra-0.5超滤离心管在脱落细胞DNA提取中的应用

在法医物证检验中,提取产物的DNA浓度是决定该检材能否被检出和发挥作用的关键因素。当浓度较低达不到检测阈值时,常需要对提取产物进行浓缩,常用的浓缩设备为Microcon-100超滤管,但该设备仅被用于联合有机法及Chelex法来浓缩提取产物。

Kingfisher FLEX自动工作站在批量提取脱落细胞检材DNA中的应用

目的建立基于自动工作站的大批量提取实验室日常检案受理的脱落细胞检材的DNA的方法。方法针对不同的脱落细胞检材分别采用直接剪取法、两步擦拭法、胶带粘取法或负压吸附法提取脱落细胞,应用Kingfisher FLEX自动工作站,结合使用LC-超微磁珠DNA提取试剂盒和Power Plex?18D试剂盒,对现场脱落细胞检材DNA进行批量提取和扩增,计算成功检出STR基因座的检材比率。结果应用该方法,成功检出STR基因座的检材比率为59.7%。结论该方法稳定、高效、检出率高,可用于脱落细胞检材DNA的批量提取。

微量脱落细胞DNA提取纯化方法比较

本文比较了实验室常用的kingfisher flex工作站纯化方案及kingfisher FL纯化方案的检验效果。日常案件检材的检验结果表明运用kingfisher flex方案对微量脱落细胞DNA进行纯化的检测结果优于kingfisher FL方案。实验检材检验结果也提示在微量范围内,kingfisher flex方案优于kingfisher FL方案,在检材DNA含量较多时,两种纯化方案效果相当。

脱落细胞粘取器在现场勘查中提取接触类DNA的应用

脱落细胞的现场提取是当前基层刑事技术工作的难点和重点,为了解决传统提取方法和工具提取效率低、适用范围窄、操作手法复杂、基层推广难度大的困局,因此迫切需要一种可以攻克提取脱落细胞难题的简便有效方法以帮助有效地提高DNA检验的成功率,这正是现阶段使用的一种可适用各种特殊形状载体的脱落细胞粘取器,在攻克提取脱落细胞难题中,发挥了至关重要的作用。