高等植物ABA醛氧化酶的研究进展

ABA醛氧化酶催化ABA生物合成最后一步反应,是ABA合成途径的重要步骤.拟南芥AO3基因编码由1332个氨基酸组成的AOδ蛋白,具有ABA醛氧化酶性质,参与拟南芥叶片的ABA生物合成和调节,其在钼辅因子硫化后才具有活性.AO3由10个外显子和9个内含子组成,其cDNA全长含有198bp5'-非翻译区域,3999bp开放阅读框架区域和121bp3'-非翻译区域,含有与2个铁硫中心和5个钼辅因子结合有关的基序,均为醛氧化酶的保守序列.

太子参醛氧化酶基因克隆及表达分析

目的:获取太子参醛氧化酶(abscisic acid aldehyde oxidase,AAO)基因。方法:基于AAO基因的同源性和太子参转录组数据库,以块根为材料,利用3'-RACE技术和PCR技术克隆获取AAO基因序列,通过qRT-PCR技术检测该基因在太子参茎、叶、须根,不同生长时期及经外源脱落酸及其抑制剂处理后的块根中表达情况。结果:克隆获得太子参Ph AAO基因序列长6 773 bp,含完整开放阅读框(4 053 bp),由10个外显子和9个内含子组成,氨基酸结构预测其含有钼-黄素酶家族基因特有的结构域。qRT-PCR分析显示Ph AAO基因在太子参叶、须根中显著表达,在块根形成的关键时期6月中旬表达量最高;脱落酸和氟啶酮处理后PhAAO基因表达上调,其中氟啶酮处理组较为明显。结论:获得太子参Ph AAO基因序列,并进一步研究该基因的表达情况,为后续研究其功能特点,探讨太子参脱落酸生物合成分子机制奠定理论基础。

外源ABA对叶子花开花及内源ABA合成关键酶的影响

以叶子花‘大红宝巾’(Bougainvillea glabra‘Mrs Butt’)为试材,研究外源脱落酸(ABA)对其开花及其生物合成关键酶含量与活性变化的影响。结果表明:外源ABA对叶子花的成花有促进作用;去甲二氢愈创木酸(NDGA)浓度大于10μmol·L-1时,ABA的合成明显被抑制,低浓度NDGA与高浓度ABA共同作用反而对内源ABA含量的升高具有增效作用;内源ABA的变化趋势与9–顺式–环氧类胡萝卜素双氧合酶(NCED)含量的变化趋势相一致,表明NCED为ABA生物合成途径中的限速酶;外源ABA使玉米黄质环氧化酶(ZEP)、NCED、ABA醛氧化酶(AAO)含量及活性均明显上升,表明ABA能自我催化调节其合成,且单一酶基因或单一酶促反应并不能合理解释ABA水平的变化,推测ABA信号的作用机制是一个由多酶有机统筹系统控制的结果。