藻胆蛋白脱辅基蛋白对其抗氧化活性的影响

探讨了光照和脱辅基蛋白结构对藻胆蛋白抗氧化活性的影响,结果表明,光照下,藻胆蛋白能够产生自由基,黑暗下,则能够清除自由基,因此,藻胆蛋白具有产生和清除自由基的双重功能。在光照下,用SDS(十二烷基硫酸钠)、脲及碱性条件下,对藻胆蛋白进行变性,藻胆蛋白产生自由基的能力消失,清除自由基的能力明显增强,因此,藻胆蛋白清除自由基主要由藻胆色素完成,天然状态下藻胆蛋白中脱辅基蛋白三维结构更有利于色素基因对光能的吸收与传递,这与其在体内的生理功能相一致。

藻红蓝蛋白裂合异构酶对几种脱辅基藻胆蛋白的催化作用

PecE PecF是层理鞭枝藻藻红蓝蛋白α亚基 (α PEC)生物合成的裂合异构酶。以 4种脱辅基藻胆蛋白为底物 ,初步研究了PecE PecF对底物蛋白的催化专一性。结果表明 ,PecE PecF可催化藻蓝胆素 (PCB)与高度同源的层理鞭枝藻不同亚种的α PEC脱辅基蛋白的体外重组 ,也可催化经 12 8位Trp定点突变到Phe而得到的α PEC脱辅基蛋白的体外重组 ,但PecE PecF对PCB与藻蓝蛋白α亚基 (α CPC)脱辅基蛋白的体外重组无催化作用。α PEC脱辅基蛋白的重组不受表面活性剂TritonX 10 0的影响 ,而TritonX 10 0可改进PCB与α

珊瑚藻藻红蛋白β亚基脱辅基蛋白基因克隆与序列分析

首次报道珊瑚藻R-藻红蛋白β亚基基因的全序列.测定的基因序列长为983个碱基,包括β亚基起始密码子上游的10个碱基、β亚基编码区的534个碱基(编码177个氨基酸)、101个碱基的间隔区以及α亚基编码区近5′端的338个碱基(编码112个氨基酸).对其序列在核酸和氨基酸水平上的同源性与已知基因序列的9种红藻作了比较分析,认为β亚基氨基酸序列在红藻分类上具有重要意义.

重组蛹虫草超氧化物岐化酶脱辅基蛋白的表达、纯化及其活性重建

目的表达并纯化重组蛹虫草超氧化物歧化酶脱辅基蛋白,并考查各种金属离子对其活性重建的作用。方法用不含Cu2+和Zn2+的培养基培养重组菌株,并表达重组蛋白,采用DEAE-FF和CM-52进行纯化;在脱辅基蛋白溶液中加入Cu2+、Mn2+、Mg2+、Ni2+或Ag+,测定SOD酶活力的变化。结果蛹虫草脱辅基Cu,Zn-SOD在不含Cu2+和Zn2+的培养基中得到表达,纯化后的样品经SDS-PAGE分析,在相对分子质量17000处出现单一条带,经活性电泳分析无酶活力;脱辅基蛋白活性重建的最适宜Cu2+浓度为0.005mmol/L,但其紫外吸收图谱与天然SOD不同;0.1mmol/L的Mn2+、Mg2+、Ni2+、Ag+重建的酶活力远低于Cu2+重建的cm-SOD的酶活力。结论已成功表达并纯化了蛹虫草脱辅基Cu,Zn-SOD,各种金属离子只能有限地重建脱辅基Cu,Zn-SOD的活性。

超氧化物歧化酶全酶和脱辅基酶胍变性时失活与去折叠的比较研究

利用紫外差吸收光谱和荧光发射光谱等监测手段研究天然铜锌ＳＯＤ（ｈｏｌｏ－ＳＯＤ）和脱铜锌ＳＯＤ（ａｐｏ－ＳＯＤ）在不同浓度胍溶液中的去折叠及活力变化．结果表明ｈｏｌｏ－ＳＯＤ和ａｐｏ－ＳＯＤ分别在４．０和２．０ｍｏｌ／Ｌ胍溶液中去折叠，而分别在２．０和０．５ｍｏｌ／Ｌ胍溶液中其构象尚未发生明显改变时活性几乎完全丧失．提示金属离子对维持酶的整体及活性部位构象具有重要作用，脱去金属离子的酶分子的构象特别是活性部位的构象更易受到变性剂的破坏．

螺旋藻脱辅基异藻蓝蛋白的表达及其抗肿瘤活性研究

目的对螺旋藻脱辅基异藻蓝蛋白(apo-APC)的原核表达、蛋白纯化和抗肿瘤活性进行研究。方法通过基因工程技术,将异藻蓝蛋白基因(apc)克隆至pET28(a),转化JM109(DE3),构建其原核表达载体,并实现apo-APC蛋白在工程菌中高效表达;采用金属离子螯合亲和层析纯化目的蛋白,凝胶电泳分析其纯度,Western blot鉴定;以S180荷瘤小鼠为动物模型,分析apoAPC的抗肿瘤活性。结果通过基因工程技术获得apo-APC蛋白;动物实验显示apo-APC可抑制荷瘤小鼠体内S180肉瘤的生长,升高荷瘤小鼠的白细胞数量。结论螺旋藻藻胆蛋白的抗肿瘤活性至少有部分来自于其脱辅基蛋白。

脱辅基脂蛋白E(ApoE)及低密度脂蛋白(LDL)受体在外周神经中的双向运输

本文用免疫细胞化学法研究正常和再生的大白鼠外周神经中脱辅基脂蛋白E(ApoE)和低密度脂蛋白(LDL)受体的运输特性,发现在正常的外周神经中,ApoE及LDL受体在轴浆中均可沿轴突正行和逆行运输;再生的神经可产生ApoE,ApoE可逆行向细胞体转运。ApoE及LDL受体运输特性的研究为ApoE及LDL受体参与神经损伤后的修复和再生提供了进一步的证据。

杯芳烃及其在生物有机化学中作为脱辅基酶的研究

当代生物有机化学的成就,已证明高效率与高选择性井非以蛋白质为基础的生物催化剂所专有。

藻红蓝蛋白α-亚基脱辅基蛋白与藻蓝胆素的重组

利用在大肠杆菌中表达的藻红蓝蛋白 α-亚基脱辅基蛋白与藻蓝胆素 PCB重组 ,吸收光谱、荧光光谱和高效可逆光化学性质分析表明 ,藻红蓝蛋白 α-亚基脱辅基蛋白与藻蓝胆素直接重组 ,生成的胆素蛋白中辅基色素仍为藻蓝胆素 ;而藻红蓝蛋白 α-亚基脱辅基蛋白与藻蓝胆素在藻红蓝蛋白 α-亚基重组酶 (pec E和 pec F基因的表达产物 )催化下重组 ,生成的胆素蛋白中辅基色素转变为藻紫胆素 ,并具有高效可逆光化学特性。

脱辅基神经红蛋白热稳定性的光谱法研究

采用酸丙酮法制备了脱辅基神经红蛋白(apo-Ngb)。利用紫外-可见吸收光谱和圆二色光谱(CD)对apo-Ngb的热稳定性进行了研究。结果表明,在高温下apo-Ngb发生了变性,其二级结构遭到破坏,α-螺旋的含量减少。计算得到了apo-Ngb热变性的中点温度(61.8℃)和热力学参数(ΔH=93.1 kJ·mol-1,ΔS=277.8J·mol-1·K-1)。与Ngb相比,由于血红素辅基的去除,apo-Ngb蛋白肽链结构变得疏松无序,从而使apo-Ngb的热稳定性有所降低。

脱辅基细胞色素c定向于线粒体的转运特异性研究

用分离纯化的完整线粒体和部分细胞器组分,初步研究了脱辅基细胞色素c在细胞内转运的特异性。完整线粒体用差速离心和密度梯度离心的方法,从幼龄鸡心肌组织中获得,对胞内几种细胞器标志酶比活力的测量表明,纯化的线粒体单胺氧化酶活力提高25.6倍,腺苷酸激酶活力提高3.59倍,细胞色素c氧化酶活力提高5.48倍,外膜完整性达90%以上,呼吸控制率大于20。以上数据表明该纯化的线粒体受胞内其它囊泡成分污染少,外膜完整并具有较高的氧化磷酸化偶联效率;在纯化线粒体的同时,得到另两种细胞器组分-内质网和溶酶体囊泡。体外转录翻译的apo.c与上述几个组分的结合实验表明,完整线粒体与apo.c的结合能力明显高于其它组分。

脱辅基细胞色素C构象的Raman散射研究

脱辅基细胞色素Ｃ构象的Ｒａｍａｎ散射研究童宇峰郁鉴源左晨周群（清华大学化学系北京１０００８４）ＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｎｔｈｅＣｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＡｐｏｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅＣｂｙＲａｍａｎＳｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙＴｏｎｇＹｕｆｅｎｇ，Ｙｕ...

脱辅基脂蛋白B可导致动脉粥样硬化

基因可介导动脉粥样硬化,其介导的程度比通常认为的要大得多。最近在英国进行的一项大约有300名男性参加的试验表明,脱辅基脂蛋白B(apo-B)低密度脂蛋白(LDL)的主要蛋白质成份的基因遗传性突变可增加血浆胆固醇水平和增加对冠心病(CHD)及肥胖症的易感性。

脱辅基血红蛋白的制备和重组

脱辅基血红蛋白的制备和重组周广业陈坚刚周玉祥（清华大学生物科学与技术系１０００８４）本实验是我系生化与分子生物学教研室无机生化科研组根据多年无机生化科研的实践编制的新实验，自１９９０年开始用于生化大实验教学，取得了很好的教学效果。本实验的目的和特点是...

乙醇对细胞色素c和脱辅基细胞色素c的结构转换影响

用紫外 可见吸收光谱、荧光光谱和圆二色谱对细胞色素c和脱辅基细胞色素c在不同的 φ(乙醇 )溶液中的结构进行了表征 .结果表明 ,乙醇对细胞色素c的α 螺旋二级结构影响很小 ,而对血红素配位的影响十分明显 ,可导致血红素Fe Met80配位键断裂 .另一方面 ,乙醇对脱辅基细胞色素c有明显的结构转换诱导作用 ,在 φ(C2 H5OH) =0 .5 5 (乙醇 /水 )溶液中 ,脱辅基细胞色素c的α 螺旋结构含量可以达到全蛋白的 89% .研究结果表明 :负电荷微环境的诱导对脱辅基细胞色素c的结构转换并不是必要的 ,改变溶剂与脱辅基细胞色素c之间的疏水和氢键相互作用力也可以诱导脱辅基细胞色素cα

SP-A、SP-D与肺部天然免疫防御

肺表面活性物质脱辅基蛋白A、D(SP A、SP D)系C型凝集素超家族中胶凝素家族成员 ,是肺部重要的天然免疫防御分子 ,不仅能清除病原体 ,还参与免疫、炎症及过敏反应的调节。

光照、变性剂和pH对钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)别藻蓝蛋白(APC)抗氧化活性的影响

采用不同光照条件、不同浓度的十二烷基硫酸钠 (SDS)和脲 ,以及不同pH等条件处理钝顶螺旋藻别藻蓝蛋白 (APC) ,检测其光谱变化、生成及清除自由基能力的变化 ,对纯化的钝顶螺旋藻别藻蓝蛋白 (APC)在不同条件下的抗氧化活性进行了研究。结果表明 ,光照下 ,APC具有生成自由基的能力 ;黑暗中 ,APC却表现为清除自由基。SDS是一种很强的变性剂 ,1mmol/L的SDS即可以使APC完全变性 ,能量传递功能丧失 ,光照下 ,APC生成自由基的能力丧失 ,自由基清除能力明显增强。 1 6mol/L的脲作用后 ,只使APC部分变性 ,导致APC能量传递效率降低 ,光照下 ,表现为生成自由基的能力下降。随着脲浓度的升高 ( 3 2mol/L、6 4mol/L) ,APC的结构逐渐变化 ,能量传递功能逐渐丧失 ,表现为生成自由基的能力逐渐下降 ,清除自由基的功能逐渐增强。APC具有较宽的pH稳定性 ,在pH为 7— 1 0的范围内非常稳定 ;当pH为 1 1时 ,APC的结构已经发生变化。在日光灯下 ,pH为 7时 ,APC具有生成自由基的能力 ;pH为 8时 ,APC的荧光光谱虽然没有发生变化 ,但它们表现为清除自由基的能力。随着pH的增加 ,自由基清除能力也增强。因此 ,APC具有产生和清除自由基的双重功能 ,光照是调控自由基清除与产生的关键因素 ,并且只有APC具有能量吸收和传递功能时 ,?

鸡蛋黄低密度脂蛋白理化及加工特性研究进展

鸡蛋黄中的低密度脂蛋白(LDL)是纳米级球形大分子物质,密度为0.982 g/m L,主要存在于卵黄浆质部分,由蛋白质与脂质(中性脂、磷脂和胆固醇)组装而成,脂质是LDL的主要组成成分,占其干重的87%,蛋白质仅占12%。LDL脱脂之后的成分为脱辅基蛋白,通过SDS-PAGE得到鸡蛋黄LDL中5个主要的脱辅基蛋白,相对分子质量分别为15 000、60 000、65 000、80 000和130 000,关于鸡蛋黄LDL中脱辅基蛋白的研究主要集中在其分泌转运方面。目前研究结果表明,这些脱辅基蛋白大部分都是由母鸡血液中极低密度脂蛋白(VLDL)的脱辅基蛋白Apovitellenin I和Apolipoprotein B转运而来。LDL具有较好的乳化活性,也被用于动物精液冷冻保存。将针对LDL的理化性质及加工特性的研究进展展开论述。

豆血红蛋白的研究进展

简要介绍了豆血红蛋白的制备分析方法和基本特征及生物学功能 ,概括了其生物合成的机理 ,并初步归纳了近年来有关豆血红蛋白研究方面的主要趋势。

Ⅱ、Ⅳ型高脂血症患者血清apo Al、B及其比值的变化

对31例Ⅱa型、31例Ⅱb型、153例Ⅳ型高脂血症患者及100例年龄相近的正常人血清apoAl、B及其血脂含量进行分析,结果表明,3组高脂血症患者血清apoAl水平均明显降低,apoB及apoB/apoAl比值均明显升高;Ⅱa型高脂血症患者LDL-C明显升高,HDL-C无明显变化;Ⅱb型高脂血症患者LDL-C明显升高,HDL-C明显降低;Ⅳ型高脂血症患者HDL-C明显降低,LDL-C无明显变化;3组高脂血症患者LDL-C/HDL-C比值均明显升高。提示:高脂血症可使血清致动脉粥样硬化(As)因子升高和抗As因子降低,是As的危险因素之一。