脱铁乳铁蛋白铬络合物制备方法的研究

以乳铁蛋白(lactoferrin,LF)和六水三氯化铬为主要原料制备脱铁乳铁蛋白铬,确定脱铁乳铁蛋白与Cr3+络合的条件,并对络合物采用红外吸收光谱进行表征。结果表明:乳铁蛋白经醋酸调pH值到2.25或经柠檬酸调pH值到2.50后,均能使Fe3+游离出来;脱铁乳铁蛋白与Cr3+络合的条件为:温度60～70℃,pH7.0～7.6,脱铁乳铁蛋白与六水三氯化铬物质的量的浓度比1:2,搅拌时间2h以上。

稀土离子与乳铁蛋白结合的光谱研究

用紫外示差光谱、荧光光谱及圆二色谱等方法研究了 Tb3+ 和 Eu3+ 在 p H 7.4的条件下与乳铁蛋白及脱铁乳铁蛋白的结合作用 .结果表明 ,Tb3+及 Eu3+可特异性地结合在脱铁乳铁蛋白的两个 Fe3+结合部位 ,但不能从已经结合铁的乳铁蛋白中把铁置换出来 .测得 Tb3+与这两个部位结合的条件平衡常数为 lg K1 =8.4 8± 0 .2 4和 lg K2 =6.72± 0 .1 8( 2 5℃ ,0 .1 0 mol/L Na Cl,0 .1 0 mol/L Hepes,p H=7.4 ) . Tb3+ 在这两个位点结合时 ,蛋白质的构象发生变化 .在 Tb3+ 与蛋白质的浓度比低时 ,构象趋于紧缩 ,色氨酸残基进入疏水的环境 ;当 Tb3+ 结合得较多时 ,构象转而开放 ,色氨酸残基转向亲水性环境 .但无论哪种情况 ,Tb3+ 与脱铁乳铁蛋白的结合都不影响蛋白的二级结构 .