脱镁叶绿素a和脱镁叶绿素b的联合同步荧光分析法

建立了脱镁叶绿素a和脱镁叶绿素b的联合同步荧光分析法。方法简便快速。脱镁叶绿素a和脱镁叶绿素b的线性范围分别为0～400ng/ml和0～200ng/ml,检出限分别为1ng/ml和0.5ng/ml。

脱镁叶绿素对浮游植物吸收特性的影响

根据2007年6月期间对大连湾的调查数据,分析了脱镁叶绿素对浮游植物吸收特性的影响。由实测数据及相关文献推断出脱镁叶绿素蓝光和红光吸收峰分别位于412和670nm波段,并采用多元线性回归对脱镁叶绿素和叶绿素a的比吸收系数进行研究。结果表明,412nm波段脱镁叶绿素的比吸收系数远大于叶绿素a;440nm波段,叶绿素a的比吸收系数略大于脱镁叶绿素;670、675nm波段,叶绿素a的比吸收系数约为脱镁叶绿素的3倍。随脱镁叶绿素占色素总浓度比例的增大,浮游植物吸收曲线上蓝光吸收峰偏离440nm波段,逐渐向412nm波段靠近,并得到蓝光波段吸收峰的高度由脱镁叶绿素浓度决定,而红光波段吸收峰的高度由叶绿素a浓度决定。色素浓度与吸收系数进行乘幂函数拟合分析表明,412、440nm波段吸收系数与脱镁叶绿素浓度拟合相关性高于叶绿素a,而675nm波段相反。

脱镁叶绿素类化合物及其生物活性研究进展

综述近二十年源自光合植物的脱镁叶绿素类的化学成分及生物活性的研究进展。脱镁叶绿素类化合物从结构上可分为七类,分别为Phaeophytin,Pheophorbide,Chlorophyllone,Purpurin,Corallistin,Bonellin和Benzoporphyri。这些化合物作为光敏治疗的新药来源,表现出细胞毒、抗病毒、抗菌消炎、抗氧化等生物活性。

低温贮藏和短波紫外线辐照对芥蓝采后叶绿素降解及脱镁叶绿素酶活性的影响

采后叶绿素降解造成绿叶蔬菜失绿,直接影响产品的感官品质和货架寿命。以研究芥蓝采后叶绿素降解和脱镁叶绿素酶(PPH)之间的关系为目的,考察了温度以及短波紫外线(UV-C)辐照对贮藏过程中芥蓝叶绿素含量及脱镁叶绿素酶活性变化的影响。结果表明常温22℃贮藏时,PPH活性在前期快速上升,第3d时约为第0d的200%,而在低温4℃时酶活仅为第0d的135%,第3d时叶绿素a的含量是常温时的2.8倍;UV-C辐照降低了PPH活性,第1dPPH酶活仅上升14%,而对照则上升50%,第5d时叶绿素a的含量是对照的1.3倍。因此低温和UV-C辐照抑制了贮藏过程中PPH酶活性的快速上升,从而降低了叶绿素降解的速度。

小麦叶绿素酶及脱镁叶绿素水解酶活性测定条件的优化

叶绿素降解是植物叶片衰老最明显的标志。为探明小麦叶绿素降解途径中叶绿素酶和脱镁叶绿素水解酶2个关键酶反应的最佳环境条件,对其反应的最佳环境温度及时间进行了探讨。结果表明,小麦叶片叶绿素酶的最适反应温度和最佳反应时间分别是40℃和80 min,脱镁叶绿素水解酶的最佳反应温度和最佳反应时间分别是35℃和90 min。该研究结果可为2种酶活性的测定提供重要参考。

海发菜提取物脱镁叶绿素酸盐A对六种癌细胞的光毒性

目的 探讨脱镁叶绿素酸盐A(PPBa)的体外光动力抗肿瘤活性及化学特性。方法 将乳腺癌细胞(MCF-7)、肺癌细胞(A549)、宫颈癌细胞(HeLa)和3种肝癌细胞(HepG2、hep3B、sk-Hep1)接种于96孔板中,MTT法观察PPBa的光毒性和暗毒性大小,光照强度和药物浓度对PPBa光毒性的影响,Hoechst染色在共聚焦显微镜观察PPBa的摄取,活性氧检测试剂盒通过流式检测和共聚焦显微镜下观察单线态氧的产生,根据PPBa自身的发光特性通过酶标仪测吸光度观察PPBa的光漂性。结果 PPBa对6种癌细胞都有极强的光毒性和极低的暗毒性,PPBa的主要摄取部位是细胞质,单线态氧的产生与给药浓度具有强依赖性,光漂性极低。结论 脱镁叶绿素酸盐A对乳腺癌细胞(MCF-7)的光毒性最强,各种性质优良,具有理想的光敏剂特性。

杧果脱镁叶绿素酶基因MiPPH的克隆及植物表达载体构建

叶绿素降解是果实色泽形成过程中一个主要的影响因素。脱镁叶绿素酶(pheophytinase, PPH)是叶绿素降解代谢的关键酶。本研究提取杧果果皮总RNA,采用RACE方法,克隆得到一个脱镁叶绿素酶基因,并对其进行了初步的生物信息学分析。序列分析表明MiPPH基因cDNA序列全长1 267 bp,开放阅读框为1 113 bp,可编码370个氨基酸,分子量为41.73 kD,等电点为5.22。使用NCBI上的Conserved domains分析MiPPH蛋白结构域,结果显示MiPPH含有PLN02578、Abhydrolase_1共2个结构域,其中PLN02578为保守域,其他物种PPH也都含有这个水解酶(Hydrolase)保守域,说明PPH蛋白有高度的保守性。通过BLAST上其他植物的氨基酸序列进行相似性比对,利用DNAMAN生成的系统进化树发现杧果MiPPH蛋白序列和与同为漆树科的开心果的PPH蛋白序列相似度较高,亲缘关系较近。利用定量PCR技术对不同品种中的MiPPH基因表达量进行分析,发现绿色‘桂七’品种表达量最高,而黄色‘金煌’品种表达量最低,黄色‘金煌’品种和红色‘贵妃’品种表达量相差不大。本试验成功构建pCAMBIA2300-GFP-MiPPH植物表达载体,通过农杆菌介导的烟草瞬时表达,亚细胞定位MiPPH主要定位于细胞核。本试验为后续进行PPH基因的功能验证提供试验基础。

盐藻中测定脱镁叶绿素含量的影响因素研究

考察了盐藻中测定脱镁叶绿素含量的过程中,细胞的破碎方法、丙酮及盐酸体积分数等对脱镁叶绿素含量的影响,得出了盐酸体积分数对脱镁叶绿素含量的测定影响最大的结论。并且确定了盐酸配比是25.80%时,测定的脱镁叶绿素的含量较接近标样的实际数值。

植物脱镁叶绿素替代RS601反应中心中的细菌脱镁叶绿素的研究

在一定的温度和丙酮的协同作用下 ,植物脱镁叶绿素a可置换紫细菌RS6 0 1光合反应中心的细菌脱镁叶绿素而形成含有植物脱镁叶绿素的紫细菌光合反应中心 (简称PheaRC) .当协同作用 1 5和 6 0min时 ,反应中心的细菌脱镁叶绿素分别被替代了 5 0 %和 71 % .在PheaRC中 ,细菌脱镁叶绿素的QX( 5 37nm)和QY( 75 8nm)特征峰显著下降 ,而出现植物脱镁叶绿素的QX( 5 0 9/ 5 42nm)和QY( 6 74nm)特征峰 .排除温度和丙酮的影响 ,替代时间为 1 5或 6 0min的PheaRC的光化学活性分别为对照的 78%或 71 % ,其电化学特性也有所变化 .

脱镁叶绿素a-光动力疗法抗前列腺癌的研究进展

脱镁叶绿素a是一种从高等植物和海藻中提取的化合物,具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗氧化和抗肿瘤的药理作用;作为一种天然光敏剂,其与光动力疗法联用,对于多种肿瘤表现出良好的抑制效果。近年来,脱镁叶绿素a在癌症治疗方面的研究取得了重大进展,在抗前列腺癌方面表现出巨大的潜力。该文从脱镁叶绿素a结构特征、应用及抗前列腺癌作用机制方面进行简要综述。

藻类叶绿素及其降解产物的测定方法

本文综述了用分光光度法,荧光检测法及高效液相色谱法测定藻类叶绿素及其降解产物的方法.分别详细介绍了各种方法的设备,程序,计算公式及特点.此外,还介绍了藻类类胡萝卜素的高效液相色谱测定方法.本文按测定方法分为六个部分:(1)叶绿素a,b和c的分光光度法测定(三色法);(2)叶绿素a的荧光检测法;(3)存在脱镁叶绿素a时叶绿素a的分光光度法测定;(4)存在脱镁叶绿素a时叶绿素a的荧光法测定;(5)高效液相色谱(HPLC)测定藻类的叶绿素及它们的降解产物;(6)HPLC测定藻类叶绿素及类胡萝卜素.

涮烫时间对绿叶菜中叶绿素含量影响的研究

菜在涮食过程中随涮烫时间的延长,叶片中的叶绿素被降解的程度逐渐增大,营养成分迅速流失。故涮锅食用绿叶蔬菜时,应把握科学的涮烫时间,最大程度地保留营养。甘蓝和生菜开锅即捞,油麦开锅1 min、油菜开锅3 min、茼蒿开锅5 min时捞起食用,叶绿素的营养最高。但稍微多煮片刻,生成性质更为稳定的脱镁叶绿素,有利于肠胃的杀菌,对肠炎、腹泻等疾病有一定的治疗效果。时间过长则脱镁叶绿素也逐渐降解,营养殆尽。

不同贮藏方式对大白菜叶绿素降解的影响

[目的]研究不同贮藏方式对大白菜贮藏品质的影响,为大白菜的采后保鲜技术提供参考。[方法]以大白菜为试材,将其置入0℃冷库(0.03 mm PE袋包装)和传统窖中,在100 d贮藏期间内测定大白菜中与叶绿素降解相关的生理生化指标。[结果]冷库贮藏能够有效地延缓大白菜的水分损失,维持叶绿素含量,较好地抑制了参与叶绿素降解途径的相关酶活性,其中包括脱镁叶绿素酶(Pheophytinase,PPH)活性、叶绿素酶(Chlase)活性、脱镁螯合酶(Mg-dechelating)活性,而叶绿素过氧化物酶(chlorophyll-peroxidase,Chl-POX)被证实不是参与大白菜叶绿素降解的关键酶;除此之外,还较好地维持了大白菜叶绿体的完整性及其数量。[结论]0℃冷库贮藏结合0.03mm PE包装可有效抑制大白菜叶绿素的降解,对其保鲜效果最佳。

植物材料中叶绿素的动力学方法测定

介绍了用动力学方法同时测定植物叶绿素提取液中的叶绿素和脱镁叶绿素含量。在比较试验的４种叶绿素提取溶剂中，以微碱性的两种溶剂防止叶绿素脱镁的效果更好。

叶绿素a钴(Ⅱ)-烟酰胺的合成

脱镁叶绿甲酯一酸ａ和醋酸钴合成钴（Ⅱ）－脱镁叶绿甲酯一酸ａ，用色谱法分离纯化．钴（Ⅱ）－脱镁叶绿甲酯一酸ａ与烟酰胺反应，合成了一种新的水溶性配合物［Ｃｏ（Ⅱ）（脱镁叶绿甲酯一酸ａ）（烟酰胺）（Ｈ２Ｏ）］，并研究了各步产物的元素分析，可见紫外光谱和傅里叶红外光谱．

擎天凤梨苞片叶绿素代谢关键基因的分离及褪绿的分子机理

【目的】擎天凤梨是一种新潮花卉,其苞片在成花变色过程中常常伴随着绿色的逐渐消退。分离叶绿素生物合成与降解途径的关键基因,探索在苞片变色过程中叶绿素代谢的分子基础和机理,有助于解析呈色苞片中绿色退化的原因。【方法】通过c DNA文库构建及EST批量测序获得叶绿素合成关键酶:谷氨酰t RNA合成酶基因(glutamyl-t RNA synthetase,GTS)和尿卟啉原-Ⅲ合酶基因(uroporphyrinogen-Ⅲsynthase,UROS);通过同源克隆技术获得叶绿素降解关键酶:脱镁叶绿素酶(pheophytin pheophorbide hydrolase/pheophytinase,PPH)基因;通过采用透光系数法测量叶绿素含量、HPLC法测定类黄酮含量以及采用实时定量PCR法测定叶绿素代谢关键基因的基因表达模式,探索呈色苞片中绿色部分消失的分子机理。【结果】获得的GTS(Gen Bank:KP144289),序列长为1 140 bp,编译171AA的蛋白氨基酸序列,并存在Gln RS-cataytic core和Nt-trans superfamily保守区;获得的UROS(Gen Bank:KP144288)c DNA序列长为613 bp,编译188AA的蛋白氨基酸序列,并存在Hem D和Hem D Superfamily保守区;获得的PPH(Gen Bank:KP723523)c DNA序列长为266 bp,编译88AA的蛋白氨基酸序列,并存在Abhydrolase-6保守区。通过对不同变色阶段苞片的叶绿素、类黄酮含量测定以及叶绿素代谢相关基因的表达水平分析,可知苞片变色过程伴随着叶绿素含量的显著降低和类黄酮含量的明显增加,同时叶绿素合成相关的GTS和UROS表达水平也明显降低,而叶绿素降解关键酶基因PPH的表达水平在苞片变色初期显著上升,在变色完成后则降低到接近绿叶状态的最低水平。而作为对照材料的绿叶,其叶绿素含量是最高的,而类黄酮含量是最低的,同时叶绿素的合成相关酶基因表达量最高,而降解相关酶基因表达量最低,这与彩叶植物中叶绿素和类黄酮色素的表现较为一致。【结论】获得了擎天凤梨的叶绿素合成相关酶基因GTS和UROS以及降解关键酶基因PPH。由于叶绿素合成量减少,降解量显著增加引起叶绿素含量的降低,从而影响苞片变色过程中绿色的消退,并伴随类黄酮含量的增加。PPH在叶绿素的降解过程中起关键性作用。

果蔬叶绿素降解机理研究进展

果蔬的绿色主要来源于叶绿素,叶绿素决定了产品的品质特征。由于叶绿素具有极不稳定的化学性质,使其在果蔬贮藏、加工和货架期极易发生降解,导致果蔬褪色或变色,影响产品质量。本文对影响叶绿素降解因素、叶绿素降解的途径等进行概述,探讨控制绿色损失的方法,为叶绿素的进一步研究和相关产品开发提供理论依据。果蔬的色泽是构成其产品品质的重要因素,也是检验果蔬成熟衰老的依据。色泽不仅反映果蔬的新鲜度,还可促进人们的食欲。

荣成靖海湾海参养殖池塘初级生产力季节变化特征

2007年5月-2007年11月调查了山东荣成靖海湾海参养殖池塘水体中浮游植物种类组成、生物量、叶绿素含量变化以及底泥沉积物中叶绿素和脱镁叶绿素含量的变化。结果表明,海参养殖池塘水体中浮游植物共有7门,44属,62种,主要以硅藻为主。水体中浮游植物平均生物量1号池塘为17.52×10^4/L;2号池塘为18.30×10^4/L。水体叶绿素含量变化范围：1号池塘为1.38-5.00μg/L;2号池塘为0.98-5.45μg/L。池塘沉积物中叶绿素含量变化范围：1号池塘为0.66-1.67μg/g,2号池塘为0.56-1.34μg/g。池塘沉积物中脱镁叶绿素含量变化范围：1号池塘为2.97-5.63μg/g;2号池塘为2.90-6.36μg/g。1号池塘和2号池塘的浮游植物群落结构及叶绿素含量没有显著性差异（P〉0.05）。叶绿素,脱镁叶绿素变化趋势较为一致。海参夏眠期间,沉积物中叶绿素及脱镁叶绿素含量最高,为海参结束夏眠进入摄食提供食物储备。研究结果表明,靖海湾海参养殖池塘浮游植物以硅藻为主,养殖池塘水体浮游植物生物量较低,多样性指数较高,增加浮游植物沉降速率,增加养殖系统初级生产力可为海参提供更多食物。

胶州湾红岛潮间带底栖微藻种类组成及其生物量变化

2004年2月至2005年3月对胶州湾红岛潮间带底栖微藻的种类、数量和叶绿素a、脱镁叶绿素a的含量及其变化进行了研究。结果显示,胶州湾红岛潮间带底栖微藻种类比较单一,仅鉴定出硅藻和甲藻2门,共有7属10种,其中硅藻门5属8种,甲藻门2属2种,其中圆筛藻属Coscinodis-cus的种类最多,有4种。从数量来看,舟形藻Naviculasp.的数量最高,占底栖微藻总量的24.6%,其次是曲舟藻(Pleurosigmasp.),占底栖微藻总量的15.8%,中心圆筛藻Coscinodiscus centralis和多甲藻Peridiniumsp.的数量最少,均占总量的1.8%。底栖微藻的个体数量为303～226364cell/m2,年平均数量为22685cell/m2。季节变化明显,冬季和春季数量高于夏季和秋季,冬季最高,夏季最低。各站叶绿素a的含量变化基本和底栖微藻的数量变化一致,表现为冬季和春季高,夏季和秋季低,而脱镁叶绿素a的含量变化刚好相反。叶绿素a和脱镁叶绿素a的含量均随取样深度的增加而减少,但叶绿素a的含量在0～15mm的深度内急剧降低,而后维持在较低的含量,相比之下,脱镁叶绿素a的含量降低比较缓慢。