高效液相色谱法测定家蝇细胞色素P450O-脱甲基活性

建立了以乙酸乙酯/正己烷为终止剂(含1%H3PO4)和萃取剂,利用高效液相色谱,ZORBAXEclipseXDBC18色谱柱,梯度洗脱,在316nm检测,外标法分析对硝基苯酚的生成量,表征家蝇粗酶液中细胞色素P450催化的对硝基苯甲醚O-脱甲基活性的新方法。本方法的检出限为0.1ng;分析精密度的RSD为1.02%;0.351,1.755和8.755μg对硝基苯酚3个添加水平的回收率为92.34%～87.60%;回收率的RSD为2.64%～5.90%;对硝基苯酚在9.72～486ng范围内,线性关系良好,r=0.9995。应用本方法比较了家蝇吡虫啉抗性品系与敏感品系细胞色素P450的活性差异。结果表明,家蝇抗性品系的P450O-脱甲基活性是敏感品系的3.34倍;细胞色素P450活性的提高是家蝇对吡虫啉产生抗性的一个重要机制。

6种增溶剂对棉铃虫细胞色素P450 O-脱甲基活性的影响

比较了 6种增溶剂对棉铃虫细胞色素P4 5 0O 脱甲基活性的影响。结果表明 ,在匀浆缓冲液中加入Polyoxyethyleneetherw 1,棉铃虫细胞色素P4 5 0的O 脱甲基活性为 37 80U (mOD·min-1·larva-1) ,是对照的 1 34倍 ;经Chaps、胆酸钠、Emulgen 911、Emulgen 913、Triton X10 0增溶处理后 ,O 脱甲基活性分别为 2 2 7,2 7 5 8,9 6 4 ,14 77和 19 86U ,分别是对照的 97% ,98% ,34% ,5 2 %和 70 %。对照中只有 79 2 %的个体能够被检测到活性 ,而在Polyoxyethyleneetherw 1处理中 10 0 %的个体都能够被检测到活性。因此Polyoxyethyleneetherw 1可以作为棉铃虫抗药性生化机理及生化检测、细胞色素P4 5 0分离纯化等方面研究的有效增溶剂。

应用毛细管气相色谱法检测棉铃虫细胞色素P450 O-脱甲基活性

依据毛细管气相色谱法灵敏度高 ,样品用量少 ,分辨率高的特点 ,建立了一个用于检测棉铃虫Helicoverpaarmigera幼虫中肠和脂肪体细胞色素P45 0O -脱甲基活性产物的小型反应体系 ( 875 μL) ,其中含 0 1mol L ,pH 7 8Tris HCl缓冲液 ,0 5 μmol,NADPH ,7 5 μmolMgCl2 ,0 0 85 %BSA ,0 1 5 7mmol对硝基苯甲醚及酶液。利用毛细管气相色谱直接检测该反应体系中棉铃虫细胞色素P45 0的O -脱甲基产物对硝基苯酚。

LC-MS/MS法同时测定曲马多和代谢物O-脱甲基曲马多的血药浓度及其药动学研究

目的：建立同时测定术后患者应用曲马多后的曲马多和活性代谢物O-脱甲基曲马多（M1）血药浓度的方法。方法：血浆样品50μ1以乙腈溶液150μl（含内标氟康唑）沉淀蛋白处理后，采用液．质联用（LC-MS／MS）法进样测定，色谱柱为zorbaxSB-C18，流动相为O．1％甲酸．5mmoVL乙酸铵溶液．0．1％甲酸乙腈溶液（梯度洗脱）；用于定量分析的离子反应m／z分别为曲马多264．2→58．6、M1250．0→58．6、氟康唑307→220。结果：2种待分析物血药浓度均在5～1000ng／ml范围内线性关系良好，日内、日间RSD均〈10％；方法回收率分别为92．26％～100．01％、88．45％～100．60％。结论：本方法准确、快速、灵敏，可用于曲马多和M1的血药浓度测定及药动学研究。

Chiral Phosphine Ligands Derived fro m Sugars .14 . Crystal Structure of Diphenyl( m ethyl4’,6’-O-benzylidene-3’-deoxy-α- D-altropyranoside-3-)phosphine Oxide

The crystal structure of the title compound, C 26 H 27 O 6P, has been determined by single crystal X ray diffraction analysis. The crystal is orthorhombic with space group P2 12 12 1, a=6.154(4), b=17.199(8), c=22.180(3) , V=2347.6 3, D c=1.32 g/cm 3, F(000)=984, μ=1.5 cm -1 , Z =4, and final R =0.075 and R w =0.080 for 1417 reflections (I≥3σ(I)) . The X ray diffraction analysis revealed that the structure of the title compound s similar to that of its parent phosphine and the pyranose and 4, 6 O benzylidene rings remain distorted chair conformations.

8-喹啉基取代的槲皮素合成研究

槲皮素作为黄酮醇类化合物,广泛存在于许多植物来源的食物中,如谷物类、蔬菜类(洋葱、西蓝花)、水果类(葡萄、苹果、草莓、柑橘、樱桃)、茶叶、咖啡、红酒、果汁等食物。它具有抗氧化,抗炎,抗菌,抗病毒、抗肿瘤等多种生物活性。以槲皮素为先导物的改造吸引了众多研究兴趣。本文以槲皮素C8位,进行喹啉基取代改造,合成了3个新化合物,并对其抗氧化活性进行了测试。

新药纳曲酮中间体合成方法的改进

较系统地探索了用氯甲酸酯类化合物脱Ｎ甲基的反应条件及中间体氨基甲酸酯的水解条件，以Ｌｅｗｉｓ及软硬酸碱理论为指导成功地改进了三溴化硼脱Ｏ甲基方法。

Spinosad对烟草甲生物活性的影响

用含不同剂量Spinosad的烟叶和面粉为食料,研究其对不同形态的烟草甲及幼虫解毒酶的影响;同时配制不同浓度的Spinosad溶液点滴处理烟草甲幼虫。结果表明:Spinosad对烟草甲5龄幼虫的触杀作用和胃杀作用均较弱,但在5、10 mg/kg两种用量下,能完全抑制烟草甲卵的有效孵化和烟草甲成虫的繁殖,在处理后3～18个月内,Spinosad对烟草甲的防效分别为87.11%～99.11%和96.89%～100%;同时,Spinosad对烟草甲幼虫体内的羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽转移酶(GSTs)和O-脱甲基酶活性均有明显的诱导作用,并对羧酸酯酶的动力学常数Vmax和Km也有一定影响。

3-二甲氨基苯酚的合成

以间氨基苯甲醚为起始原料,经过N-二甲基化反应,O-脱甲基化反应,合成得到重要的医药、染料中间体3-二甲氨基苯酚,经过工艺优化,收率达到80.0%,并得到了适宜于工业化的合成路线。

调控爪哇正青霉生物合成8-异戊烯基柚皮素的关键酶鉴定及性质研究

采用对硝基苯酚法建立爪哇正青霉生物转化合成8-异戊烯基柚皮素体系中O-脱甲基酶酶活的分光光度测定方法;研究生物催化合成8-异戊烯基柚皮素的过程;采用3种经典的细胞色素P450酶抑制剂对P450酶和生物转化反应之间的关系进行鉴定;研究O-脱甲基酶的酶学性质。研究结果表明,生物转化体系中O-脱甲基酶酶活力在第4天达到最大值,其最适反应温度60℃,最适p H 8.0。